[發明專利]以氯丙嗪為基礎的豬精子常溫及低溫稀釋液

在審

• 申請號: 201811542488.5
• 申請日: 2018-12-17
• 公開（公告）號: CN109757467A
• 公開（公告）日: 2019-05-17
• 發明（設計）人: 陳忠法;王偉;錢國英;尹尚軍
• 申請（專利權）人: 浙江萬里學院
• 主分類號: A01N1/02
• 分類號: A01N1/02
• 代理公司: 寧波市鄞州金源通匯專利事務所(普通合伙) 33236
• 代理人: 龔丹宇

本發明公開了一種含氯丙嗪為基礎的豬精子常溫稀釋液，和含氯丙嗪和中華鱉卵黃為基礎的豬精子低溫稀釋液。常溫稀釋液可以將豬精子體外保存溫度降低到10℃，最適合溫度為12℃。低溫保存的精子可以降低到4℃，最適合溫度為6℃。經過組織學分析，降低溫度保存后，精子頂體的完整性明顯好于常溫保存。

技術領域

本發明涉及一種精子稀釋液，特別是以氯丙嗪為基礎的豬精子常溫及低溫稀釋液。

背景技術

隨著我國養豬業不斷集約化、專業化、生態化和科技化發展，豬的人工授精技術在現代養豬業中受到越來越多的關注。但是豬精子體外保存目前通常是在16.5～17℃保存，一旦低于此溫度會嚴重影響豬精子的活力與存活率。豬精子對溫度的改變特別是降溫非常敏感，但溫度較高會導致精子的能量消耗過高，因此有必要研究豬精子的低溫保存的稀釋液。

發明內容

本發明的目的是為了解決上述現有技術的不足而提供一種以氯丙嗪為基礎的豬精子常溫及低溫稀釋液，從而延長豬精子的保存時間。

為了實現上述目的，本發明所設計的一種以氯丙嗪為基礎的豬精子常溫稀釋液，所述常溫稀釋液包括氯丙嗪為基礎的細胞休眠體系、緩沖鹽類、營養成分和抗生素。

所述常溫稀釋液為每1L稀釋液中含有氯丙嗪為基礎的細胞休眠系統、葡萄糖11g、果糖17.5g、檸檬酸鈉1.0g、EDTA-2Na 2.35g、碳酸氫鈉1.0g、Tris緩沖液5.65g、檸檬酸2.9g、青霉素0.1-0.3g、鏈霉素0.1-0.3g；其配置方法是將上述原料經攪拌后溶解在水溶液中，過濾除菌后冷凍保存備用；使用時和精子按照一定體積比例等溫稀釋即可。

本發明還公開了一種以氯丙嗪為基礎的豬精子低溫稀釋液，所述低溫稀釋液包括氯丙嗪為基礎的細胞休眠體系、中華鱉卵黃液、緩沖鹽類、營養成分和抗生素。

所述低溫稀釋液為每1L稀釋液中含有氯丙嗪為基礎的細胞休眠系統、離心后備用的中華鱉卵黃液20mL、葡萄糖30.0g、蔗糖40.0g、檸檬酸鈉4.0g、青霉素0.1-0.3g、鏈霉素0.1-0.3g、DMSO(二甲基亞楓)10-40g；其配置方法是將上述原材料經攪拌后溶解在水溶液中，過濾除菌后冷凍保存備用；使用時和精子按照一定體積比例等溫稀釋即可。

所述離心后備用的中華鱉卵黃液的制備方法是在低溫條件下冷凍中華鱉卵，外殼在進行全面消毒后切開取卵黃；卵黃與蒸餾水在室溫下按比例配制成10％的卵黃溶液，過濾離心后取上清液備用。

上述以氯丙嗪為基礎的豬精子常溫及低溫稀釋液，其采用的氯丙嗪為基礎的細胞休眠體系為如下配比的一種或者兩種的混合液：

(1)氯丙嗪1-4mg/mL，哌替啶1-4mg/mL，異丙嗪1-4mg/mL，苯巴比妥10-100μg/mL，氫化麥角堿10-50μg/mL；

(2)氯丙嗪1-4mg/mL，異丙嗪1-4mg/mL，乙酰丙嗪0.2-1.2mg/mL，司巴丁100-200μg/mL，普魯卡因10-40mg/mL。

以氯丙嗪為基礎的豬精子常溫及低溫稀釋液的應用在于以氯丙嗪為基礎來配制豬精子的常溫及低溫稀釋液，從而以誘導細胞休眠的方式來延長豬精子的保存時間。

在物理降溫配合下，氯丙嗪對體溫中樞的抑制作用，可使體溫降到34℃或更低。此時基礎代謝下降，組織耗氧量降低，器官活動減少。氯丙嗪對自主神經受體的阻斷作用，可使肌體對刺激反應減弱。通過這些作用，在其他藥物的配合下，可能使機體進入一種類似變溫動物冬眠的深睡狀態，此即稱為人工冬眠。人工冬眠可降低機體對各種病理刺激的反應，提高各組織對缺氧的耐受力。在病理情況下處于異常收縮的小動脈得以舒張，微循環得到改善。機體在嚴重創傷和感染中毒引起衰竭時得以度過危險的缺氧和缺能階段，為爭取其他措施贏得時間。