[發明專利]一種脂肪酶催化合成雙香豆素類化合物的方法

有效

• 申請號: 201811541810.2
• 申請日: 2018-12-17
• 公開（公告）號: CN109456998B
• 公開（公告）日: 2021-09-28
• 發明（設計）人: 胡燚;傅雅潔;魯澤平;王瑩
• 申請（專利權）人: 南京工業大學
• 主分類號: C12P17/06
• 分類號: C12P17/06
• 代理公司: 江蘇致邦律師事務所 32230
• 代理人: 徐蓓

1.一種脂肪酶催化合成雙香豆素類化合物的方法，其特征在于，包括：以4-羥基香豆素為底物，利用脂肪酶或牛血清蛋白催化進行Knoevenagel-Michael級聯反應與式II化合物生成雙香豆素類化合物，反應方程式為：

其中，Ar為4-ClC₆H₄，2-NO₂C₆H₄，3-NO₂C₆H₄，4-NO₂C₆H₄，4-OHC₆H₄，2-OHC₆H₄，4-CNC₆H₄，4-FC₆H₄，C₆H₅，4-CH₃C₆H₄，4-OCH₃C₆H₄，2-OH-3-OCH₃C₆H₃，2,6-Cl₂C₆H₃，4-C₄H₉C₆H₄，2-SC₄H₃，2-NC₅H₄，3-NC₈H₆，2-OH-4-OCH₃C₆H₃，C₅H₁₁或C₃H₇；

所選脂肪酶選自南極假絲酵母脂肪酶B，Novozym435脂肪酶，來自疏棉狀嗜熱絲孢菌的脂肪酶，酶褶皺假絲酵母脂肪酶，脂肪酶DF，脂肪酶RMIM或豬胰脂肪酶中的一種。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所選脂肪酶為脂肪酶RMIM。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述反應的溶劑為水，異丙醇，甲苯，二氯甲烷，四氫呋喃，乙腈，二甲基亞砜，N,N-二甲基甲酰胺或正己烷中的一種。

4.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，所述反應的溶劑為水。

5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的式II化合物和4-羥基香豆素的摩爾比為1:0.5～4。

6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，所述的式II化合物和4-羥基香豆素的摩爾比為1:2。

7.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的脂肪酶在所述反應中總體積濃度為c，其中0＜c≤30mg/mL。

8.根據權利要求7所述的方法，其特征在于，所述的脂肪酶在所述反應中總體積濃度為10mg/mL。

9.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述反應的反應溫度為25～65℃。

10.根據權利要求9所述的方法，其特征在于，所述反應溫度為45℃。

11.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述反應的反應時間為2～48h。

12.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述脂肪酶催化合成雙香豆素類化合物的方法，還包括反應完畢后過濾并回收溶劑或回收酶的步驟。

13.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述脂肪酶催化合成雙香豆素類化合物的方法，還包括反應完畢的后處理步驟，包括：

(1)將反應完畢后的反應混合液過濾；

(2)濾渣中加入1,4-環氧六環，之后過濾；

(3)將步驟(2)得到的濾液蒸除溶劑，所余固體產物洗滌即得。