[發(fā)明專利]一種檢測抑制素A的試劑盒

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201811537210.9
• 申請日: 2018-12-15
• 公開（公告）號: CN109444432A
• 公開（公告）日: 2019-03-08
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 鄭迪文;史小芹;羅艷容;薛豐民;李曉霞;付光宇;吳學(xué)煒
• 申請（專利權(quán)）人: 鄭州安圖生物工程股份有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/535;G01N21/76
• 代理公司: 鄭州異開專利事務(wù)所(普通合伙) 41114
• 代理人: 王霞

本發(fā)明公開了一種檢測抑制素A的試劑盒，其組分包括包被有第一Inhibin?A抗體的磁微粒混懸液，標(biāo)記有酶標(biāo)的第二Inhibin?A抗體或Inhibin?A抗原的酶結(jié)合物，樣品稀釋液和校準(zhǔn)品；其中第一、第二Inhibin?A抗體的結(jié)合位點(diǎn)不同。第一、第二Inhibin?A抗體可以是單克隆抗體也可以是多克隆抗體。本發(fā)明試劑盒的檢測原理為雙抗體夾心法或競爭法，操作簡單方便，利用抗原抗體的特異性反應(yīng)以及磁珠的強(qiáng)吸附性，通過ELISA技術(shù)測定Inhibin?A抗原，靈敏度高，特異性強(qiáng)，同時(shí)檢測成本較低，省時(shí)省力，可在分子水平將血清中的抑制素A（Inhibin?A）含量快速、定量的檢測出來。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及醫(yī)藥生物類免疫檢測領(lǐng)域，尤其是涉及一種檢測抑制素A（Inhibin-A）的試劑盒。

背景技術(shù)

抑制素是一種由α亞單位和β亞單位組成的異二聚體糖蛋白，是細(xì)胞因子中轉(zhuǎn)化生長因子β(TGF－β)超家族中的一員。在外周血液循環(huán)中, 抑制素有多種存在形式：32 KDa的二聚體 、58-73 KDa的大二聚體 、大的游離α亞單位前體以及游離的處理后α亞單位等多種存在形式。其中, 32 KDa的二聚體為抑制素的成熟形式, 主要包括抑制素A和抑制素B,兩者結(jié)構(gòu)上均含有α亞單位 , 其區(qū)別在于抑制素A的β亞單位為βA 亞單位，抑制素B的β亞單位為βB亞單位。

抑制素B是男性血液循環(huán)中的主要存在形式 ,而抑制素A主要出現(xiàn)在妊娠期間的母體血清中,并有前體、成熟、處理后等多種存在形式。妊娠期間，胎盤可分泌大量的抑制素，尤其在孕晚期外周循環(huán)中所檢測到的抑制素絕大部分是胎盤來源。不同的抑制素形式在組織中的分布是有很大不同的：抑制素A的濃度在通過羊膜腔穿刺技術(shù)抽取得到的羊水中的濃度較高；男性胎兒血清中，可檢測到抑制素B,不能檢測到抑制素A，女性胎兒血清中兩種抑制素均不能檢測到；而在母體血清中，有較高水平的抑制素A，而抑制素B的水平通常檢測不到；非妊娠期間的母體血清中也是無法檢測到抑制素A的。

在妊娠期間, 母體血清中抑制素A水平根據(jù)孕周的不同而有所變化。抑制素A的濃度從妊娠早期幾周的低水平開始上升，晚期顯著升高 ,足月時(shí)可達(dá)到妊娠開始時(shí)水平的多倍。抑制素A水平的變化在妊娠10周達(dá)到高峰而后開始下降，在孕15-25周基本處于相對穩(wěn)定的狀態(tài)，孕25周后再次開始上升至足月時(shí)達(dá)到另一高峰。

妊娠期間母體胎盤合體滋養(yǎng)層細(xì)胞可分泌或生成HCG和抑制素A，且HCG可刺激抑制素A的產(chǎn)生，抑制素A在血清中的濃度與HCG也存在一定的相關(guān)性,尤其與intact-HCG的相關(guān)性最為明顯。Yung Hang Lam 等也報(bào)道了在正常妊娠者和唐氏綜合征妊娠者中,血清抑制素A濃度與HCG濃度均具有相關(guān)性，但是與AFP、uE3之間并沒有相關(guān)性，因此，抑制素A可用于孕中期唐氏綜合征的篩查。

此外，抑制素A可在孕早期子宮內(nèi)膜蛻膜化、胚胎植入、滋養(yǎng)細(xì)胞種植和分化中起到一定調(diào)節(jié)作用，其血清表達(dá)水平的下降與先兆流產(chǎn)的發(fā)生密切相關(guān)，也可用來預(yù)測先兆流產(chǎn)的結(jié)局，且預(yù)測價(jià)值高于β-HCG及孕酮。血清中抑制素A、CA125、β-HCG、孕酮等項(xiàng)目的聯(lián)檢也用于先兆流產(chǎn)的檢測。

目前市場上常見的對抑制素A的方法學(xué)檢測為時(shí)間分辨熒光法，其缺點(diǎn)主要是檢測時(shí)間長。

磁微粒化學(xué)發(fā)光法是以化學(xué)發(fā)光法平臺發(fā)展起來的新型檢測方法，此方法是將磁性分離技術(shù)、化學(xué)發(fā)光技術(shù)、免疫分析技術(shù)三者結(jié)合起來的一種新興分析方法，該技術(shù)充分利用了磁性分離技術(shù)的快速易自動(dòng)化性，化學(xué)發(fā)光技術(shù)的高靈敏度性，以及免疫分析的特異性，在生物分析領(lǐng)域有較大的應(yīng)用前景。如果能開發(fā)出一種采用磁微粒化學(xué)發(fā)光法來檢測抑制素A的試劑盒，則可使檢測更加快速方便。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種檢測抑制素A的試劑盒，該試劑盒利用磁微粒化學(xué)發(fā)光法檢測快速、靈敏度高、全自動(dòng)化的優(yōu)勢，較時(shí)間分辨熒光法具有較大的優(yōu)勢。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明可采取下述技術(shù)方案：