[發(fā)明專利]HPLC檢測管萼山豆根中4種生物堿含量的方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201811537090.2
• 申請日: 2018-12-14
• 公開（公告）號: CN111323496A
• 公開（公告）日: 2020-06-23
• 發(fā)明（設計）人: 董愛文;姚姝鳳;成江
• 申請（專利權）人: 長沙湘資生物科技有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發(fā)明建立HPLC法同時測定管萼山豆根中苦參堿，金雀花堿、氧化苦參堿、N?甲?；鹑富▔A4種生物堿的方法，采用Boston Green ODS PC₁₈(4.6*250mm,5μm)柱，乙腈?0.2％磷酸(含0.01％三乙胺)為流動相，流速0.8mL/min，檢測波長220nm，柱溫30℃。建立的HPLC方法簡便、快速，重現(xiàn)性良好，適合該藥材生物堿的定量測定，為藥材選擇與質量控制提供一種簡單有效的方法。

所屬技術領域

本發(fā)明涉及一種HPLC檢測管萼山豆根中4種生物堿含量的方法，屬于檢測技術領域。

背景技術

管萼山豆根(Euchresta tubulosa Dunn)是豆科山豆根屬植物，又名鄂豆根、胡豆蓮、豆根、鴉片七(湘西地區(qū))，民間習用根莖，利咽喉，治腹脹、腹痛，主要產自湖北西北、湖南、四川。山豆根屬植物性苦寒，具有較強的清熱、鎮(zhèn)痛、消炎和抗癌等作用，對治療咽喉痛、牙痛、胃腹痛、毒蟲咬傷等有良好療效。在武陵山區(qū)的土家族將管萼山豆根譽“信譽極高的民族藥”，同屬植物山豆根(E.japonica Hook.f.ex Regel)在日本民間用于抗癌、抗心律不齊、消炎和治療潰瘍。尹玉琴等研究發(fā)現(xiàn)，管萼山豆根總生物堿也具有鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛及降溫等中樞系統(tǒng)抑制作用，目前尚未見有關管萼山豆根中生物堿類化合物的含量測定報道，我們已經從管萼山豆根莖中分離得到苦參堿，金雀花堿、氧化苦參堿、N-甲?；鹑富▔A。

發(fā)明內容

本發(fā)明通過建立HPLC法同時測定4種生物堿的含量，為今后該藥材及同屬藥材選擇和評價提供依據。

一種HPLC檢測管萼山豆根中4種生物堿含量的方法，包括以下步驟：

(1)生物堿提?。汗茌嗌蕉垢⑶o、葉于50℃烘干后粉碎,過30目篩，加入純凈水，其中加入水量L與管萼山豆根重量kg比1:25-350，超聲20-40min后，75-85℃回流提取2h，提取后濾紙過濾1次，加水定容至1500mL，作為生物堿樣品溶液；

(2)HPLC檢測：色譜柱為Boston Green ODS PC18(4.6*250mm，5μm)柱，流動相為乙腈-0.2％磷酸水溶液，流速0.8mL/min，柱溫30℃，檢測波長220nm，進樣量10μL，其中乙腈與0.2％磷酸水溶液的體積L比為0.04:0.76。

所述0.2％磷酸水溶液中優(yōu)選含有0.01％三乙胺的0.2％磷酸水溶液。

技術效果

1、本發(fā)明方法可以快速檢測管萼山豆根根、莖、葉中苦參堿，金雀花堿、氧化苦參堿、 N-甲酰基金雀花堿這四種生物堿。

2、節(jié)省時間、提高效率，為今后該藥材及同屬藥材選擇和評價提供依據。

附圖說明

圖1對照品及樣品HPLC：a—對照品圖譜；b—樣品圖譜(莖的水提物)；0溶劑峰，1金雀花堿，2苦參堿，3氧化苦參堿，4N-甲酰基金雀花堿；

圖2苦參堿的含量對比圖；

圖3氧化苦參堿的含量對比圖；

圖4金雀花堿的含量對比圖；

圖5 N-甲?；?金雀花堿的含量對比圖；

圖6管萼山豆根根、莖、葉中幾種生物堿的含量對比圖。

具體實施方式

下面，本發(fā)明將用實施例進行進一步的說明，但是它并不限于這些實施例的任一個或類似實例。

實施例1