[發明專利]一種定向快速富集中藥尤其桑葉中目標成分的方法

有效

• 申請號: 201811536664.4
• 申請日: 2018-12-14
• 公開（公告）號: CN109718574B
• 公開（公告）日: 2021-04-16
• 發明（設計）人: 郭威;曲永勝;鄒文;王亮
• 申請（專利權）人: 山東省中醫藥研究院
• 主分類號: B01D11/04
• 分類號: B01D11/04
• 代理公司: 北京知本村知識產權代理事務所(普通合伙) 11039
• 代理人: 劉江良

本發明提供了一種富集中藥目標成分的方法，其特征在于，將目標成分在兩相溶劑體系中的分配比處于0.2?5，先進行下相萃取上相多次，再上相萃取下相多次。更具體的涉及定向快速富集桑葉中目標成分的方法，將桑葉粗提后的樣品采用正己烷?乙酸乙酯?甲醇?水溶劑體系進行下相萃取、上相反萃，完成目標成分的定向快速富集。通過本發明的方法實現目標成分的定向快速富集和大部分雜質的去除，該方法不同于以往的液液萃取，可實現目標成分的大量定向快速富集，大大減少目標成分的損失，并除去大部分雜質。

技術領域

本發明屬于植物成分提取，尤其是中藥中的目標成分提取領域，更具體涉及富集桑葉中目標成分的方法。

背景技術

中藥成分復雜，尤其是微量成分，為了進一步的分析或分離，通常需要對樣品進行進一步的濃縮富集處理，以提高目標成分的含量。

目前，樣品富集常用的方法主要有溶劑萃取法，色譜法，固相萃取法等。溶劑萃取法一般采用甲醇、乙醇、正丁醇、乙酸乙酯、石油醚、正己烷等有機試劑進行提取或萃取，處理樣品量較大，但是對目標成分缺乏專屬性，最終樣品中含有大量其他雜質，一般隨后會結合色譜法進行進一步切分和富集，效率低效果差。

傳統的色譜法富集技術如大孔樹脂、硅膠柱色譜、凝膠柱色譜等方法，通常存在分離效率低、周期長、重現性差、溶劑耗費高、樣品死吸附、填料昂貴、小微量成分易丟失等缺點，而且色譜法處理的樣品量取決于色譜柱的容量，實驗室中一般可達到百克級，最終富集的產品一般可達毫克級，為了獲得更多樣品需要多次進行色譜富集，時間、人力、試劑成本極高。

固相萃取法本質屬于色譜法，是近年發展的較新的快速富集技術，具有快速、高選擇性、低溶劑耗費、效率高等優點，多用于生物樣品、食品藥品等中的農藥殘留等痕量或微量成分的富集分析，處理的樣品量較低，一般在微克級至毫克級。

桑葉為桑科植物桑Morus alba L.的干燥葉，初霜后采收，除去雜質，曬干。用于風熱感冒、肺熱燥咳、頭暈頭痛、目赤眼花等病癥，為中醫臨床常用中藥。桑葉中成分復雜，主要含有黃酮類、生物堿類、多糖類、氨基酸類、有機酸類、甾體類、揮發油和鈣、鐵、錳、鋅等微量元素。現代研究發現，桑葉具有多種生物活性如抗菌、抗病毒、抗氧化、抗腫瘤、調節血糖、減肥及皮膚美白等功效，作用非常多樣化。因此，研發富集桑葉目標成分，以用于進一步提取具有重要意義。

發明內容

中藥成分極為復雜，分離純化單體化合物最主要的限速步驟在于分離之前的前處理——富集，故對目標成分的富集是十分重要的步驟，可為后續研究提供更好的基礎，而本發明的目的在于探索一種比以往富集方法更加快速、簡便、處理樣品量更大的定向處理方法，用于中藥復雜基質中目標成分的大量定向快速富集。所述目標成分可以是已知成分，也可以是今后進一步研究的對象，本發明方法可以根據檢測到的色譜峰進行定量，之后就可以根據峰面積計算分配比，并不必須要求事先知道成分具體是什么。

本發明的技術原理是發明人經過研究分析提出。假設一樣品存在三組成分（每個組分由一個或多個化合物組成）：雜質1，目標成分A，雜質2，其在反相色譜中保留時間如圖1，在兩相體系中的分配系數分別為K₁、K_A、K₂，則三組成分的極性由大到小順序為：雜質1目標成分A雜質2，三組成分K值大小順序為：K₁K_AK₂。

分配系數 （1）