[發明專利]一種假單胞菌屬降油菌L-1及其微生物混合菌劑和石油污染土壤原位修復方法

在審

• 申請號: 201811529597.3
• 申請日: 2018-12-14
• 公開（公告）號: CN109482638A
• 公開（公告）日: 2019-03-19
• 發明（設計）人: 楊博麗;張冕;徐迎新;王祖文;蘭建平;高銀鎖;譚愛兵;李澤鋒;米志學;席仲琛;謝濤;陳文博;姚蘭;劉小會;張曉慶
• 申請（專利權）人: 中國石油集團川慶鉆探工程有限公司;中國石油集團川慶鉆探工程有限公司長慶井下技術作業公司
• 主分類號: B09C1/10
• 分類號: B09C1/10
• 代理公司: 西安吉盛專利代理有限責任公司 61108
• 代理人: 陳東麗

1.一種假單胞菌屬降油菌L-1，其特征在于：分離自油田含油泥砂中,從石油芳烴污染土壤懸液培養得到目的菌株，分離純化得到菌株中選出1株降解能力最強生長最為旺盛的菌株命名為L-1，該降解菌屬于假單胞菌屬(Pseudomonadaceae),其保藏編號為CGMCCNO.16557，其DNA序列如SEQ NO<400>1所示。

2.包含權利要求1所述的一種假單胞菌屬降油菌L-1的微生物混合菌劑，其特征在于：含有土著菌和保藏編號為CGMCC NO.16557的假單胞菌屬降油菌L-1，假單胞菌屬降油菌與土著菌液按質量比為1:3～1:6制成菌懸液。

3.一種采用權利要求2所述微生物混合菌劑的石油污染土壤原位修復方法，其特征在于：

(1)將所需微生物混合菌劑菌株先進行復活，再擴大培養，發酵生產，備用；土著菌為芽孢桿菌屬(Bacillus encimensis strain encimensis)、糞產堿桿菌(Alcaligenesfaecalis strain)、黃色類諾卡氏菌(Nocardioides luteus)、不動桿菌屬(Acinetobactersp)、草酸青霉菌(Penicillium oxalicum)，將微生物混合菌劑中6株菌劑按照假單胞菌屬降油菌L-1：芽孢桿菌屬：糞產堿桿菌：黃色類諾卡氏菌：不動桿菌屬：草酸青霉菌菌液體積比為1：1：1：1：1：1～1.1：1.1：1.1：1.1：1.1：0.5的比例放入發酵罐里25～35℃，170～230r/min發酵備用；

(2)按照4％(wt)～6％(wt)添加微生物混合菌劑及菌劑營養液NS-1，使土壤中C:N:P＝100:10:1～100：10：5；每天進行翻土通風和澆水，增加供氧量，保持水分40-50％；

(3)定期檢測含油率、原油組分及微生物活動狀況，加強過程監測和控制。

4.如權利要求3所述石油污染土壤原位修復方法，其特征在于：所述微生物混合菌劑對石油降解的條件是溫度25-35℃、pH在7-8之間、總溶解固體TDS在0-800ppm之間。

5.如權利要求3所述的一種石油污染土壤原位修復方法，其特征在于：土壤中加入菌劑營養液NS-1以培養所述假單胞菌屬降油菌L-1及所述微生物混合菌劑，所述營養液NS-1配方：

硝酸銨(NH₃NO₃)：1.5-2.5g/L

磷酸氫二鉀(K₂HPO₄)：1-2g/L

磷酸二氫鉀(KH₂PO₄)：2.5-3.5g/L

硫酸鎂(MgSO₄)：0.01-0.1g/L

氯化鈣(CaCl₂)：0.01-0.02g/L

氯化鈉(NaCl)：0.3-0.6g/L

硫酸亞鐵(FeSO₄)：0.01-0.02g/L

乙二胺四乙酸鈉(Na₂EDTA)：0.01-0.02g/L。