[發明專利]一種自然殺傷細胞外泌體和大分子樹枝狀聚合物的組合物

在審

• 申請號: 201811528078.5
• 申請日: 2018-12-13
• 公開（公告）號: CN109432050A
• 公開（公告）日: 2019-03-08
• 發明（設計）人: 王國勝
• 申請（專利權）人: 王國勝
• 主分類號: A61K9/51
• 分類號: A61K9/51;A61K47/34;A61K47/46;A61K35/17;A61K48/00;A61P35/00;A61P31/04;A61P31/10;A61P31/12
• 代理公司: 北京華際知識產權代理有限公司 11676
• 代理人: 李浩

本申請涉及一種自然殺傷細胞外泌體和大分子樹枝狀聚合物的組合物。具體涉及一種納米顆粒，其包含自然殺傷細胞外泌體(Exos)的外殼，和聚酰胺?胺(PAMAM)樹枝狀聚合物的內核；內核加載miRNA。具體還涉及一種藥物組合物，其包含納米顆粒，和NKExos。所述的納米顆粒或者所述的藥物組合物用于治療癌癥或感染，為腫瘤或非腫瘤疾病的臨床治療提供新的治療思路和實驗基礎。

技術領域

本發明涉及生物醫學領域，具體自然殺傷細胞外泌體和大分子樹枝狀聚合物的組合物。

背景技術

用于癌癥治療的靶向藥物遞送系統由于其高遞送效率和最小副作用，逐漸受到廣泛的關注。近期有研究發現一種生物膜偽裝策略，并且認為其在癌癥治療中具有很大的潛力。該策略涉及涂有天然生物膜組份的納米載體，使其在表面功能化。許多類似的膜已被用于制造仿生核殼納米粒子，包括來自紅細胞(RBC)、血小板、細菌、白細胞(WBC)、癌細胞的膜。然而，無一例外地，核-殼納米顆粒的制造需要通過細胞裂解和膜純化來提取質膜材料。這一過程極大地增加了污染和破壞功能性表面蛋白的風險。前者導致免疫原性增加，后者導致材料的功能下降。因此，對于其臨床應用而言，獲得功能性和高度生物相容性的材料至關重要。

外泌體(exosomes或Evs)是納米級細胞外脂質雙層囊泡，其直徑范圍為30nm至150nm，幾乎所有的細胞都分泌它們。自然殺傷(NK)細胞，已知在腫瘤免疫學中發揮關鍵作用，分泌的外泌體表達殺傷蛋白，包括FASL和穿孔素，涉及對多種腫瘤的靶向細胞毒性。有研究證明NK細胞外泌體(NKExos)具有腫瘤特異性積累，對正常組織沒有細胞毒活性。同時，酸性腫瘤微環境也可以促進這種納米粒子的積累。因此，NKExos可以執行促進腫瘤靶向和直接抗腫瘤劑的雙重功能。此外，NKExos易于處理，因為它們是穩定的囊泡，可在-80℃下保持其生物活性至少兩年。更重要的是，基于NK細胞的療法可以應用在同種異體的場景中，不引起移植物抗宿主病(GvHD)。因此，在合成過程中，過量的游離NKExos不會引起副作用，但由于它們自身的性質而具有抗腫瘤作用。此外，使用整合的NKExos而不是破碎的膜作為納米顆粒的外殼也避免了免疫原性物質被污染，比如傳統的膜制備過程中的功能蛋白質的分解。因此，對NKExos進行深入研究，有助于為腫瘤或非腫瘤疾病的臨床治療提供新的治療思路和實驗基礎。

發明內容

為了解決現有技術中的問題，本發明研究了一種自然殺傷細胞外泌體(NKExos)和大分子樹枝狀聚合物的組合物，具體是一種新型的仿生核殼聚合物，以及一種仿生核殼聚合物和NKExos的組合物。

本發明提供了一種納米顆粒，其包含外泌體(Exos)和大分子樹枝狀聚合物。

在一個方面中，所述納米顆粒具有核-殼結構；優選的，所述Exos作為納米顆粒的外殼，所述大分子樹枝狀聚合物作為納米顆粒的內核。

在一個方面中，所述大分子樹枝狀聚合物選自酪氨酸偶聯的大分子樹枝狀聚合物；優選的，所述大分子樹枝狀聚合物選自聚酰胺-胺(PAMAM)樹枝狀聚合物。

在一個方面中，所述Exos選自免疫細胞外泌體；優選的，所述Exos選自自然殺傷細胞外泌體(NKExos)。

在一個方面中，所述Exos與所述大分子樹枝狀聚合物的質量比為4：1～1：4。

在一個方面中，所述內核進一步加載基因治療劑；優選的，所述基因治療劑選自核酸片段；更優選的，所述核酸片段選自DNA、RNA。

在一個方面中，所述核酸片段選自miRNA；優選的，所述miRNA的核苷酸序列如SEQID NO:1所示。

本發明提供了一種藥物組合物，其包含之前所述的納米顆粒，和之前所述的NKExos，以及任選的，藥學上可接受的載體。

在一個方面中，所述米顆粒與所述NKExos的質量比為4：1～1：4。