[發(fā)明專利]抗H7N9全人源單克隆抗體3F12及其制備方法與應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201811526028.3
• 申請(qǐng)日: 2018-12-13
• 公開（公告）號(hào): CN111320685B
• 公開（公告）日: 2022-03-08
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 萬曉春;李俊鑫
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國科學(xué)院深圳先進(jìn)技術(shù)研究院
• 主分類號(hào): C07K16/10
• 分類號(hào): C07K16/10;C12N15/13;C12N15/85;C12N5/10;G01N33/577;G01N33/569;A61K39/395;A61P31/16
• 代理公司: 北京市誠輝律師事務(wù)所 11430
• 代理人: 范盈

本申請(qǐng)涉及抗H7N9全人源單克隆抗體3F12及其制備方法與應(yīng)用。利用記憶B細(xì)胞PCR方法快速篩選全人源單克隆抗體3F12，不含任何鼠源成分。本申請(qǐng)抗體可靶向結(jié)合H7N9病毒的血凝素HA，具有顯著地抗H7N9病毒感染的中和活性；本申請(qǐng)抗體不發(fā)生抗鼠抗抗體等毒副作用，具有更好的生物相容性，更適合和更有潛力成為治療流感病毒的大分子藥物。

技術(shù)領(lǐng)域

本申請(qǐng)屬于免疫學(xué)領(lǐng)域，具體地涉及抗H7N9全人源單克隆抗體3F12及其制備方法與應(yīng)用。

背景技術(shù)

在2015年全球十大暢銷藥中，有6個(gè)是全人源或人源化單克隆抗體藥物。排名第一的是艾伯維公司治療關(guān)節(jié)炎的抗TNFa單克隆抗體Humira，這是一個(gè)全人源單克隆抗體，已經(jīng)是連續(xù)3年銷售額100億以上的藥王。從1986年第一個(gè)單克隆抗體藥物上市開始，單抗藥物經(jīng)歷了鼠源單抗藥物(如Orthoclone OKT3)、嵌合單抗藥物(Rituximab)、人源化單抗藥物(Herceptin)和全人源單抗藥物(Humira)等階段。由于人體出現(xiàn)抗鼠抗體反應(yīng)(HAMA)，鼠源單抗藥物、嵌合單抗藥物已經(jīng)逐漸被淘汰，目前占據(jù)市場的單克隆抗體藥物全都是人源化單克隆抗體藥物。與國際先進(jìn)的人源抗體生產(chǎn)技術(shù)相比，深圳乃至全中國都有很大差距，主要表現(xiàn)在人源抗體藥物領(lǐng)域的創(chuàng)新能力薄弱，自主研發(fā)的品種少，目前還沒有原創(chuàng)人源化單克隆抗體藥物上市的報(bào)道，龐大的抗體藥物市場被國外藥企占領(lǐng)。我國要改變落后局面，爭奪消費(fèi)潛力巨大的國內(nèi)外抗體藥物市場，亟需攻克全人源單克隆抗體技術(shù)。

人源單克隆抗體在治療炎癥、癌癥特別是流行性感冒方面具有高特異性的顯著療效。流行性感冒是由流感病毒引起的傳染性疾病，嚴(yán)重威脅人類健康。全球每年約有10億人受季節(jié)性流感病毒感染，其中有25-50萬人死亡。H7N9病毒是一種流感病毒，對(duì)傳統(tǒng)的抗病毒藥金剛烷胺(amantadine)和金剛烷乙胺 (rimantadine)有耐藥性，目前尚沒有有效治療手段。H7N9病毒在入侵細(xì)胞時(shí)需要依賴病毒自身表達(dá)的特定分子與人細(xì)胞上的受體結(jié)合，才能感染細(xì)胞，并進(jìn)一步擴(kuò)增。中和病毒的人源抗體是人B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的某些特異抗體，能夠與病毒表面的抗原結(jié)合，從而阻止該病毒黏附靶細(xì)胞受體，防止病毒侵入細(xì)胞，能夠高效防治H7N9流行性感冒。

發(fā)明內(nèi)容

一方面，本申請(qǐng)涉及抗H7N9全人源單克隆抗體3F12或來源于該單克隆抗體的能夠中和H7N9病毒的生物活性片段。

另一方面，本申請(qǐng)涉及編碼所述抗H7N9全人源單克隆抗體3F12或來源于該單克隆抗體的能夠特異性結(jié)合H7N9的生物活性片段的基因及含該基因的載體或細(xì)胞。

另一方面，本申請(qǐng)涉及產(chǎn)生所述抗H7N9全人源單克隆抗體3F12的方法。

另一方面，本申請(qǐng)涉及包含所述的抗H7N9全人源單克隆抗體3F12或來源于該單克隆抗體的能夠特異性結(jié)合H7N9的生物活性片段的藥物組合物。

另一方面，本申請(qǐng)涉及本申請(qǐng)所述的抗H7N9全人源單克隆抗體3F12或來源于該單克隆抗體的能夠特異性結(jié)合H7N9的生物活性片段或所述藥物組合物的應(yīng)用。

另一方面，本申請(qǐng)涉及一種檢測H7N9病毒的試劑盒。

附圖說明

圖1為實(shí)施例1中NTH-3T3表達(dá)CD40L的流式檢測結(jié)果圖。

圖2為實(shí)施例1中流式細(xì)胞儀分選記憶B細(xì)胞結(jié)果圖。

圖3為實(shí)施例1中ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果圖。

圖4為實(shí)施例3中和實(shí)驗(yàn)結(jié)果圖。

具體實(shí)施方式

為了對(duì)本發(fā)明的技術(shù)特征、目的和有益效果有更加清楚的理解，現(xiàn)對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行以下詳細(xì)說明，但不能理解為對(duì)本發(fā)明的可實(shí)施范圍的限定。