[發(fā)明專利]一種植物乳桿菌S3-10及其篩選方法和應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201811521804.0
• 申請日: 2018-12-13
• 公開（公告）號: CN110272837A
• 公開（公告）日: 2019-09-24
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 張瑤;宋元達(dá);劉慧婕;周長春;王艷霞
• 申請（專利權(quán)）人: 山東理工大學(xué)
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/02;A23L2/38;A23L2/52;A23L2/60;C12R1/25
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本發(fā)明公開了一種植物乳桿菌S3?10及其篩選方法和應(yīng)用，所述植物乳桿菌S3?10保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號為CGMCC No.16751。該菌株具有良好的耐酸、耐鹽、耐糖特性，在發(fā)酵果蔬汁、開發(fā)益生產(chǎn)品方面有廣闊應(yīng)用前景。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及食品微生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種植物乳桿菌S3-10及其篩選方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)

乳酸菌是指能發(fā)酵碳水化合物（主要是葡萄糖）產(chǎn)生出大量乳酸的一類在自然界中廣泛分布的革蘭氏陽性細(xì)菌的通稱。由于乳酸菌具有營養(yǎng)、健康的特殊功效，風(fēng)靡在歐、美、日、韓等市場，并被廣泛應(yīng)用于保健食品、飲料、肉制品、乳制品等食品及預(yù)防醫(yī)學(xué)領(lǐng)域。

由于社會的發(fā)展和人民的生活水平、消費水平的日益提高，國內(nèi)的飲料市場發(fā)生著翻天覆地的變化，人們逐漸追求天然、健康和營養(yǎng)的飲料。德、日、韓等一些國家早已對發(fā)酵果蔬飲料進(jìn)行了大量研究與開發(fā)，特別是日本，其果蔬飲料市場的發(fā)展趨勢已經(jīng)進(jìn)入了良好軌道。國內(nèi)的研究者亦已就一些果蔬原料進(jìn)行了乳酸菌發(fā)酵方面的探索，并取得了初步的進(jìn)展。研究中用于果蔬發(fā)酵的乳酸菌多為牛奶發(fā)酵菌株，其利用果蔬能力有限且耐酸性很差，因此不能夠有效地發(fā)酵果蔬原料產(chǎn)生良好的風(fēng)味和營養(yǎng)物質(zhì)。因此，篩選適用于果蔬發(fā)酵的專用型乳酸菌能夠縮短果蔬發(fā)酵時間，生產(chǎn)出更營養(yǎng)，風(fēng)味更佳，安全性更高的果蔬發(fā)酵產(chǎn)品。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明針對上述問題，提供一種植物乳桿菌S3-10及其篩選方法和應(yīng)用.

發(fā)明目的通過以下方案實現(xiàn)：一種植物乳桿菌S3-10（Lactobacillus plantarum S3-10），于2018年11月16日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號為CGMCC NO. 16751。

進(jìn)一步的，植物乳桿菌S3-10（Lactobacillus plantarum S3-10）的形態(tài)特征為：圓形菌落，凸起，光滑，細(xì)密，淡黃色或者灰白色，革蘭氏陽性，無芽孢，寬為0.9~1.2 微米、長為3~8 微米的短桿狀，單個、成對或成短鏈。

進(jìn)一步的，植物乳桿菌S3-10（Lactobacillus plantarum S3-10）的16S rDNA全序列如SEQ ID NO.1所示。

進(jìn)一步的，植物乳桿菌S3-10（Lactobacillus plantarum S3-10）具有較強(qiáng)的耐酸、耐鹽、耐糖的特性。

進(jìn)一步的，植物乳桿菌S3-10（Lactobacillus plantarum S3-10）在發(fā)酵果蔬汁中的應(yīng)用。發(fā)酵工藝配方為：西瓜汁33.3%、葡萄糖5%、蔗糖5%，氯化鈣0.5%、氯化鈉3%，檸檬酸0.1%。植物乳桿菌S3-10以5%的接種量接種到上述配方中， 37℃恒溫厭氧培養(yǎng)18 h后，產(chǎn)酸量為18.63 mol/L，活菌數(shù)保持在（2.00-2.20）×10⁹ cfu/mL。

一種分離植物乳桿菌的方法，取沂源山地蘋果產(chǎn)區(qū)的蘋果樣品，粉碎并稀釋后吸取溶液涂布至含有溴甲酚紫的MRS固體培養(yǎng)基中，37℃恒溫厭氧培養(yǎng)24 h；挑選凸起、淡黃色菌落在酸性MRS固體培養(yǎng)基（pH 2.0）中培養(yǎng)進(jìn)行初選，然后挑選目標(biāo)菌落繼續(xù)在高鹽MRS固體培養(yǎng)基（添加10%NaCl和0.5%碳酸鈣)中進(jìn)行復(fù)選，挑選黃色鈣圈明顯的單菌落連續(xù)傳代培養(yǎng)不少于3次，得到純化的單菌落。挑選該單菌進(jìn)行革蘭氏染色、過氧化酶接觸反應(yīng)、吲哚實驗、石蕊牛乳實驗及乳酸層析等進(jìn)行乳酸菌的鑒定。將鑒定后的乳酸菌加入滅菌甘油液體培養(yǎng)基于-80℃保存?zhèn)溆谩?/p>

附圖說明