[發(fā)明專利]一種滇黃精組織培養(yǎng)預處理方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201811515856.7
• 申請日: 2018-12-12
• 公開（公告）號: CN109349116B
• 公開（公告）日: 2020-05-22
• 發(fā)明（設計）人: 岳健;王曉;陶俊鋒;蘇娟;李昆華;鈔晶晶;韓鄲;張萬巧;楊丹
• 申請（專利權）人: 云南山里紅生物科技有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 昆明人從眾知識產(chǎn)權代理有限公司 53204
• 代理人: 王娟

本發(fā)明公開一種滇黃精組織培養(yǎng)預處理方法，通過選擇當年生帶有隱藏芽點的滇黃精塊莖，挖除隱藏芽點，再對基質(zhì)進行處理、烘干和高壓滅菌，然后將滇黃精塊莖種植于溝中，用基質(zhì)填平，覆蓋帶孔薄膜，期間噴水漂白水等，待長出新芽點，在無菌狀態(tài)下切取芽點，即為外植體。本發(fā)明與傳統(tǒng)的滇黃精外植體脫毒方法相比，不僅降低了生產(chǎn)滇黃精組培苗的污染率，同時大大提高了滇黃精外植體的消毒率和萌發(fā)率，使得滇黃精組培苗獲得率提高50%以上，而且節(jié)省成本、操作簡便環(huán)保。經(jīng)過本發(fā)明預處理的外植體經(jīng)過常規(guī)組織培養(yǎng)過程后形成的組培苗，比一般消毒的外植體經(jīng)過常規(guī)組織培養(yǎng)過程后形成的組培苗品質(zhì)更好。

技術領域

本發(fā)明屬于中藥材植物組織培養(yǎng)技術領域，特別涉及一種滇黃精組織培養(yǎng)預處理方法。

背景技術

滇黃精（Polygonatum kingianum Coll. et Hemsl.）為百合科黃精屬草本植物，是我國特有的藥用植物資源，《中華人民共和國藥典》（2015 版一部）確定：百合科植物滇黃精（Polygonatum kingianum Coll. et Hemsl.）、黃精（Polygonatum sibiricum Red.）或多花黃精（Polygonatum cyrtonema Hua）為中藥黃精的基源品種，分布于以云南為中心的西南地區(qū)，以塊大、色黃、潤澤、斷面透明的優(yōu)良品質(zhì)著稱；具有補氣養(yǎng)陰、健脾潤肺、益腎等功能，還有文獻報道黃精具有抗病原微生物、延緩衰老、抗腫瘤、降血糖、抗運動疲勞、免疫調(diào)節(jié)、保護心血管等作用。

隨著經(jīng)濟和社會發(fā)展所需，滇黃精的藥學研究開始逐漸開展，并不斷增多和加深，滇黃精作為藥食同源的中藥材，在中藥復方制劑中用量增多，市場需求不斷增大，野生資源卻不斷萎縮，相對需求量急劇上升。傳統(tǒng)滇黃精的人工種植繁殖方式主要有兩種：通過種子進行有性繁殖和通過根莖進行無性繁殖，而滇黃精種子萌發(fā)率低，育苗生長周期長，根莖繁殖這一方法繁殖系數(shù)低，根莖用量大且不經(jīng)濟；均限制了滇黃精生產(chǎn)和種植規(guī)模。

近幾年興起的滇黃精組織培養(yǎng)技術，很好地解決了種子萌發(fā)率低、育苗生長周期長、根莖繁殖系數(shù)第、成本高的問題，但在進行滇黃精組培苗大規(guī)模生產(chǎn)的過程中發(fā)現(xiàn)，外植體污染率較高，導致在初代培養(yǎng)和繼代培養(yǎng)時大批量的種苗受到污染，增加了生產(chǎn)成本，同時延長了生產(chǎn)周期。因此，對滇黃精快速繁殖的研究多數(shù)停留在試驗階段，在生產(chǎn)上應用較少。

目前大多數(shù)滇黃精組織培養(yǎng)方法中，針對外植體污染率高的問題，通常是在將外植體進行滅菌、消毒處理后得到無菌外植體，再進行初代培養(yǎng)，比如申請?zhí)枮?01210286566.6的中國專利申請公開了一種黃精組織培養(yǎng)方法，將塊莖用洗滌劑液浸泡后再用75%酒精、0.2%升汞、0.15%吐溫20等進行滅菌消毒，無菌水沖洗后進行初代培養(yǎng)；申請?zhí)枮?01510874700.8的中國專利申請公開了一種滇黃精組織培養(yǎng)方法，將帶芽塊莖用清水洗凈、用清潔劑清洗，用0.1%次氯酸鈉、75%酒精、0.1%升汞以及無菌水進行脫毒處理；申請?zhí)枮?01710290369.4的中國專利申請公開了滇黃精的育苗方法，取生長旺盛的滇黃精根莖，用20%洗衣粉水浸泡、流水沖洗、20%維生素C浸泡，用75%酒精、0.1%氯化汞進行滅菌消毒處理。

上述方法雖然在一定程度上解決了黃精外植體脫毒和滅菌的問題，但依然存在消毒滅菌率低、培養(yǎng)后污染率大、對外植體存在毒害等問題。

發(fā)明內(nèi)容

為解決現(xiàn)有滇黃精組織培養(yǎng)技術中外植體滅菌消毒難、污染率高、對外植體存在毒害等問題，本發(fā)明提供一種滇黃精組織培養(yǎng)預處理方法。

本發(fā)明通過下列技術方案實現(xiàn)：一種滇黃精組織培養(yǎng)預處理方法，包括以下步驟：

（1）滇黃精塊莖的選取及處理