[發明專利]一種同時檢測甲型和乙型流感病毒的試紙條及制備方法

在審

• 申請號: 201811512277.7
• 申請日: 2018-12-11
• 公開（公告）號: CN109580946A
• 公開（公告）日: 2019-04-05
• 發明（設計）人: 胡濤;廖生赟;陳建東;張貴
• 申請（專利權）人: 深圳市億立方生物技術有限公司
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569;G01N33/558;G01N33/577;G01N33/533;G01N21/64
• 代理公司: 深圳新創友知識產權代理有限公司 44223
• 代理人: 王震宇

一種同時檢測甲型和乙型流感病毒的時間分辨熒光免疫層析試紙條及制備方法，該試紙條包括底板以及依次黏貼在底板上的樣品墊、結合墊、反應膜和吸水墊，結合墊上包被有時間分辨熒光微球標記的甲型和乙型流感病毒單克隆檢測抗體，反應膜包括平行設置且相互間隔的第一檢測區、第二檢測區和對照區，第一檢測區靠近結合墊，對照區靠近吸水墊，第二檢測區位于第一檢測區和對照區中間，第一檢測區、第二檢測區和對照區分別包被有識別單一抗原表位的甲型和乙型流感病毒單克隆捕獲抗體和羊抗鼠IgG抗體。本發明的同時檢測甲型和乙型流感病毒的時間分辨熒光免疫層析試紙條靈敏度高，操作簡單，成本低，檢測時間短，其能夠有效滿足臨床快速檢驗的需求。

技術領域

本發明涉及醫學檢驗技術，特別是涉及一種同時檢測甲型和乙型流感病毒的時間分辨熒光免疫層析試紙條及制備方法。

背景技術

流行性感冒(簡稱流感)是流感病毒引起的急性呼吸道感染，是一種傳染性強、傳播速度快的疾病。其主要通過空氣中的飛沫、人與人之間的接觸或與被污染物品的接觸傳播。典型的臨床癥狀是：急起高熱、全身疼痛、顯著乏力和輕度呼吸道癥狀。一般秋冬季節是其高發期，所引起的并發癥和死亡現象非常嚴重。該病是由流感病毒引起，可分為甲、乙、丙三型，其中甲型所引起的流感流行最為廣泛和嚴重，乙型常引起爆發，丙型則多引起小兒散發病型。甲型病毒經常發生抗原變異，傳染性大，傳播迅速，極易發生大范圍流行。感染后的癥狀主要表現為高熱、咳嗽、流涕、肌痛等，多數伴有嚴重的肺炎，嚴重者心、腎等多種臟器衰竭導致死亡。甲型流感病毒中至今發現能直接感染人的禽流感病毒亞型有：H1N1、H5N1、H7N1、H7N2、H7N3、H7N7、H7N9、H9N2和H10N8，其中H1、H5、H7、H9為高致病性。乙型型流感病毒是一種傳染性強、傳播速度快的疾病。其主要通過空氣中的飛沫、人與人之間的接觸或與被污染物品的接觸傳播。典型的臨床癥狀是：急起高熱、全身疼痛、顯著乏力和輕度呼吸道癥狀。一般秋冬季節是其高發期，可引起局部爆發流行，但不會引起世界性流感大流行。

傳統的甲型流感病毒和乙型流感病毒的檢測方法主要有：

a、熒光PCR法--該方法對模板RNA質量要求高，檢測靈敏度高，但是但需要專門實驗室，檢測儀器昂貴，檢測時間也較長；，檢測靈敏度高；

b、金標法---該法具有快速簡便，易觀察的特點，但是靈敏度不高；

c、病毒分離法---該方法準確，周期長，操作需要專門實驗室；

d、酶聯免疫法---該方法準確，靈敏度高，但是操作復雜，周期長。熒光免疫層析檢測技術具有安全、費用低、操作簡便、可實現床旁快速檢測等優點，其中，時間分辨熒光免疫層析無放射性污染、無背景熒光干擾，其原理為：利用時間分辨熒光微球的熒光強度實現對待測物的定量檢測。該方法作為POCT發展的新方向之一，其具備的檢測結果準確度高、靈敏性好特點，能夠滿足臨床床旁快速檢測和基層社區醫院的需要,成為目前的研究熱點，在臨床檢測中具有廣闊的發展前景。

POCT每一個測試單元都是獨立的，因此無法保證每個測試單元質量都是一樣。基于免疫層析試紙條和儀器都會因溫度、濕度和pH值的不同，影響檢測結果。部分POCT儀器方法學的缺陷，靈敏性和重復性欠佳，線性范圍窄，只是急診或者急求時用于參考，必要時還需送到檢驗科進行復查。

發明內容

本發明的主要目的在于克服現有技術的不足，提供一種靈敏度高、操作簡單、成本低、檢測時間短的甲型和乙型流感病毒時間分辨免疫熒光層析試紙條，使其能夠滿足臨床快速檢驗的需求。

為實現上述目的，本發明采用以下技術方案：