[發明專利]一種灰樹花菌株的培養方法以及一種灰樹花液體發酵方法

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• 申請號: 201811510307.0
• 申請日: 2018-12-11
• 公開（公告）號: CN109355209A
• 公開（公告）日: 2019-02-19
• 發明（設計）人: 張雷;楊淑琴;郭秀茹
• 申請（專利權）人: 遷安貝麗萊生物科技有限公司
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12P1/02;C12R1/645
• 代理公司: 中國商標專利事務所有限公司 11234
• 代理人: 曾海艷

1.一種灰樹花菌株的培養方法，其特征在于，在試管培養階段，試管培養基包括：氮源、碳源、磷酸鹽、硫酸鹽、瓊脂、和栗樹水提溶液；所述氮源優選為馬鈴薯粉、所述碳源優選為葡萄糖，馬鈴薯粉；其中，所述磷酸鹽優選為磷酸的鉀鹽，更優選為KH₂PO₄；所述硫酸鹽優選為MgSO₄。

2.根據權利要求1所述的灰樹花菌株的培養方法，其中，所述栗樹水提溶液是通過包括以下步驟制備的：栗樹與水煮沸10分鐘到3個小時，更優選為10分鐘到1小時，最優選為15-40分鐘；其中，所述栗樹(以干重計)與水重量比例為1：1-100，優選為1:2-50，更優選為1:4-25，最優選為1:8-15；優選地，所述栗樹為植株的枝桿。

3.根據權利要求1或2所述的灰樹花菌株的培養方法，其中，以所述試管培養基的總重量為基準，所述馬鈴薯粉的用量為15-30重量％，所述葡萄糖的含量為1-5重量％，KH₂PO₄的含量為0.1-0.5重量％，MgSO₄的含量為0.05-0.2重量％，VB₁的含量為0.0005-0.003重量％，瓊脂的含量為0.5-3重量％，余量為栗樹水提溶液，且馬鈴薯是通過以下方式加入：將所述用量的馬鈴薯煮水，過濾，將過濾后的液體加入；所述栗樹水提溶液是通過以下步驟制備：所述栗樹(以干重計)與水重量比例為1:8-15，煮沸15-40分鐘。

4.根據權利要求1或2所述的灰樹花菌株的培養方法，其中，所述試管培養基包括VB₁。

5.根據權利要求1或2所述的灰樹花菌株的培養方法，其中，在搖瓶培養階段，搖瓶種子培養液中添加有栗樹水提溶液。

6.一種灰樹花菌株的培養方法，其特征在于，在搖瓶培養階段，搖瓶種子培養液包括氮源、碳源、磷酸鹽、硫酸鹽、和栗樹水提溶液；所述氮源優選為馬鈴薯粉或酵母粉和馬鈴薯粉的組合、所述碳源優選為葡萄糖，馬鈴薯粉；其中，所述磷酸鹽優選為磷酸的鉀鹽和銨鹽，更優選為KH₂PO₄和NH₄H₂PO₄；所述硫酸鹽優選為MgSO₄。

7.根據權利要求6所述的培養方法，其中，所述栗樹水提溶液是通過包括以下步驟制備的：栗樹與水煮沸10分鐘到3個小時，更優選為10分鐘到1小時，最優選為15-40分鐘；其中，所述栗樹(以干重計)與水重量比例為1：1-100，優選為1:2-50，更優選為1:4-25，最優選為1:8-15；優選地，所述栗樹為植株的枝桿。

8.根據權利要求6或7所述的培養方法，其中，所述馬鈴薯粉的用量為0.4-0.8重量％，所述葡萄糖的含量為0.8-3重量％，酵母粉的含量為0.1-0.5重量％，KH₂PO₄的含量為0.08-0.3重量％，MgSO₄的含量為0.01-0.4重量％，NH₄H₂PO₄的含量為0.005-0.02重量％，VB₁的含量為0.0005-0.003重量％，余量為栗樹水提溶液，且馬鈴薯是通過以下方式加入：將所述用量的馬鈴薯煮水，過濾，將過濾后的液體加入；所述栗樹水提溶液是通過以下步驟制備：所述栗樹(以干重計)與水重量比例為1:8-15，煮沸15-40分鐘；其中，所述培養基的pH值優選為5.5-7，更優選為6-6.5。

9.根據權利要求6或7所述的培養方法，其中，所述搖瓶種子培養液還包括VB₁。

10.根據權利要求6或7所述的培養方法，其中，在試管培養階段，在試管培養基中添加有栗樹水提溶液。