[發(fā)明專利]用于免疫試劑的組合物及其制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201811492834.3
• 申請日: 2018-12-07
• 公開（公告）號(hào): CN109358191B
• 公開（公告）日: 2021-07-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 段江波;朱紹榮
• 申請（專利權(quán)）人: 上海榮盛生物藥業(yè)有限公司
• 主分類號(hào): G01N33/52
• 分類號(hào): G01N33/52;G01N33/558;G01N33/533;G01N21/64
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一種用于免疫試劑的組合物，在包被液中添加聚合物，聚合物富含羥基/氨基/羧基，達(dá)到提高熒光層析試紙條靈敏度的目標(biāo)。本發(fā)明的組合物在保證試紙條同等靈敏度的條件下，可降低包被濃度50％，從而降低該試紙條制造成本。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種組合物，尤其涉及一種用于免疫試劑的組合物，達(dá)到提高熒光層析試紙條靈敏度的目標(biāo)。

背景技術(shù)

熒光免疫層析檢測(Fluorescent Immunoassays,FIA)是一種基于側(cè)向?qū)游龇z測技術(shù)建立起來的一種POCT快速檢測技術(shù)手段。相比于傳統(tǒng)的膠體金方法，該方法通過熒光信號(hào)標(biāo)記，既可以定性，也可以定量測定各種病原體的抗原、抗體，該技術(shù)在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)、科研、環(huán)境監(jiān)測和食品安全等有著廣泛的應(yīng)用。

該類試劑常常以完整的試劑盒的方式提供，并且配套專門的閱讀儀，根據(jù)熒光信號(hào)產(chǎn)生方式的不同，可以分為自發(fā)熒光和激發(fā)熒光兩大類。激發(fā)熒光由于斯托克斯位移效應(yīng)的存在，可以在熒光檢測時(shí)保持更底的本地信號(hào)，從低起到提高S/CO值得作用，因此在臨床診斷上應(yīng)用最廣泛。

該類試劑盒的性能指標(biāo)通常包括：分析靈敏度、臨床靈敏度、特異性、精密性、準(zhǔn)確度、線性范圍和穩(wěn)定性等。只有同時(shí)滿足上述指標(biāo)的綜合要求，才能通過注冊上市申請，取得上市銷售許可證。

熒光層析試紙條通常包含以下部件：背板、吸水紙、NC膜、熒光墊和樣品墊。其制備過程包括以下流程：NC膜選型，梅毒抗原包被到NC膜，抗原標(biāo)記到熒光微球，熒光微球裝載到熒光墊，熒光墊粘貼到背板，樣品墊粘貼到背板，吸水紙粘貼到背板，最后組裝好的大板裁切成試紙條。

在試紙條的制備過程中，抗原、抗體包被到NC膜上的操作步驟對試紙條的靈敏度有重要影響，通常要增加試紙條的靈敏度，工程師會(huì)選擇兩種主要解決方案，一種是增加包被濃度，另一種是增加標(biāo)記物濃度。在大部分情況下，這兩種解決方案可以有效提高試紙條的靈敏度。但是在某些情況下，通過這兩種技術(shù)方案難以實(shí)現(xiàn)提高靈敏度的目標(biāo)。為滿足試劑盒的性能指標(biāo)要求，必須采取其他的技術(shù)手段實(shí)現(xiàn)提高靈敏度，才能實(shí)現(xiàn)開發(fā)目標(biāo)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的一個(gè)目的在于提供一種用于免疫試劑的組合物，提高試劑檢測的靈敏度。

本發(fā)明的另一個(gè)目的在于提供一種制備用于免疫試劑的組合物的方法。

本發(fā)明的用于免疫試劑的組合物，通過在包被時(shí)在包被液中添加微量聚合物，該聚合物富含羥基、氨基和羧基之一種或幾種，達(dá)到提高熒光層析試紙條靈敏度的目標(biāo)。

本發(fā)明使用的聚合物為改性殼聚糖，如：但不限于羧甲基殼聚糖、羥丙基殼聚糖、殼聚糖季銨鹽、殼聚糖鹽酸鹽和殼聚糖乳酸鹽，這些物質(zhì)單獨(dú)或組合應(yīng)用于本發(fā)明。

本發(fā)明使用的聚合物為改性纖維素，如：但不限于羥丙基甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉和羧甲基淀粉鈉，這些物質(zhì)單獨(dú)或組合應(yīng)用于本發(fā)明。

本發(fā)明使用的包被液如：但不限于磷酸緩沖鹽溶液(PBs)、碳酸緩沖鹽溶液(CBs)、Tris-HCL、MES、HEPES緩沖液或硼酸-硼酸鈉緩沖液等，pH值范圍為6.0～10.0，濃度為2mM～50mM。

將本發(fā)明的各種改性殼聚糖和/或改性纖維素添加到包被液中，再將包被用抗原或抗體加入到包被液中，最終將上述混合物包被到NC膜上。

由于上述添加劑均為高粘度物料，直接添加到包被液中，容易團(tuán)聚成塊，難以段時(shí)間內(nèi)溶解，使得包被液均一性較差，因此本發(fā)明需要先將改性殼聚糖和改性纖維素配制成2wt％濃度的母液，再將母液添加到包被液中，以便降低最終濃度的誤差。

本發(fā)明包被液使用的聚合物通常只需要選擇一種，特殊情況下也可以選擇兩種以上，此時(shí)可能造成檢測非必要的假陽性結(jié)果。使用聚合物時(shí)，應(yīng)當(dāng)根據(jù)實(shí)際情況使用。較佳的，聚合物的使用濃度為0.001wt％～1.0wt％，尤其是0.01wt％～0.1wt％。