[發明專利]一種用于定量檢測尿液中PPi含量的比率型熒光探針的制備方法有效
| 申請號： | 201811491351.1 | 申請日： | 2018-12-07 |
| 公開（公告）號： | CN109762558B | 公開（公告）日： | 2021-09-14 |
| 發明（設計）人： | 岑瑤;胡琴;徐曉曼;許貫虹;魏芳弟 | 申請（專利權）人： | 南京醫科大學 |
| 主分類號： | C09K11/65 | 分類號： | C09K11/65;G01N21/64;B82Y20/00;B82Y40/00 |
| 代理公司： | 南京經緯專利商標代理有限公司 32200 | 代理人： | 曹翠珍 |
| 地址： | 210029 *** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 用于 定量 檢測 尿液 ppi 含量 比率 熒光 探針 制備 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種用于定量檢測尿液中PPi含量的比率型熒光探針的制備方法，步驟如下：
（1）、合成發射藍色熒光的B-CDs:
以檸檬酸鈉為碳源，谷胱甘肽為鈍化劑，用水熱法在高溫高壓的作用下碳化形成發藍色熒光的B-CDs；B-CDs發射波長范圍在445-465 nm；
(2)、合成發射黃色熒光的Y-CDs：
以1,2,4-三氨基苯為碳源，甲酰胺為鈍化劑，在反應釜中，高溫高壓條件下反應合成發黃色熒光的Y-CDs；Y-CDs發射波長的范圍在545-575 nm；
(3)、合成比率型熒光探針：
將步驟（1）所得B-CDs與步驟（2）所得的Y-CDs混合共孵育，得到在同一激發波長條件下可以同時發射藍色熒光和黃色熒光的比率型熒光探針；比率熒光探針在同一激發波長條件下其藍色熒光和黃色熒光的強度比值為1:1~6:1；
（4）、在步驟（3）的比率熒光探針中加入Fe3+，使得比率熒光探針中的藍色熒光被猝滅；
（5）、將尿液過濾稀釋，加入步驟（4）中的比率熒光探針孵育后，探針的藍色熒光恢復，測定探針的藍色熒光與黃色熒光的比值，根據標準曲線，得到尿液中PPi的含量。
2.權利要求1所述的用于定量檢測尿液中PPi含量的比率型熒光探針的制備方法，其特征在于步驟（4）所用Fe3+濃度為80-300 μM。
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