[發(fā)明專利]一種高密度脂蛋白膽固醇的檢測方法及檢測試劑盒

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201811487662.0
• 申請日: 2018-12-06
• 公開（公告）號: CN109580511A
• 公開（公告）日: 2019-04-05
• 發(fā)明（設計）人: 孫敏;劉振國
• 申請（專利權）人: 濰坊澤成生物技術有限公司
• 主分類號: G01N21/31
• 分類號: G01N21/31
• 代理公司: 北京中索知識產權代理有限公司 11640
• 代理人: 宋濤

本發(fā)明適用于生物檢測技術領域，提供了一種高密度脂蛋白膽固醇的檢測方法及檢測試劑盒，檢測方法采用速率測定法，設置主波長500～546nm，在主波長500～546nm處，反應體系中吸光度的的升高速率與樣本中高密度脂蛋白膽固醇的活性成正比，延遲60～90s，然后測定60～150s的吸光度升高速率，得到高密度脂蛋白膽固醇的濃度。檢測試劑盒包括酶試劑1和酶試劑2，酶試劑1與酶試劑2的體積比為2.8～3.3:1。借此，本發(fā)明能夠排除血清本底的干擾，提高檢測準確度，同時縮短反應時間，提高反應效率。

技術領域

本發(fā)明涉及生物檢測技術領域，具體涉及一種高密度脂蛋白膽固醇的檢測方法及檢測試劑盒。

背景技術

高密度脂蛋白膽固醇(以下簡稱HDL-C)是指高密度脂蛋白分子所攜的膽固醇，是逆向轉運的內源性膽固醇酯，將其運入肝臟，再清除出血液。因此，HDL-C能夠抗動脈粥樣硬化，可減少患冠狀動脈心臟病的危險。

現(xiàn)有技術中，HDL-C的測定方法主要包括免疫分離法、多聚陰離子遮蔽法和酶修飾法等，這些方法均采用終點法測定，終點法測定易受血清本底干擾，而且反應時間長，至少需要5min，大大影響了結果的準確性和測定效率。

綜上可知，現(xiàn)有技術在實際應用中顯然存在不足之處，有必要加以改進。

發(fā)明內容

針對上述技術缺陷，本發(fā)明的目的在于提供一種高密度脂蛋白膽固醇的檢測方法及檢測試劑盒，其采用速率測定法，能夠排除血清本底的干擾，提高檢測準確度，同時縮短反應時間，提高反應效率。

為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供一種高密度脂蛋白膽固醇的檢測方法，所述檢測方法采用速率測定法，設置主波長500～546nm，在主波長500～546nm處，反應體系中吸光度的的升高速率與樣本中高密度脂蛋白膽固醇的活性成正比，延遲60～90s，然后測定60～150s的吸光度升高速率，得到高密度脂蛋白膽固醇的濃度；

檢測步驟如下：

A取空白管、標準管及樣本管，三種管中都分別加入酶試劑1，然后在空白管、標準管及樣本管內對應加入相同體積的蒸餾水、標準液及樣本，混勻后孵育3～5min；再向三種管中都分別加入酶試劑2，混勻，得到反應液；

B所述反應液延遲60～90s后，在主波長500～546nm處讀取吸光度，反應60s后再讀取吸光度，計算平均吸光度變化率，得到空白管、標準管及樣本管內反應液的每分鐘吸光度變化率；

C計算高密度脂蛋白膽固醇的濃度。

根據(jù)本發(fā)明的一種高密度脂蛋白膽固醇的檢測方法，所述酶試劑1包括膽固醇氧化酶和過氧化物酶，所述膽固醇氧化酶的酶活力為1.4～1.8KU/L，所述過氧化物酶的酶活力為1.8～2.2KU/L。

根據(jù)本發(fā)明的一種高密度脂蛋白膽固醇的檢測方法，所述酶試劑2包括膽固醇脂酶，所述膽固醇脂酶的酶活力為1.8～2.2KU/L。

根據(jù)本發(fā)明的一種高密度脂蛋白膽固醇的檢測方法，所述酶試劑1與所述酶試劑2的體積比為2.8～3.3:1。

根據(jù)本發(fā)明的一種高密度脂蛋白膽固醇的檢測方法，所述酶試劑1和酶試劑2的總體積與所述樣本的體積比為100～120：1。

根據(jù)本發(fā)明的一種高密度脂蛋白膽固醇的檢測方法，所述檢測方法還設置副波長700～800nm。

根據(jù)本發(fā)明的一種高密度脂蛋白膽固醇的檢測方法，所述標準液的濃度為2～4mmol/L。

根據(jù)本發(fā)明的一種高密度脂蛋白膽固醇的檢測方法，本發(fā)明還提供一種用于所述檢測方法的檢測試劑盒。

根據(jù)本發(fā)明的一種檢測試劑盒，所述檢測試劑盒包括酶試劑1和酶試劑2，所述酶試劑1與所述酶試劑2的體積比為2.8～3.3:1。