[發明專利]一種預防侵襲性真菌感染的寡糖疫苗

有效

• 申請號: 201811479983.6
• 申請日: 2018-12-05
• 公開（公告）號: CN109432416B
• 公開（公告）日: 2022-08-05
• 發明（設計）人: 陳勉;劉飛;凌沛學;孫康;陳磊;袁丹丹;張小剛;張天嬌;張秀華;張金華;袁超;張林軍;劉霞;劉英梅
• 申請（專利權）人: 山東省藥學科學院;山東福瑞達醫藥集團有限公司
• 主分類號: A61K39/385
• 分類號: A61K39/385;A61K47/64;A61P31/10
• 代理公司: 濟南泉城專利商標事務所 37218
• 代理人: 李桂存

本發明提供了一種預防侵襲性真菌感染的寡糖疫苗，包括偶聯免疫原性載體蛋白的殼寡糖，所述免疫原性載體蛋白與殼寡糖的偶聯質量比為0.7?210:1，殼寡糖的脫乙酰度為0.05?98%，平均相對分子量5000 Da，所述免疫原性載體蛋白為非人源蛋白。本發明提供的寡糖疫苗通過適當的脫乙酰度有效地激活Th17、Th1細胞免疫從而預防廣譜真菌感染。所述寡糖疫苗可以治療或預防侵襲性真菌，如白色念球菌、曲霉、隱球菌和耶氏肺孢子菌。

技術領域

本發明屬于疫苗生物醫藥領域，具體涉及一種預防侵襲性真菌感染的寡糖疫苗。

背景技術

隨新免疫抑制治療法、器官移植及AIDS發病率上升，侵襲性耐藥真菌感染發病、死亡率在全球顯著上升。據國際醫學界通行標準，真菌感染分為淺表性、皮下組織和侵襲性（或系統性）真菌感染3種類型，后兩種又稱深部真菌感染。常見致病株是念珠菌、曲霉、隱球菌和耶氏肺孢子菌，約占真菌感染的70%左右，感染累及人體內臟或形成真菌血癥。臨床深部真菌感染已成為醫院感染的重要死因，全球每年因真菌感染死亡的人數高達150萬人。美國研究顯示，白念在醫院感染性敗血癥居第４位，病死率居首位，單項治療費用僅美國就達20-40億美元/年。我國醫院不同人群侵襲性真菌病發病率4.1-41.2％，死亡率9.8-60％。抗真菌藥物僅十余種，新藥進展慢。臨床用藥可選品種少、治療周期長（1-6月），療效不理想，使抗侵襲性真菌成臨床棘手難題。

真菌疫苗研究起步晚、進展小，目前仍無上市疫苗。近年有2個進入臨床的疫苗針對某具體種屬白念株的黏附因子和毒力因子設計的蛋白疫苗，通過體液免疫發揮中和作用，有望應用于特定致病菌株的婦科白念感染，而非致命侵襲性真菌感染。

真菌細胞壁一般含甘露糖、β-葡聚糖及幾丁質多糖。以前的研究發現糖的免疫原性較低，難以激發機體的免疫效應，而以β-葡聚糖為代表的真菌疫苗研究，已能通過偶聯載體蛋白，改善了機體免疫應答。目前對機體抵抗真菌感染的免疫機制認識逐步深入，發現是以Th17為主的細胞免疫和固有免疫起主導作用。而β-葡聚糖-KLH疫苗的研究是以抗體滴度，即體液免疫，為主導評價功效的，因此其疫苗功效研究還有欠缺。同時，由于該受試糖為化學全合成，受限于逐個基團保護、逐個合成有限聚合度糖鏈方式的反應復雜、成本高，一般只合成約2-5聚合度的數種寡糖進行測試，起不到篩選作用。而以真菌細胞壁幾丁質為靶點的疫苗沒有報道，其被免疫系統識別等機制仍不清楚。而且，目前僅有殼聚糖與蛋白偶聯后作為免疫佐劑的報道。

發明內容

針對目前缺乏預防侵襲性真菌感染疫苗的問題，本發明提供一種預防侵襲性真菌感染的寡糖疫苗，成本低、廣譜抗真菌。

本發明的另一目的是提供一種上述預防侵襲性真菌感染的寡糖疫苗的制備方法，原料易得、制備過程簡單。

為實現上述目的，本發明采用如下技術方案。

一種預防侵襲性真菌感染的寡糖疫苗，包括偶聯免疫原性載體蛋白的殼寡糖。所述免疫原性載體蛋白與殼寡糖的偶聯質量比為0.7-210:1，優選為1-101:1。

所述殼寡糖的脫乙酰度為0. 05-98%，平均相對分子量5000 Da。作為優選，脫乙酰度為0.1-20%。作為優選，所述殼寡糖的相對平均分子量1000-3000Da。作為優選，所述未偶聯的殼寡糖的2%水溶液的A₄₂₀0.1；2%水溶液13000rpm離心2min，無沉淀。所述A₄₂₀是指溶液對420nm光的吸光度值。所述殼寡糖可以商業購買或自行通過降解殼聚糖制備。一般的，脫乙酰基程度小于15%時稱為甲殼寡糖，但在本發明中也稱為殼寡糖。