[發(fā)明專利]一種高聚合度木寡糖單體的準(zhǔn)備方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201811467966.0
• 申請日: 2018-12-03
• 公開（公告）號: CN109438531A
• 公開（公告）日: 2019-03-08
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王麗麗;趙峽;張斌;管昶;岳帆;高芹芹
• 申請（專利權(quán)）人: 青島博智匯力生物科技有限公司
• 主分類號: C07H3/06
• 分類號: C07H3/06;C07H1/00
• 代理公司: 北京天盾知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11421
• 代理人: 夏燕

本發(fā)明公開了一種高聚合度木寡糖單體的制備方法，屬于海藻寡糖提取技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明將木寡糖采用丙酮多次沉析后利用Click Xlon制備柱分離高聚合度木寡糖單體，實(shí)現(xiàn)了一次性制備出高純度的木4糖至木8糖單體，木四糖到木六糖純度都在95%以上。本發(fā)明可以一次性制備出高聚合度的木寡糖單體，尤其是實(shí)現(xiàn)了現(xiàn)有技術(shù)中難以分離提取的木8糖單體；該方法不需要二次純化，提高了木寡糖單體的收率，降低了生產(chǎn)成本；操作簡單，重復(fù)性好，易于推廣應(yīng)用。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種高聚合度木寡糖單體的制備方法，尤其涉及一種一次性制備出高純度的高聚合度木寡糖單體的制備方法，屬于海藻寡糖提取技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

低聚木糖又稱木寡糖，是由2-7個(gè)木糖分子以β-1,4糖苷鍵結(jié)合而成的功能性聚合糖。與其他低聚糖相比，其活化益生菌的用量小，且具有耐熱、耐酸、降低水分活性和防止凍結(jié)等諸多特點(diǎn)，使其擁有了更廣泛的應(yīng)用范圍。木寡糖可作為功能性食品添加劑，在食品尤其是酸性和發(fā)酵食品中得到了廣泛應(yīng)用；在醫(yī)藥上，木寡糖可用于預(yù)防和治療急慢性腸胃炎、骨質(zhì)疏松癥、皮膚瘙癢癥以及中耳炎等，此外，可增加腸道蠕動，維持糞便的持水性，其主要原理是活化腸道的有益菌；作為飼料添加劑，采用含有木寡糖的飼料喂養(yǎng)生畜和養(yǎng)魚，可提高生畜的免疫力，減少各種疾病，同時(shí)，可使生畜的生長周期縮短；在農(nóng)業(yè)上，木寡糖可用作農(nóng)作物的生長刺激劑和生長促進(jìn)劑，可用作催熟劑來噴灑水果和蔬菜，并可顯著提高農(nóng)作物的產(chǎn)量。

木寡糖單體可用于木寡糖在醫(yī)藥、食品、水產(chǎn)養(yǎng)殖、現(xiàn)代農(nóng)業(yè)、日用化工和生化試劑等領(lǐng)域新產(chǎn)品的開發(fā)、木寡糖的檢驗(yàn)分析和質(zhì)量控制的對照品、寡糖芯片的制備研究；寡糖與蛋白的相互作用研究、寡糖藥物的構(gòu)效關(guān)系和作用機(jī)理研究等糖化學(xué)與糖生物學(xué)研究領(lǐng)域。木寡糖單體的關(guān)鍵制備技術(shù)是木寡糖廣泛推廣應(yīng)用的必要條件，因此對木寡糖單體制備技術(shù)的研究具有十分重要的科學(xué)意義。

在木寡糖單體制備方面，采用凝膠色譜柱或活性炭柱制備一些低聚合度的木寡糖單體已有一些報(bào)道，如專利200510094118.6公開了一種聚合度為2～8的低聚木糖各組分的制備分離方法，采用超濾和多次凝膠層析分析制備低聚合度木糖單體；專利201410059775.6公開了一種從筍殼中提取木寡糖并分離獲得木寡糖單體的方法，其分離方法采用木寡糖單體。目前關(guān)于高聚合度木寡糖單體的制備技術(shù)研究較少，鮮見高聚合度木六糖、木七糖、木八糖的報(bào)道，尤其是一次性制備高聚合度木寡糖單體的技術(shù)未見有報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容

為了克服上述現(xiàn)有技術(shù)中的不足，本發(fā)明提供一種高聚合度木寡糖單體的制備方法，實(shí)現(xiàn)一次性制備高聚合度木寡糖單體，特別是制備高聚合度的木六糖、木七糖、木八糖，填補(bǔ)國內(nèi)技術(shù)空白。

本發(fā)明通過下述技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)上述技術(shù)效果：

一種高聚合度木寡糖單體的制備方法，具體包括以下步驟：

1）高聚合度木寡糖制備：取木寡糖15-30g，加入300ml蒸餾水溶解，配成100-200mg/ml溶液，然后再加入1000-1200ml丙酮沉析，高速離心10-15min；將離心得到的沉淀用150-200ml蒸餾水溶出，加600-800ml丙酮沉析，高速離心10-15min；繼續(xù)將離心得到的沉淀用80-100ml蒸餾水溶出，加300-400ml丙酮沉析，高速離心10-15min；最后將離心得到的沉淀用20-30ml蒸餾水溶出，即為高聚合度木寡糖；

2）Click Xlon 制備柱的裝填：將Click Xlon填料用的甲醇水溶液浸泡后裝填在柱子中，裝填后柱體積為150-300ml；

3）高聚合度木寡糖單體的分離：取適量木高聚樣品上于裝填好的Click Xlon制備柱，用甲醇水溶液同一流速線性洗脫5-8個(gè)柱體積，對洗脫部分進(jìn)行收集，即可得到木4糖、木5糖、木6糖、木7糖和木8糖單體。

上述高聚合度木寡糖購于市售山東龍力股份有限公司，含有微量的木8糖。