[發(fā)明專利]一種培養(yǎng)產(chǎn)物與基質(zhì)完全分離的牛樟芝培養(yǎng)方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201811460381.6
• 申請(qǐng)日: 2018-12-01
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN109601254B
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-02-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉卓斌;張桂芳;劉育壇;劉宏源;李一凡
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 廣東茂豐源農(nóng)業(yè)科技有限公司
• 主分類號(hào): C12N1/14
• 分類號(hào): C12N1/14;A01G18/40
• 代理公司: 廣州科粵專利商標(biāo)代理有限公司 44001
• 代理人: 劉明星

1.一種培養(yǎng)產(chǎn)物與基質(zhì)完全分離的牛樟芝培養(yǎng)方法，其特征在于：主要包括以下步驟：

（1）活化接種原料：取4℃保存的牛樟芝菌種于PDA平板培養(yǎng)基上活化培養(yǎng)20d后在靠近菌絲層邊緣0.4cm處打孔得到菌絲塊用于接種；

（2）制備固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基：稱取一定量的谷物原料及牛樟樹(shù)木屑放于培養(yǎng)瓶中，谷物原料混勻后置于培養(yǎng)瓶下層，牛樟樹(shù)木屑平鋪于其上；另將葡萄糖、KH₂PO₄、MgSO₄·7H₂O溶于一定量的蒸餾水形成含有葡萄糖與無(wú)機(jī)鹽的溶液，隨后將該溶液倒入培養(yǎng)瓶中浸泡固體物料，使培養(yǎng)基的最終含水量為50%-70%，浸泡時(shí)間為2h，然后放入高壓滅菌鍋中滅菌，滅菌溫度為121℃，時(shí)間為30min；

（3）打孔接種：用玻璃棒在固體培養(yǎng)基中心位置打一個(gè)2cm深的圓柱形槽，將原料菌絲塊含有菌絲的一面貼著培養(yǎng)基質(zhì)接種在圓柱形槽孔內(nèi)，并置于恒溫培養(yǎng)箱中28℃暗培養(yǎng)；

（4）無(wú)菌超凈臺(tái)取樣：培養(yǎng)一定時(shí)間后，在基質(zhì)表面形成厚度為3-5cm可輕松剝離的致密菌絲層，在無(wú)菌超凈臺(tái)中取樣，培養(yǎng)基中剩余的菌絲體還可繼續(xù)生長(zhǎng)；

所述的牛樟樹(shù)木屑的處理方法為置于室外暴曬后用高壓滅菌鍋滅菌，滅菌溫度為121℃，時(shí)間為2h，滅菌后將其放入烘箱中80℃烘干；

所述的谷物原料為大米50g、麩皮2.5g，將干料混勻后裝入培養(yǎng)瓶中，培養(yǎng)瓶體積為450mL；

所述的牛樟樹(shù)木屑是將牛樟樹(shù)木材粉碎成0.5cm的片狀木屑，稱取烘干的牛樟樹(shù)木屑1-5g平鋪于谷物基質(zhì)表面；

所述含有葡萄糖與無(wú)機(jī)鹽的溶液中，葡萄糖為5g，KH₂PO₄為0.5g，MgSO₄·7H₂O為 0.5g。