[發(fā)明專利]一種檢測(cè)雙酚A的方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201811459529.4
• 申請(qǐng)日: 2018-11-30
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN109541064A
• 公開(kāi)（公告）日: 2019-03-29
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王立波;李洋洋;王金輝;楊異卉;甘春麗;黃健;藺聰聰
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 哈爾濱醫(yī)科大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 北京科龍寰宇知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司 11139
• 代理人: 孫皓晨;馬鑫

本發(fā)明公開(kāi)了一種檢測(cè)雙酚A(BPA)的方法。該方法采用柱前衍生?高效液相色譜法(HPLC)檢測(cè)，以苯胺類化合物作為衍生化試劑，與雙酚A反應(yīng)，生成重氮化合物，采用HPLC對(duì)衍生化產(chǎn)物進(jìn)行分析，進(jìn)而得到樣品中BPA含量。原理是BPA與衍生化試劑反應(yīng)生成重氮化合物后，具有更強(qiáng)的紫外或熒光吸收，可降低檢測(cè)限，提高靈敏度。本發(fā)明的方法具有檢測(cè)限低、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單，能準(zhǔn)確對(duì)樣品中BPA進(jìn)行定量檢測(cè)等優(yōu)點(diǎn)。本發(fā)明所建立的方法的檢測(cè)限為0.18ng，定量限為0.54ng。與HPLC直接測(cè)定法相比，檢測(cè)限更低。本發(fā)明的方法可用于食品安全檢測(cè)領(lǐng)域，如食品包裝材料、食品中BPA的限量檢查。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種檢測(cè)雙酚A的方法，特別涉及一種采用柱前衍生-HPLC檢測(cè)雙酚A的方法，該方法可用于食品安全領(lǐng)域中雙酚A的限量檢查。

背景技術(shù)

食品安全問(wèn)題是當(dāng)今社會(huì)最為關(guān)注的問(wèn)題之一，而食品包裝材料的衛(wèi)生安全是食品安全的一個(gè)重要方面，雙酚A學(xué)名2,2-二(4-羥基苯基)丙烷，簡(jiǎn)稱二酚基丙烷，也稱BPA，是一種外源性的內(nèi)分泌干擾物，是合成塑料包裝制品的一種添加劑，其可通過(guò)食品包裝和塑料薄膜遷移到食品或是飲料中，被人體吸收，進(jìn)而逐步危害人體健康。BPA的危害已引起世界衛(wèi)生組織的廣泛關(guān)注，很多國(guó)家已經(jīng)頒布了相關(guān)法律，禁止在食品包裝材料中添加含BPA的物質(zhì)，尤其是嬰兒用品。

1994年我國(guó)衛(wèi)生部頒布的《GB14942～1994食品容器、包裝材料用聚碳酸酯成型品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》對(duì)BPA用量規(guī)定為每升蒸餾水中所含的酚類要小于0.05mg。我國(guó)目前對(duì)PC材料奶瓶的檢測(cè)采用滴定法，試樣前處理均需多次萃取，多次離心，操作繁瑣，前處理時(shí)間長(zhǎng)，滴定法準(zhǔn)確度和靈敏度較低，無(wú)法用于痕量樣品的檢測(cè)。

因此建立方便、快捷的檢測(cè)雙酚A的技術(shù)對(duì)于食品安全具有重要的意義。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提出一種操作簡(jiǎn)單、靈敏度較高的檢測(cè)雙酚A的方法。

為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用了以下技術(shù)手段：

本發(fā)明的一種檢測(cè)雙酚A(BPA)的方法，包括以下步驟：

(1)利用液液萃取的方法提取待測(cè)樣品中的雙酚A，獲得含有雙酚A的待測(cè)樣品溶液；

(2)在pH為1～2的鹽酸水溶液中，緩慢滴加作為衍生化試劑的苯胺類化合物溶液，混合均勻，在冰浴下攪拌，繼而滴加亞硝酸鈉溶液，亞硝酸鈉與鹽酸反應(yīng)生成亞硝酸，然后苯胺類化合物與亞硝酸反應(yīng)生成重氮鹽，充分反應(yīng)后，用氫氧化鈉調(diào)節(jié)溶液pH值至8～10，緩慢滴加待測(cè)樣品溶液，待測(cè)樣品中的BPA與重氮鹽反應(yīng)生成衍生化產(chǎn)物，反應(yīng)完成后，濃縮反應(yīng)液至干，用有機(jī)溶劑定容后，有機(jī)膜過(guò)濾，棄去初濾液，續(xù)濾液進(jìn)液相分析；

第一步合成亞硝酸：

第二步合成重氮鹽：

第三步與重氮鹽反應(yīng)生成衍生化產(chǎn)物：

其中，R為氫、甲基或硝基；

(3)采用高效液相色譜-紫外/熒光檢測(cè)方法分析樣品溶液，計(jì)算出樣品中雙酚A的含量。

其中，優(yōu)選的，步驟(1)中所述的液液萃取按照以下步驟進(jìn)行：將待測(cè)樣品用2～3倍體積的有機(jī)溶劑萃取2～3次，去除水溶性雜質(zhì)，合并萃取液減壓濃縮至干，用一定量的有機(jī)溶劑定容，得到含有雙酚A的待測(cè)樣品溶液。

其中，優(yōu)選的，所述的有機(jī)溶劑為乙酸乙酯或二氯甲烷。

其中，優(yōu)選的，步驟(2)中第一步反應(yīng)、第二步反應(yīng)以及第三步反應(yīng)需要避光進(jìn)行，所述反應(yīng)的溫度均為0～4℃。