[發明專利]一種工業釀酒酵母菌的馴化方法

有效

• 申請號: 201811453266.6
• 申請日: 2018-11-30
• 公開（公告）號: CN109401989B
• 公開（公告）日: 2022-06-28
• 發明（設計）人: 佟毅;王康;武麗達;張俊奇;何太波;王澤興;侯博;李義;王金枝;劉輝;李凡
• 申請（專利權）人: 吉林中糧生化有限公司;中糧生化能源（肇東）有限公司;中糧營養健康研究院有限公司
• 主分類號: C12N1/16
• 分類號: C12N1/16;C12N1/36;C12R1/865
• 代理公司: 北京信慧永光知識產權代理有限責任公司 11290
• 代理人: 王芬;張淑珍

1.一種釀酒酵母菌的馴化方法，所述方法包括：

1） 將起始釀酒酵母活化；

2） 使用液化醪制備所述起始釀酒酵母的成熟酒母醪；

3） 對所述釀酒酵母進行一級馴化：將步驟2）中的所述成熟酒母醪與所述液化醪混合并發酵至發酵醪液中的乙醇濃度達到12%（v/v）以上后，用新鮮的液化醪對發酵醪液進行置換并繼續發酵，以獲得一級馴化醪液，其中，所述置換進行至少20次，所述置換比例為所述發酵醪液的55vol%-80vol%，所述置換的時間間隔為20-30小時；以及，對所述一級馴化醪液中的釀酒酵母進行分離和純化，并篩選發酵性能相比參比水平而言得到改善的釀酒酵母菌株作為一級馴化酵母菌株；

4） 使用所述液化醪制備所述一級馴化酵母菌株的成熟酵母醪；

5） 對所述釀酒酵母進行二級馴化：將步驟4）得到的所述一級馴化酵母菌株的成熟酒母醪與所述液化醪混合并發酵至發酵醪液中的乙醇濃度達到12%（v/v）以上后，在溫度梯度下用新鮮的液化醪對發酵醪液進行置換并繼續發酵，其中，所述置換比例為所述發酵醪液的55vol%-80vol%，所述置換的時間間隔為20-30小時，所述溫度梯度的最低溫度為28℃-33℃，所述溫度梯度的最高溫度為34℃-38℃，所述溫度梯度的增幅為0.5℃-2℃每18-24次置換，從而獲得耐高溫耐高濃度乙醇且耐受發酵底物抑制物的釀酒酵母菌株，

其中，所述液化醪來源于淀粉質生物質，其中，所述液化醪中添加有糖化酶。

2.如權利要求1所述的馴化方法，其特征在于，所述起始釀酒酵母為安琪釀酒干酵母。

3.如權利要求2所述的馴化方法，其特征在于，所述起始釀酒酵母為安琪超級釀酒高活性干酵母。

4.如權利要求1-3中任一項所述的馴化方法，其特征在于，所述淀粉質生物質選自于由以下所組成的組：玉米、木薯、小麥或水稻。

5.如權利要求2所述的馴化方法，其特征在于，所述淀粉質生物質為玉米。

6.如權利要求1-3中任一項所述的馴化方法，其特征在于，在步驟3）中，將步驟2）中的所述成熟酒母醪與所述液化醪混合并發酵至發酵醪液中的乙醇濃度達到13%（v/v）以上。

7.如權利要求1-3中任一項所述的馴化方法，其特征在于，在步驟3）中，所述置換進行至少30次。

8.如權利要求1-3中任一項所述的馴化方法，其特征在于，在步驟3）中，所述置換比例為所述發酵醪液的60vol%-70vol%。

9.如權利要求1-3中任一項所述的馴化方法，其特征在于，在步驟5）中，將步驟4）得到的所述一級馴化酵母菌株的成熟酒母醪與所述液化醪混合并發酵至發酵醪液中的乙醇濃度達到13%（v/v）以上。

10.如權利要求1-3中任一項所述的馴化方法，其特征在于，在步驟5）中，所述置換比例為所述發酵醪液的60vol%-70vol%。

11.如權利要求1-3中任一項所述的馴化方法，其特征在于，在步驟3）中，所述成熟酒母醪與所述液化醪以（20~40）：（80~60）的體積比混合。

12.如權利要求1-3中任一項所述的馴化方法，其特征在于，在所述一級馴化中，發酵溫度為28-32℃，攪拌速率為110-160rpm。

13.如權利要求1-3中任一項所述的馴化方法，其特征在于，所述發酵性能相比參比水平而言得到改善包括相比參比水平而言，乙醇產量提高，以及任選發酵醪液中的殘總糖含量和/或殘還原糖含量降低，其中，

所述參比水平來自于所述起始釀酒酵母。