[發明專利]一種多粘類芽孢桿菌、應用及微生物菌劑、粉劑和顆粒劑

有效

• 申請號: 201811452399.1
• 申請日: 2018-11-30
• 公開（公告）號: CN109456921B
• 公開（公告）日: 2021-06-08
• 發明（設計）人: 郝志敏;王會敏;董金皋;梁海龍;申珅;曾凡力
• 申請（專利權）人: 郝志敏
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N25/12;A01N63/25;A01P3/00;C12R1/01
• 代理公司: 北京盛詢知識產權代理有限公司 11901
• 代理人: 張海青

本發明提供了一種多粘類芽孢桿菌、應用及微生物菌劑、粉劑和顆粒劑，其從玉米莖中分離得到，該菌株對多種植物真菌病害，尤其是禾谷鐮孢、層出鐮孢或擬輪枝鐮孢等真菌病害具有良好的防治效果，不污染環境，生態安全，遺傳穩定，且不容易產生抗性；本發明可以與植物生長所需有機、無機營養成分混合制備成微生物菌劑灌根、粉劑拌種以及顆粒劑，使作物的抗真菌病害能力明顯增強。

技術領域

本發明涉及微生物應用技術領域，具體涉及一種多粘類芽孢桿菌、應用及微生物菌劑、粉劑和顆粒劑。

背景技術

植物的病害大約70％是由真菌引起的，無論是植物生長的任何時期都有可能被真菌感染，尤其是糧食作物，一旦被植物病原真菌侵染，可能產生多種毒素，最終危害人類的健康。隨著農藥的使用，植物真菌的抗藥性增強，導致真菌泛濫。植物內生菌在生物防治方面的利用，可減少化學農藥的使用，進而減少對環境的污染，并且植物內生菌在生態的內環境中起到重要的作用，引起學者的重視。利用有益微生物防治植物病害始于1921年的Hartely利用真菌防治碎倒病(王曉宇，中國農業科學，2011)。

多粘類芽孢桿菌(Paenibacillus polymyxa)可產芽孢，較耐溫，屬革蘭氏陽性菌，其細胞多為桿狀，以鞭毛運動，生理生化反應多樣，對大多數植物真菌病害有防控作用，對植物本身的致病力小，可用于生物防治方面。近年來，多粘類芽孢桿菌由于其顯著的植物促生效果，已被普遍認為是一種植物根際促生細菌，可增加產量，產生多種活性物質，有拮抗蛋白類和抗生素類等。多粘類芽孢桿菌還具有抗氧化性、酶活、降脂等活性。

但是目前己知的多粘類芽孢桿菌對植物真菌病害的防治作用大多效果不佳、作用對象比較單一、易受自然環境影響、競爭存活能力有限等弊端。

發明內容

為解決上述技術問題，本發明提供了一種多粘類芽孢桿菌、應用及微生物菌劑、粉劑和顆粒劑，其從玉米莖中分離得到，該菌株對多種植物真菌病害具有良好的防治效果，遺傳穩定，且不容易產生抗性。

本發明為達到上述目的，采用的技術方案如下：

本發明從玉米莖中分離得到一株多粘類芽孢桿菌L10，經鑒定，其為多粘類芽孢桿菌(Paenibacillus polymyxa)。

其鑒定過程如下：L10菌株在LB固體培養基上生長，其菌落呈白色、圓形，較小，表面光滑、濕潤，粘稠，不易挑起。顯微觀察菌體為單細胞，桿狀，革蘭氏染色陽性，芽孢橢圓形。利用生理生化指標對其進行鑒定后發現，其淀粉水解、明膠水解、6.5％NaCl、V-P測定等呈陽性；接觸酶、甲基紅試驗等呈陰性。然后利用分子生物學手段采用16S rDNA基因特異引物對16S rDNA進行擴增，將擴增產物回收并測序，將測序結果進行Blast分析，結果發現與菌株L10高度同源的菌株為多粘類芽孢桿菌(Paenibacillus polymyxa)，同源性99％，并結合生理生化特征，鑒定其為多粘類芽孢桿菌屬。

作為本發明的第二方面，多粘類芽孢桿菌L10在防治植物真菌病害領域的應用。

進一步的，所述植物真菌病害的真菌病原體為鐮刀菌(Fusarium)。

進一步的，所述鐮刀菌為禾谷鐮孢(Fusarium graminearum)、層出鐮孢(Fusariumproliferatum)、擬輪枝鐮孢(Fusarium verticilliodes)。

作為本發明的第三個方面，提供了一種多粘類芽孢桿菌制備的微生物菌劑，采用如下方法制備：將多粘類芽孢桿菌L10在在牛肉膏蛋白胨液體培養基中培養，培養溫度為28℃，培養時間為18h，轉速為150rpm，發酵液離心后，將菌體用生理鹽水懸浮，調節液細胞數為108cfu/mL，即制得微生物菌劑，所述生物菌劑用于灌根。