[發明專利]一種擬鲿精子保存液及其制備方法

在審

• 申請號: 201811451686.0
• 申請日: 2018-11-30
• 公開（公告）號: CN109452263A
• 公開（公告）日: 2019-03-12
• 發明（設計）人: 趙道全;李治勛;武慧慧;陳軍平;謝國強;李先明;呂軍;胡亞東;于瀟;李泓
• 申請（專利權）人: 河南省水產科學研究院
• 主分類號: A01N1/02
• 分類號: A01N1/02
• 代理公司: 北京鑫浩聯德專利代理事務所(普通合伙) 11380
• 代理人: 暢曉瑩;李荷香

本發明涉及魚類精子保存液領域，具體涉及一種解決擬鲿規模化繁殖的擬鲿精子保存液及其制備方法，精子保存液由氯化鈉、氯化鉀、氯化鈣、氯化鎂、碳酸氫鈉、葡萄糖、青霉素組成，稱取上述原料加入塑料瓶或玻璃瓶中并用蒸餾水配置成溶液，制得的精子保存液，用流式細胞儀上機進行精子染色質檢測，在FSC/SSC圖上圈出精子細胞，設門至FL1(FITC)/FL3(ECD)散點圖上進行分析；通過公式計算DNA斷裂指數at來評價精子DNA質量，本發明的精子保存液4℃冷藏箱中可以保存10天，精子98%以上保持旺盛活力，仍可作為授精的精子，受精率95%以上。

技術領域

本發明涉及魚類精子保存液領域，具體涉及一種解決擬鲿規模化繁殖的擬鲿精子保存液及其制備方法。

背景技術

擬鲿人工繁殖時，需要殺魚取精，這種人工繁殖工藝不適宜規模化繁殖，因為規模化繁殖一次要給幾百尾雌魚授精，若臨時去殺雄魚來不及，若提前殺雄魚因為精子活力如果沒有保存液僅僅只有15-25秒的活力，顯然是不行的。

發明內容

本發明的目的在于克服現有技術中存在的不足而提供一種在4℃的冰箱中可以冷藏10天精子還有較強的活力擬鲿精子保存液及其制備方法。

本發明的技術方案是這樣實現的：

一種擬鲿精子保存液，其特征在于，包括以下重量份數的組分：

氯化鈉5-8份、氯化鉀0.1-0.5份、氯化鈣0.1-0.5份、氯化鎂0.05-0.1份、碳酸氫鈉0.01-0.03份、葡萄糖0.5-0.8份、青霉素150-200份。

一種擬鲿精子保存液，包括以下重量份數的組分：氯化鈉6份、氯化鉀0.3份、氯化鈣0.3份、氯化鎂0.08份、碳酸氫鈉0.02份、葡萄糖0.6份、青霉素180份。

一種擬鲿精子保存液的制備方法，包括以下步驟：

步驟一）、稱取上述重量份數的氯化鈉、氯化鉀、氯化鈣、氯化鎂、碳酸氫鈉、葡萄糖、青霉素；

步驟二）、將上述組分加入塑料瓶或玻璃瓶中并用蒸餾水配置成溶液；

步驟三）、上述制得的溶液制成后4小時內不用則存放于冰箱冷藏保存；

步驟四）、精子保存液效果測試。

取步驟四）制得的精子保存液，用流式細胞儀上機進行精子染色質檢測，在 FSC/SSC 圖上圈出精子細胞，設門至 FL1(FITC)/FL3(ECD) 散點圖上進行分析；DNA 完整性好的精子發綠色熒光；DNA 完整性差的精子發紅色熒光；通過公式計算 DNA 斷裂指數 at 來評價精子DNA 質量， αt = red/(red + green)。

本發明的積極效果是：4℃冷藏箱中可以保存10天，精子98%以上保持旺盛活力，仍可作為授精的精子，受精率95%以上。與購買的韓氏精子保存液相比，韓氏液同樣條件僅可保存4天，并且受精率60-70%。

具體實施方式

實施例1：一種擬鲿精子保存液，包括以下重量份數的組分：

氯化鈉5份、氯化鉀0.1份、氯化鈣0.1份、氯化鎂0.05份、碳酸氫鈉0.01份、葡萄糖0.5份、青霉素150份。

一種擬鲿精子保存液的制備方法，包括以下步驟：

步驟一）、稱取上述重量份數的氯化鈉、氯化鉀、氯化鈣、氯化鎂、碳酸氫鈉、葡萄糖、青霉素；

步驟二）、將上述組分加入塑料瓶或玻璃瓶中并用蒸餾水配置成溶液；

步驟三）、上述制得的溶液制成后4小時內不用則存放于冰箱冷藏保存；

步驟四）、精子保存液效果測試。