[發(fā)明專利]二氧化硅納米粒子在DNA免疫吸附劑中的應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201811451063.3
• 申請日: 2018-11-30
• 公開（公告）號: CN109289760B
• 公開（公告）日: 2021-09-28
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 陳填烽;林智明
• 申請（專利權(quán)）人: 暨南大學(xué)
• 主分類號: B01J20/10
• 分類號: B01J20/10;B01J20/30;B01D15/08
• 代理公司: 廣州市華學(xué)知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 44245
• 代理人: 蘇運貞

本發(fā)明公開了二氧化硅納米粒子在DNA免疫吸附劑中的應(yīng)用。本發(fā)明是基于本發(fā)明發(fā)明人發(fā)現(xiàn)二氧化硅納米粒子負載DNA得到的DNA免疫吸附劑吸附性能好、安全性能更佳的優(yōu)點所提出的發(fā)明創(chuàng)造。本發(fā)明提供的二氧化硅納米粒子負載DNA的免疫吸附劑是基于前述應(yīng)用得到的，其分DNA修飾在納米粒子MSNs和SiO₂的表面或孔道內(nèi)，固載量大，不易脫落，提高了免疫吸附劑的安全性，且DNA分子與抗ds?DNA抗體充分接觸，可最大限度發(fā)揮其特異性結(jié)合能力，從而制備得到的免疫吸附劑吸附性能良好、穩(wěn)定。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于血液凈化領(lǐng)域，特別涉及二氧化硅納米粒子在DNA免疫吸附劑中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus，SLE)是一種多系統(tǒng)損害的慢性自身性免疫性疾病，確切病因不明，常引起多器官系統(tǒng)的不可逆性損害，可累及皮膚、漿膜、關(guān)節(jié)、腎及中樞神經(jīng)系統(tǒng)等，病理表現(xiàn)為自身抗體及免疫復(fù)合物沉積，影響患者的壽命和生活質(zhì)量。SLE的患病率因人群而異，我國患病以女性多見，尤其是育齡女性。患者血清中出現(xiàn)以抗核抗體(ANA)、抗雙鏈DNA抗體(抗ds-DNA抗體)為代表的多種抗體，其中抗ds-DNA抗體是參與SLE發(fā)病的主要抗體，其特異性可達90％，是SLE特異性抗體。

早期清除患者血清中的自身抗體、控制疫病活動、保護腎功能是治療的關(guān)鍵。免疫吸附療法是近年來發(fā)展起來的新型血液凈化技術(shù)，它利用吸附材料除去血漿中的致病抗體(如抗ds-DNA抗體)，達到治療疫病的目的。免疫吸附是通過抗原抗體免疫反應(yīng)或物理化學(xué)作用除去致病因子，主要是血漿吸附，從而避免了離心式和一次膜血漿分離大量丟棄血漿的弊端。近年來，免疫吸附越來越多地應(yīng)用于免疫性疾病的治療。

其中，應(yīng)用比較廣泛的是DNA免疫吸附，采用DNA免疫吸附療法可以特異性的吸附和清除抗ds-DNA抗體，從而對SLE患者進行有效的治療。歐洲專利EP0272792A1制備了基于活性炭或者碳化樹脂的DNA免疫吸附劑，他們以活性炭或者碳化樹脂為載體，以小牛胸腺DNA(下文簡稱DNA)為配基，利用火棉膠包埋固載小牛胸腺DNA。但是，無論是活性炭還是碳化樹脂，均存在碳顆粒易脫落的問題，因而使用之前需要增加時間進行充分預(yù)沖至無微粒，從而避免治療時微粒隨血液循環(huán)進入人體而導(dǎo)致發(fā)生血栓、過敏、刺激等嚴(yán)重的不良反應(yīng)。此外，DNA采用火棉膠包埋方式固載還存在兩個缺點：一是部分DNA會由于包埋不充分，在后續(xù)生產(chǎn)過程中可能發(fā)生脫落，導(dǎo)致DNA固載量下降；二是部分被包埋過深的DNA又無法與抗體接觸。因此，提供一種吸附性能好的，微粒脫落率低的DNA免疫吸附劑成為亟待解決的問題。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的首要目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的缺點與不足，提供二氧化硅納米粒子在DNA免疫吸附劑中的應(yīng)用。

本發(fā)明的另一目的在于提供一種二氧化硅納米粒子負載DNA的免疫吸附劑。

本發(fā)明的再一目的在于提供上述二氧化硅納米粒子負載DNA的免疫吸附劑的制備方法及應(yīng)用。

本發(fā)明的目的通過下述技術(shù)方案實現(xiàn)：二氧化硅納米粒子在DNA免疫吸附劑中的應(yīng)用，是基于本發(fā)明發(fā)明人發(fā)現(xiàn)二氧化硅納米粒子負載DNA得到的DNA免疫吸附劑，具有吸附性能好，且安全性能更佳的優(yōu)點。

所述的二氧化硅納米粒子在DNA免疫吸附劑中的應(yīng)用，包括如下步驟：將二氧化硅納米粒子表面修飾氨基和羧基，再加入催化劑和DNA混合，反應(yīng)，得到DNA免疫吸附劑。

所述的DNA優(yōu)選為雙鏈DNA；更優(yōu)選為小牛胸腺DNA。

所述的二氧化硅納米粒子優(yōu)選為實心二氧化硅納米粒子(SiO₂)和介孔二氧化硅納米粒子(MSNs)中的一種或至少兩種；更優(yōu)選為介孔二氧化硅納米粒子。

所述的介孔二氧化硅納米粒子優(yōu)選通過如下步驟制備得到：以正硅酸乙酯(TEOS)為硅源，十六烷基三甲基溴化銨為表面活性劑，三乙胺為有機溶脹劑，攪拌回流反應(yīng)，得到介孔二氧化硅納米粒子。