[發明專利]一種基于靜電紡絲混合纖維膜構建組織工程角膜緣的方法在審
| 申請號： | 201811428474.0 | 申請日： | 2018-11-27 |
| 公開（公告）號： | CN109554340A | 公開（公告）日： | 2019-04-02 |
| 發明（設計）人： | 李陽;王平;高晴琴;李貴剛;王瑋;蔣林;王云明;周華民;黃志高;張云 | 申請（專利權）人： | 華中科技大學 |
| 主分類號： | C12N5/079 | 分類號： | C12N5/079;C12N5/0797 |
| 代理公司： | 華中科技大學專利中心 42201 | 代理人： | 孔娜;曹葆青 |
| 地址： | 430074 湖北*** | 國省代碼： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 混合纖維 靜電紡絲 組織工程角膜 構建 角膜緣干細胞 絲線 工藝制備 控制混合 微納結構 細胞生長 組織工程 組裝方式 創新性 交聯度 角膜緣 兩親性 生命體 微環境 纖維膜 纖維絲 降解 角膜 絲形 培植 細胞 調控 種植 | ||
1.一種基于靜電紡絲混合纖維膜構建組織工程角膜緣的方法，其特征在于，該方法包括以下步驟：
(1)采用靜電紡絲工藝制備混合纖維膜，并通過控制靜電紡絲時的參數來調控絲形、絲直徑及絲的走向，進而調節所述混合纖維膜的結構；
(2)采用交聯溶液交聯所述混合纖維膜中的一種材料，以改善所述混合纖維膜的兩親性及降解周期；
(3)將Matrigel涂敷于所述混合纖維膜的表面上；之后，再將角膜緣干細胞及角膜緣微環境細胞種植于所述混合纖維膜上，進而得到組織工程角膜緣。
2.如權利要求1所述的基于靜電紡絲混合纖維膜構建組織工程角膜緣的方法，其特征在于：步驟(1)后還包括通過溶劑去除所述混合纖維膜中的至少一種纖維，以調節所述混合纖維膜的絲與絲之間的空隙大小的步驟。
3.如權利要求2所述的基于靜電紡絲混合纖維膜構建組織工程角膜緣的方法，其特征在于：所述溶劑通過溶解所述混合纖維膜中的至少一種纖維以去除該纖維。
4.如權利要求1所述的基于靜電紡絲混合纖維膜構建組織工程角膜緣的方法，其特征在于：所述Matrigel的濃度為5％。
5.如權利要求1所述的基于靜電紡絲混合纖維膜構建組織工程角膜緣的方法，其特征在于：所述交聯溶液為EDC/NHS交聯溶液，所述EDC與所述NHS的摩爾比為(2～3):1。
6.如權利要求5所述的基于靜電紡絲混合纖維膜構建組織工程角膜緣的方法，其特征在于：采用交聯溶液交聯所述混合纖維膜中的一種材料時的交聯時間為24h～72h。
7.如權利要求5所述的基于靜電紡絲混合纖維膜構建組織工程角膜緣的方法，其特征在于：步驟(1)中靜電紡絲時采用的紡絲液為將預定質量比的聚己內酯及明膠溶于三氟乙醇和冰醋酸中得到的PCL/gelatin混合溶液。
8.如權利要求7所述的基于靜電紡絲混合纖維膜構建組織工程角膜緣的方法，其特征在于：所述預定質量比為8:2。
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