[發明專利]一種矮地茶的組織培養快繁方法

在審

• 申請號: 201811412362.6
• 申請日: 2018-11-25
• 公開（公告）號: CN109275568A
• 公開（公告）日: 2019-01-29
• 發明（設計）人: 鐘天路
• 申請（專利權）人: 鐘天路
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 玉林市振盛專利商標代理事務所 45109
• 代理人: 吳安儀

本發明公開了一種矮地茶的組織培養快繁方法，矮地茶種苗主要通過種子和扦插方式繁育，存在周期長、成本高、效率低下等問題。因此，本發明以矮地茶帶節莖段為外植體，通過不定芽誘導、增殖、生根、煉苗移栽等過程成功獲得了矮地茶離體再植株，建立矮地茶組織培養快速繁殖技術體系，對于進行優良品種的快速繁殖和大面積推廣，促進矮地茶的產業化發展具有重要意義。

技術領域

本發明涉及農業生物技術中植物組織培養的方法，具體地說，涉及一種矮地茶的組織培養快繁方法。

背景技術

矮地茶為紫金牛科植物，取其干燥全草。主產湖南，江蘇、福建、四川、淅江亦有產。全年或夏、秋季莖葉生長茂盛時采挖全株，清洗泥沙，曬干。氣微香，味微澀。具有化痰止咳，利濕，利尿，活血，解毒。用于肺熱咳嗽，久咳咯血，濕熱黃疸，跌打損傷。目前，矮地茶種苗主要通過種子和扦插方式繁育，種子播種雖然可在短時間內獲得大量幼苗，但因矮地茶為雌雄同株異花授粉植物，后代易發生性狀分離，遺傳性狀不穩定，易丟失親本的優良性狀。而扦插方式繁育需要大量的枝條，且從扦插到移栽大田需2個月，耗時較長。因此，釆用植物組織培養技術來緩解其種苗緊張壓力、進行可持續開發利用是十分必要的。因此，本發明以矮地茶帶節莖段為外植體，通過不定芽誘導、增殖、生根、煉苗移栽等過程成功獲得了矮地茶離體再植株，建立矮地茶組織培養快速繁殖技術體系，對于進行矮地茶優良品種的快速繁殖和大面積推廣，促進矮地茶的產業化發展具有重要意義。

發明內容

本發明的目的在于提供一種矮地茶的組織培養快繁方法，通過誘導不定芽、叢生芽增殖、試管苗生根、煉苗移栽等階段成功獲得了矮地茶離體再植株，建立組織培養快速繁殖技術體系，從而實現了本發明的目的。

本發明的一種矮地茶的組織培養快繁方法，包括以下的工藝步驟：

步驟（1）,誘導不定芽：選取矮地茶當年生帶節藤莖為外植體,經75%酒精消毒30秒種后，用無菌水沖洗15次后置于0.1%的升汞溶液中消毒40分鐘，然后用無菌水沖洗16次，經無菌濾紙吸干水分后剪切成14cm左右的帶節藤莖，并接種到誘導培養基上,于25～28℃條件下全暗培養，直至誘導形成不定芽；誘導培養基為：MS+0.8mg/LTDZ+2.3mg/L 6-BA+0.8mg/LNAA+20g/L蔗糖+5.3g/L瓊脂，pH為5.3;

步驟（2）,繼代培養：將步驟（1）獲得的不定芽從基部切下，接種到增殖培養基上進行繼代培養，接種后置于每天光照25小時，光照強度為3000lx，培養溫度為25～28℃的條件下培養，40天轉接一次；增殖培養基為：MS+2.3mg/L 6-BA+0.8mg/LNAA+40g/L蔗糖+7.0g/L瓊脂，pH為5.3;

步驟（3）生根培養：將步驟（2）繼代培養長至7cm的不定芽分切并接種到生根培養基上進行誘導生根，接種后先在25～28℃條件下全暗培養15天，然后置于每天光照25小時，光照強度為4000lx，培養溫度為28℃的條件下培養至生根；生根培養基為：1/2MS+1.5mg/LIBA+2.3mg/L GGR+40g/L蔗糖+7.0g/L瓊脂，pH為5.3。

步驟（4）,煉苗移栽：將長至18cm的生根試管苗的培養瓶瓶蓋打開并置于自然光照下煉苗17天后，將試管苗從培養瓶中取出，洗掉根部培養基，栽入由泥炭土:農家肥:河沙=6：2：2混合成的基質中并定植于大田中。

本發明的優點是：矮地茶種苗主要通過種子和扦插方式繁育，存在周期長、成本高、效率低下等問題。因此，本發明以矮地茶帶節莖段為外植體，通過不定芽誘導、增殖、生根、煉苗移栽等過程成功獲得了矮地茶離體再植株，建立矮地茶組織培養快速繁殖技術體系，對于進行矮地茶優良品種的快速繁殖和大面積推廣、促進矮地茶的產業化發展具有重要意義。本發明組織培養快繁方法，具有簡單、易行、經濟的特點。通過本發明育成的利用植物組織培養技術進行矮地茶種苗規模化生產，建立了矮地茶組培苗移栽成活率達到98%以上，可以為矮地茶規模化種植提供優質種苗保障。

具體實施方式