[發明專利]一種肉桂組培快繁方法

在審

• 申請號: 201811410520.4
• 申請日: 2018-11-23
• 公開（公告）號: CN109392717A
• 公開（公告）日: 2019-03-01
• 發明（設計）人: 張世燊
• 申請（專利權）人: 張世燊
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00;A01G24/28;A01G24/15;A01G24/10
• 代理公司: 玉林市振盛專利商標代理事務所 45109
• 代理人: 陸清源

本發明公開了一種肉桂組培快繁方法，肉桂為我國南方特有的主要樹種。目前肉桂主要采用扦插、嫁接和播種等傳統方式進行育苗，存在育苗成本高，苗木長勢不好、參差不齊、良種潛力未能得到充分發揮等缺點。本發明以優良無性系嫩枝為外植體，通過外植體消毒、誘導培養、叢生芽增殖、不定根發生、煉苗移栽等過程獲得了肉桂離體再植株，建立肉桂組織培養快速繁殖技術體系，可以保持肉桂無性系母本的優良性狀，有利于肉桂優良無性系苗木的規模化生產。

技術領域

本發明涉及農業生物技術中植物組織培養的方法，具體地說，涉及一種肉桂組培快繁方法。

背景技術

肉桂為樟科植物，取其肉桂樹的干燥樹皮。采收取選時適齡肉桂樹，剝下樹皮，于弱光下曬干。氣香濃烈，味甜而辣。具有補火助陽，引火歸源，散寒止痛，活血通經。用于陽瘺，宮冷不孕，腰膝冷痛，腎虛作喘，心腹冷痛，閉經，痛經。肉桂樹為我國南方特有的主要樹種。其生長快，材質軟，可加工成桂油、桂樹樹皮做中藥材。用途多，是我國南方最重要的商品材種之一。近年來隨著集體林權制度改革的推進和商品材價格的上漲，林農經營肉桂的積極性加大，肉桂經營水平和良種意識的不斷提高，對肉桂良種壯苗的需求日益增加，因此，如何快速擴繁肉桂優良基因型顯得十分必要。

近年來生物工程技術的快發展，尤其是組培快繁體系的建立，為林木的無性選育提供了一定的技術支撐。利用組織培養技術進行珍稀瀕危物種及優良品系樹種繁育，具有加速育種、縮短繁殖過程、節省空間、減少勞動、周年生產等特點。而目前主要采用扦插、嫁接和播種等傳統方式進行育苗，存在育苗成本高，苗木長勢不好、參差不齊、良種潛力未能得到充分發揮等缺點，使得目前優質壯苗的供應還無法滿足市場的需求。為了滿足市場對肉桂苗的巨大需求，本發明以優良無性系嫩枝為外植體，通過外植體消毒、誘導培養、叢生芽增殖、不定根發生、煉苗移栽等過程獲得了離體再植株，建立組織培養快速繁殖技術體系，不僅能有效地克服傳統育苗中的一些缺陷，而且對繁育出的無性系苗木在保持母本的優良性狀起到一定的作用，有利于肉桂優良無性系苗木的規模化生產。對比文件1，申請號：CN201711184948，發明名稱：一種肉桂樹皮保護劑及制作方法，所述肉桂樹皮保護劑主要由以下重量份的原料制得：5-9份砂仁種子、1-5份香茅油、6-12份蓽撥、3-8份油菜素內酯、6-9份茉莉酸脂、6-12份木鱉子、15-19份牻牛兒醇、20-25份乙酸龍腦酯、5-10份千根草、25-30份黃蓍膠、4-6份加寧桉精油，該保護劑含豐富的活性葡萄糖、酶、核酸、高級醇、生長未知促進因子等，可以直接透過肉桂的表面細胞進入深層細胞參與作物代謝活動，避免肉桂樹皮受到病菌和病蟲的侵害,并可有效提高肉桂的產量。對比文件與本案申請不同。

發明內容

本發明的目的在于提供一種肉桂組培快繁方法，本發明以優良無性系嫩枝為外植體，通過外植體消毒、誘導培養、叢生芽增殖、不定根發生、煉苗移栽等過程獲得了離體再植株，建立組織培養快速繁殖技術體系，從而實現了本發明的目的。

本發明的一種肉桂組培快繁方法，包括以下的步驟：

步驟1，外植體采集及消毒：采取肉桂樹樁基部形態表征一致的當年生萌動狀態的飽滿嫩枝作為外植體，在流水下沖洗5h，浸泡于6%洗衣粉溶液15分鐘，用軟毛刷8%洗衣粉溶液輕輕刷洗材料，再用自來水以滴水的形式沖洗 95min，用蒸餾水沖洗 9次，于超凈工作臺中以75%～80%乙醇溶液浸泡62s，無菌水沖洗7次，再用含有0.01～0.05%吐溫-20的0.1～0.5%升汞溶液消毒18min，無菌水沖洗7次后用無菌濾紙吸干表面的水分備用;

步驟2，誘導培養：將經步驟1處理后的嫩枝剪成約2.0cm的莖段并接種到誘導培養基進行叢生芽誘導培養,接種后置于每天光照18小時，光照強度為2100lx，置于培養溫度為23～25℃，空氣相對濕度為75%～80%的條件下培養32天后統計誘導情況; 誘導培養基為：MS+1.5mg/L NAA+9.0mg/L 6-BA+4.0mg/L KT+2.0g/L AC+32g/L蔗糖+7.0g/L瓊脂，pH為5.9；