[發明專利]一種白英的組織培養技術

在審

• 申請號: 201811409709.1
• 申請日: 2018-11-23
• 公開（公告）號: CN109496846A
• 公開（公告）日: 2019-03-22
• 發明（設計）人: 韋宇
• 申請（專利權）人: 韋宇
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 玉林市振盛專利商標代理事務所 45109
• 代理人: 吳安儀

本發明公開了一種白英的組織培養技術，涉及白英通過離體快繁技術獲得優質種苗的育苗方法。本發明以白英帶芽莖段為外植體，經過外植體消毒、叢生芽誘導、生根培養、煉苗移栽等過程從而建立了白英組織培養快速繁殖體系，加速白英良種的推廣和資源開發利用具有重要的現實意義。

技術領域

本發明涉及植物生物技術中植物組織培養的方法，具體地說，涉及一種白英的組織培養技術。

背景技術

白英別名：白毛藤、蜀羊泉、毛葫蘆。全國大部份地區有分布。多年生草本，夏秋季采全草，洗凈，切段，曬干。氣味甘、辛、苦，性微寒。具有清熱解毒，祛風利濕的功用。長期以來供不應求，加上人為的掠奪式砍伐導致白英野生資源枯竭，因此有必要對其資源進行保護。近年來，白英資源開發有了一定的規模，在我國南北各省建立了GAP種植基地，對白英野生資源保護工作起到了一定的促進作用。目前白英主要通過種子進行種苗繁殖，但由于種子繁殖后代性狀發生分離，不利于優質種質資源保護，制約了優質白英的推廣種植。因此，有必要建立白英的組織培養技術，為其良種快速繁殖提供技術支撐和保障，也為滿足我國對白英種苗的需求，加速其資源擴充具有重要的現實意義。對比文件1，申請號：CN201010570851，發明名稱：一種雙水相萃取白英中總皂苷的方法，將白英藥材粉碎，加入溶劑，固液浸提，過濾除雜后得到白英粗提液；取上述白英粗提液，濃縮至原來體積的1/5，加入無水乙醇/硫酸銨形成的雙水相系統，加水使系統總量為一定值，混勻，靜置后分為上下兩相；取出含有大量白英總皂苷的無水乙醇相，對其進行減壓濃縮，得到白英總苷提取物。本案與對比文件不相同。

發明內容

本發明的目的在于提供出一種白英的組織培養技術，本發明以白英帶芽莖段為外植體，經過外植體消毒、叢生芽誘導、生根培養、煉苗移栽等過程從而建立了白英組織培養快速繁殖體系，從而實現了本發明的目的。

本發明的一種白英的組織培養技術，包括以下的步驟：

步驟1，叢生芽誘導：選取生長健壯無病蟲的幼樹當年生的帶芽莖段作為外植體,用洗潔精水溶液浸泡16min，然后用自來水沖洗36min，擦干表面水分后備用,在超凈工作臺中以70%～80%乙醇浸泡16s，0.1%升汞溶液消毒26min，再用無菌水清洗11次，擦干后切成長度為2.2cm的莖段接種到誘導培養基上,先在25~28℃條件下全暗培養28天，然后置于每天光照15小時，光照強度為2000lx，培養溫度為23℃條件下培養，直至誘導形成叢生芽；誘導培養基為：MS+8mg/L6-BA+11mg/L NAA+6.5mmol/L La(NO₃)₂+9.5%蔗糖+6.5%瓊脂+0.61 %活性炭，pH值為5.2;

步驟2，增殖培養：將步驟1所得的叢生芽轉入增殖培養基上進行增殖培養，接種后先在23℃條件下全暗培養直至葉腋處萌生一個側芽，然后置于每天光照21小時，光照強度為1900lx，培養溫度為23℃的條件下培養直至各叢生芽伸長到6cm；增殖培養基為：MS+8mg/L6-BA+6.5mg/L NAA+9.5%蔗糖+6.5 %瓊脂+6.1%活性炭，pH值為5.2;

步驟3，生根培養：將步驟1或步驟2所獲得的高度約為4cm的叢生芽芽切割并接種到生根培養基上進行生根培養，接種后先在23℃條件下全暗培養10天，然后置于每天光照17小時，光照強度為2900lx，培養溫度為23℃的條件下培養至生根；生根培養基為：1/2MS+9mg/LNAA+9.2%蔗糖+6.5%瓊脂+6.1%活性炭，pH值為5.2;

步驟4，煉苗移栽：白英瓶內生根36天后，置于自然光照下煉苗11天后，洗凈根部培養基，移栽由黃心土：河沙=3：2混合成的基質中。

與現有技術相比本發明的優點是：本發明通過離體快繁技術獲得優質種苗的育苗方法。以白英帶芽莖段為外植體，經過外植體消毒、叢生芽誘導、生根培養、煉苗移栽等過程從而建立了白英組織培養快速繁殖體系，加速白英良種的推廣和資源開發利用具有重要的現實意義。

具體實施方式