[發明專利]一種利用磁場干預提高黃絲藻生物量及代謝物的方法

有效

• 申請號: 201811407437.1
• 申請日: 2018-11-23
• 公開（公告）號: CN109536484B
• 公開（公告）日: 2022-06-21
• 發明（設計）人: 霍書豪;陳秀;錢靜亞;朱菲菲;張存勝;鄒彬
• 申請（專利權）人: 江蘇大學
• 主分類號: C12N13/00
• 分類號: C12N13/00;C12N1/12;C12P7/6463;C12P19/00;C12R1/89
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本發明屬水產品加工或生物物理加工技術領域，涉及一種利用磁場干預提高黃絲藻生物量及代謝物的方法；具體步驟如下：首先配置BG11培養基，倒入柱式反應器中，接種處于對數期的黃絲藻（Tribonema sp.）；放于氣候培養箱中，設置一定的溫度、光照強度和光照時間，并通入一定量混有CO₂的空氣，進行培養；培養1 d后，施用外加磁場處理，繼續培養，待培養7 d后進行檢測生物量及油脂積累；本發明在黃絲藻等絲狀微藻培養系統外加磁場可以提高其細胞中油脂、糖類、蛋白質或具有天然生物活性的次生代謝產物含量，可以充分發揮該絲狀微藻的經濟潛力。

技術領域

本發明屬水產品加工或生物物理加工技術領域，具體涉及一種利用磁場干預提高黃絲藻生物量及代謝物的方法。

背景技術

微藻在許多領域具有十分廣闊的應用潛力，它可用于生物燃料、食品及動物飼料添加劑、生物活性物質等方面的生產原料。據文獻報道，我國微藻生物質產量總共僅約為1萬噸/年，然而僅初步統計在海水魚、對蝦及雙殼貝所需餌料藻的就可達1.6萬噸，造成微藻類生物質需求的缺口巨大。

單細胞微藻收獲成本能占微藻生產總成本的20～30％；設備投入接近總體設備投入成本的90％。解決或規避單細胞藻類收獲問題是實現藻類生物質低成本商業化生產的重要瓶頸之一。與單細胞藻類相比，絲狀微藻是一個可行的選擇，它可與培養物中的細菌或真菌結合成生物絮團，容易實現沉分離采收。其中，黃絲藻Tribonema sp.是第一個報道的絲狀微藻，它能夠積累大量油脂可用于生物柴油生產。此外，還有據報道在環境生物工程領域Tribonema interna顯示出449.46mg.g^-1的對酚凈化能力，它明顯高于那些單細胞低吸酚的藻株，如二型柵藻Scenedesmus dimorphus。

目前，微藻的生產成本依舊很高，需要以降低成本效益的方式為微藻的生長及代謝物累積提供新的方法。

發明內容

針對現有技術發不足，本發明旨在解決上述問題之一；本發明提供一種利用磁場干預提高絲狀藻生物量及其代謝物含量的新方法，根據本發明所制備的絲狀藻類可用于功能食品加工和動物飼料添加劑原料。

為了實現以上目的，本發明的具體步驟如下：

首先配置BG11培養基，倒入柱式反應器中，接種處于對數期的黃絲藻(Tribonemasp.)；放于氣候培養箱中，設置一定的溫度、光照強度和光照時間，并通入一定量混有CO₂的空氣，進行培養；培養1天(d)后，施用外加磁場進行處理，繼續培養，待培養7d后進行生物量及代謝物的檢測分析。

優選的，所述的接種量為培養基體積的5～20％。

優選的，所述的溫度為20～30℃。

優選的，所述的光照強度為1500～5000Lx。

優選的，所述的光照時間為24h連續光照或12h/12h光暗周期。

優選的，所述的CO₂的用量為空氣體積的1％～10％。

優選的，所述的通氣量為0.2～0.5vvm。

優選的，所述的磁場強度為10～500mT，處理時間為24h或整個生長期。

采用蒽酮硫酸法測總糖：取1.0mL的藻液混合4mL含0.2％(w/v)的濃H₂SO₄中，置于100℃水浴加熱10min；由于蒽酮與糖作用，混合液顏色變為橙色；使用分光光度計在620nm處測吸光度；

將冷凍干燥(溫度-80℃，12h)后得到的藻粉，加入0.5N NaOH，在80℃溫度下進行水浴，150rpm攪拌，振蕩20min后抽提；蛋白含量采用考馬斯亮藍法分析；