[發明專利]一種疣荔枝螺降壓肽的制備方法

有效

• 申請號: 201811397831.1
• 申請日: 2018-11-22
• 公開（公告）號: CN109402206B
• 公開（公告）日: 2021-06-08
• 發明（設計）人: 金火喜;梁建灝;謝輝;尹嘯;楊立業;曲有樂
• 申請（專利權）人: 浙江海洋大學
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C07K1/34;A61K38/01;A61P9/12;A23L33/18
• 代理公司: 杭州浙科專利事務所(普通合伙) 33213
• 代理人: 吳秉中

1.一種疣荔枝螺降壓肽的制備方法，其特征在于：

1）提供疣荔枝螺漿液，所述漿液為疣荔枝螺去雜后的勻漿；

2）提供至少一種蛋白酶對上述漿液進行酶解，得到酶解液；

3）提供超聲波輔助上述酶解；

4）提供脫苦和純化處理上述酶解液，干燥即得降壓肽；

所述疣荔枝螺降壓肽的分子量為250~2500Da；

所述去雜步驟為：向疣荔枝螺肉中加入濃度為1.5~2%的NaOH溶液浸泡1~2h后，水洗至中性，然后再加入濃度為5~7%的異丙醇溶液浸泡2~3h，洗凈后破碎，再置于4500~6000r/min的勻漿機中勻漿10~20min，得到疣荔枝螺漿液；

所述去雜步驟中NaOH溶液與疣荔枝螺肉的料液比為1:5~7，異丙醇溶液與疣荔枝螺肉的料液比為1:7~9；所述異丙醇溶液中含有0.34~0.45mM的4-甲基-2-戊醇，其中左旋體重量占比為43~48%；

所述蛋白酶為中性蛋白酶或堿性蛋白酶；所述酶解反應加酶量為50~120KU/100g，溫度為40~50℃，pH為7~9，反應時間為8~10.5h；

所述超聲波輔助條件為：采用正弦態超聲波，頻率為30~40kHz，功率為200mW/cm²，同時輔以轉速震蕩的處理方式，轉速為100~200rpm；

所述脫苦處理步驟為：向經煮沸滅酶的酶解液中加入0.5~1.0wt%的粉末活性炭，于45~55℃下吸附15~20min，然后離心取上清液備用；

所述純化處理步驟為：將酶解上清液用孔徑為10μm的微孔濾膜微濾除雜后，過截留分子量為250Da和2500Da的超濾膜分級超濾后，收集分子量為250~2500Da的組分，即得超濾酶解液。

2.根據權利要求1所述的一種疣荔枝螺降壓肽的制備方法，其特征在于：所述酶解前需對疣荔枝螺漿液進行滅菌處理；所述滅菌溫度為70~85℃，時間為10~15min。

3.根據權利要求1所述的一種疣荔枝螺降壓肽的制備方法，其特征在于：所述干燥處理采用噴霧干燥；所述噴霧干燥的出風溫度為150~180℃，進風溫度為80~95℃，噴霧壓力為0.3~0.5MPa。