[發明專利]一種抗平滑肌抗體檢測方法

在審

• 申請號: 201811390930.7
• 申請日: 2018-11-21
• 公開（公告）號: CN109490521A
• 公開（公告）日: 2019-03-19
• 發明（設計）人: 周梅華;李姣;蔣霞
• 申請（專利權）人: 長沙金域醫學檢驗所有限公司
• 主分類號: G01N33/53
• 分類號: G01N33/53
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種抗平滑肌抗體檢測方法，其特征在于，包括：

步驟一：樣本收集及貯存，樣本及試劑準備；

步驟二：加樣后，將載片覆有生物薄片的一面朝下，蓋在加樣板的凹槽里，室溫進行第一次溫育；

步驟三：根據所述步驟二中溫育后的載片用燒杯盛放磷酸鹽緩沖液流水沖洗，將其沒入裝有磷酸鹽級沖液的小杯中浸泡，浸泡后混勻熒光素和標記抗人球蛋白的結合物，加20ul至一潔凈加樣板反應區，完全加完二抗后方可開始溫育；

步驟四：根據所述步驟三中加樣后的載片吸干背面和四邊的水分，后室溫進行第二次溫育；

步驟五：根據所述步驟四中溫育后的載片用燒杯盛放磷酸鹽緩沖液流水沖洗，將其沒入裝有磷酸鹽級沖液的小杯中浸泡后封片；

步驟六：進行結果判斷和結果解釋。

2.根據權利要求1所述的抗平滑肌抗體檢測方法，其特征在于，所述步驟一包括：當載片平衡至室溫后打開載片包裝，所述載片可用筆標記，避免觸及生物薄片；打開載片包裝后，載片需在15分鐘內進行溫育。

3.根據權利要求1所述的抗平滑肌抗體檢測方法，其特征在于，所述步驟一包括：檢查加樣板是否反應區親水而周邊疏水，當加樣板沒有反應區親水而周邊疏水時，用家用洗滌劑清洗，再用足量的水沖洗，并用紙巾擦干凈。

4.根據權利要求3所述的抗平滑肌抗體檢測方法，其特征在于，所述步驟一中樣本準備包括：每個標本做I個稀釋梯度，按血清：磷酸鹽緩沖液為1：100稀釋血清并充分混勻。

5.根據權利要求4所述的抗平滑肌抗體檢測方法，其特征在于，所述步驟四包括：為防止破壞基質，不要擦拭反應區的間限；檢查生物薄片是否與液滴接觸良好；室溫溫育30分鐘，避免陽光直射載片。

6.根據權利要求5所述的抗平滑肌抗體檢測方法，其特征在于，所述封片過程包括：將蓋玻片直接放在泡沫板的凹槽里，滴加甘油或PBS至蓋玻片，從磷酸鹽緩沖液洗杯中取出一張載片，用紙擦干背面和四邊的水分，不要擦拭反應區間隙。

7.根據權利要求6所述的抗平滑肌抗體檢測方法，其特征在于，所述步驟六包括：SMA反應性在滴度1：100無反應時，結果判斷為陰性，即血清樣本中未檢出抗線粒體抗體；滴度1：100或更高時，結果判斷為弱陽性或陽性，即提示患有慢性活動性肝炎、病毒性肝炎、傳染性單核細胞增多癥、或其他疾病。

8.根據權利要求7所述的抗平滑肌抗體檢測方法，其特征在于，還包括質控步驟：每次實驗均直接帶陰、陽質控與患者標本同時測定。如果陽性對照不出現特異性熒光模型，或陰性對照出現清晰的特異性熒光，則實驗結果不可用，實驗必須重做。

9.根據權利要求8所述的抗平滑肌抗體檢測方法，其特征在于，所述質控步驟還包括：試驗前，將所有試劑置于室溫；使用前，使用前振蕩裝有對照血清的小管和所有稀釋過的溶液。