[發(fā)明專利]一種糖尿病心肌病動(dòng)物模型的構(gòu)建方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201811384775.8
• 申請日: 2018-11-20
• 公開（公告）號(hào): CN109481428A
• 公開（公告）日: 2019-03-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 任雷;楊鈞;朱愛華;王四旺;張麗軍;高美麗;王濤;張文杉
• 申請（專利權(quán)）人: 陜西中藥研究所
• 主分類號(hào): A61K31/137
• 分類號(hào): A61K31/137;A01K67/02;A23K50/50;A23K20/158;A23K20/163;A23K20/147
• 代理公司: 西安通大專利代理有限責(zé)任公司 61200
• 代理人: 范巍

本發(fā)明公開了一種糖尿病心肌病動(dòng)物模型的構(gòu)建方法，對(duì)經(jīng)高糖高脂飼養(yǎng)的SD大鼠先以STZ多次腹腔注射，達(dá)到糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)后，再以異丙腎上腺素皮下注射。繼續(xù)飼養(yǎng)2周后，通過左心室插管、三導(dǎo)聯(lián)心電圖檢測心室血流動(dòng)力學(xué)參數(shù)及心電圖參數(shù)，表明模型大鼠出現(xiàn)心功能損傷；心重指數(shù)及左心室指數(shù)表明模型組大鼠心室明顯肥大；大鼠血液生化分析表明，大鼠出現(xiàn)顯著的心肌損傷；HE病理染色符合糖尿病心肌病的病理變化；Masson膠原染色符合糖尿病心肌病心肌間結(jié)締組織增生。本發(fā)明具有操作簡單、造模時(shí)間短、造模階段動(dòng)物死亡率低，造模成功率高等顯著特點(diǎn)，且能較好模仿人Ⅱ型糖尿病所致心肌損傷的病理經(jīng)過。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于藥理學(xué)領(lǐng)域，具體涉及一種大鼠Ⅱ型糖尿病心肌病模型的造模方法。

背景技術(shù)

糖尿病(diabetes mellitus，DM)是一種由于胰島素分泌不足或外周組織對(duì)胰島素不敏感引起的代謝性疾病，以持續(xù)的高血糖狀態(tài)為特征，并可能引起各種組織、臟器(如眼、腎、心臟、血管、神經(jīng)等)的長期損害、功能不全或衰竭，以Ⅱ型糖尿病居多。據(jù)統(tǒng)計(jì)，2015年全球20～79歲的人中有約4.15億人患糖尿病(患病率8.8％)，另外有3.18億人糖耐量受損(前期患病率6.7％)。中國是全球糖尿病患者第一大國，2015年病患人數(shù)高達(dá)1.096億人，130萬人死于糖尿病及其并發(fā)癥。同時(shí)據(jù)IDF預(yù)測，如果不加干預(yù)，2040年全球糖尿病患者將達(dá)6.42億，糖尿病前期人群4.81億，我國患者數(shù)量將上升至1.54億。

糖尿病心肌病(diabetic cardiomyopathy，DCM)是指發(fā)生于糖尿病患者，不能用高血壓性心臟病、冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病、心臟瓣膜病及其他心臟病變來解釋的心肌疾病。該病在代謝紊亂及微血管病變的基礎(chǔ)上引發(fā)心肌廣泛灶性壞死，出現(xiàn)亞臨床的心功能異常，最終進(jìn)展為心力衰竭、心律失常及心源性休克，重癥患者甚至猝死。糖尿病心肌病在糖尿病并發(fā)癥中具有發(fā)病早、進(jìn)展快、死亡率高等特點(diǎn)，早期主要表現(xiàn)為心臟舒張功能受損，后期則表現(xiàn)為全心功能受損，特別是左心室功能受損。

糖尿病心肌病的發(fā)病機(jī)制較復(fù)雜，至今仍未完全明確。涉及高糖毒性、脂代謝紊亂、心臟血流動(dòng)力學(xué)異常，及炎癥和氧化應(yīng)激等多個(gè)方面。因此，建立一種能夠模仿人類糖尿病心肌病發(fā)病過程的動(dòng)物模型能夠有助于深入了解糖尿病心肌病的發(fā)病機(jī)制，從而更好的防治糖尿病心肌病。目前有關(guān)糖尿病心肌病的研究模型較少，僅有報(bào)道注射鏈脲佐菌素(STZ)引起動(dòng)物高血糖狀態(tài)建立自發(fā)性模型，但其造模時(shí)間長(特別是Ⅱ型糖尿病心肌病)，動(dòng)物死亡率高(糖尿病心肌病本身為原因之一)，模型成模率低且病理改變程度差異大，并不能完全反映糖尿病心肌病發(fā)生、發(fā)展過程中的慢性病理及生理變化特點(diǎn)。

異丙腎上腺素(ISO)用于構(gòu)建心肌肥厚及心肌缺血模型由來已久，該模型因其造模方法簡單，成模率穩(wěn)定(約80％)等優(yōu)點(diǎn)，一直作為藥理學(xué)經(jīng)典模型而廣為運(yùn)用。但其通常針對(duì)健康動(dòng)物進(jìn)行造模。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種糖尿病心肌病動(dòng)物模型的構(gòu)建方法。

為達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用了以下技術(shù)方案：

該構(gòu)建方法包括以下步驟：對(duì)誘導(dǎo)得到的糖尿病動(dòng)物模型，再以異丙腎上腺素皮下注射進(jìn)行干預(yù)，干預(yù)結(jié)束后間隔一定時(shí)間參照糖尿病心肌病檢驗(yàn)指標(biāo)進(jìn)行檢測，得到糖尿病心肌病動(dòng)物模型。

優(yōu)選的，所述糖尿病動(dòng)物模型為經(jīng)過STZ誘導(dǎo)得到的II型糖尿病動(dòng)物模型。

優(yōu)選的，所述糖尿病動(dòng)物模型的誘導(dǎo)方法具體包括以下步驟：以高脂高糖飼料喂養(yǎng)大鼠(例如，健康SD大鼠)，喂養(yǎng)至第6周后，增加15mg/kg STZ腹腔注射處理，其中，STZ每周注射1次，連續(xù)注射STZ 4周后篩選出血糖≥16.7mmol/L的大鼠，得到糖尿病動(dòng)物模型(Ⅱ型糖尿病大鼠模型)。

優(yōu)選的，所述高脂高糖飼料按質(zhì)量分?jǐn)?shù)計(jì)包括以下組分：15～20％的豬油、14～20％的蔗糖、5～11％的酪蛋白、2～5％的麥芽糊精、1～3％的預(yù)混料以及43～62％的繁殖鼠料。