[發明專利]雪梨膏的指紋圖譜檢測方法

有效

• 申請號: 201811383478.1
• 申請日: 2018-11-20
• 公開（公告）號: CN109374771B
• 公開（公告）日: 2020-12-25
• 發明（設計）人: 蔡寶昌;李國維;金俊杰;陳海超;孫戡平;鄭艷萍
• 申請（專利權）人: 南京海昌中藥集團有限公司;江蘇海昇藥業有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/38
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司 32200
• 代理人: 楊海軍

1.一種雪梨膏的指紋圖譜檢測方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟1、雪梨膏供試品溶液的制備：

取待測雪梨膏至容量瓶中，加入甲醇，超聲處理后加甲醇至刻度線，靜置，取上清液用0.45μm有機微孔濾膜濾過，取續濾液，即得；

步驟2、混合對照品溶液的制備：

分別取綠原酸、橙皮苷對照品適量，精密稱定，分別置于容量瓶中，加甲醇分別配成對照品儲備液；然后分別精密吸取綠原酸和橙皮苷的對照品溶液適量，加甲醇定容至10ml，制成綠原酸和橙皮苷的混合對照品溶液；

步驟3、分別精密吸取步驟1的雪梨膏供試品溶液和步驟2的混合對照品溶液，注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖；

步驟4，將步驟3中獲得的雪梨膏供試品溶液的指紋圖譜導出，并導入中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統2004A；選擇不同批次雪梨膏的色譜圖中均存在的色譜峰作為共有峰；用平均值計算法生成雪梨膏的對照指紋圖譜，計算各共有峰的相對保留時間和相對峰面積；并根據混合對照品溶液色譜圖的保留時間標注對照指紋圖譜中峰的化學成分；

所述的步驟3高效液相色譜儀檢測的色譜條件為：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以含0.1％體積醋酸的水作為流動相A，以乙腈為流動相B，梯度洗脫，流速為0.5～1.5ml·min-1，柱溫25～40℃，檢測波長200～360nm；

梯度洗脫優選如下表：

時間/min	流動相A體積百分比	流動相B體積百分比
0	95	5
15	91	9
45	90	10
55	40	60
70	40	60
80	0	100

。