[發(fā)明專利]一種酵母高密度培養(yǎng)的方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201811381662.2 | 申請日： | 2018-11-20 |
| 公開（公告）號： | CN109321477B | 公開（公告）日： | 2020-09-04 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 王宇;徐富增;張建華;王柯;陳旭升;張宏建 | 申請（專利權(quán)）人： | 江南大學(xué) |
| 主分類號： | C12N1/16 | 分類號： | C12N1/16 |
| 代理公司： | 哈爾濱市陽光惠遠(yuǎn)知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 23211 | 代理人： | 張勇 |
| 地址： | 214000 江*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 酵母 高密度 培養(yǎng) 方法 | ||
1.一種高密度培養(yǎng)酵母的方法，其特征在于，以糖蜜為培養(yǎng)基碳源，結(jié)合指數(shù)流加和溶氧反饋脈沖流加策略對培養(yǎng)過程進(jìn)行控制；當(dāng)發(fā)酵液中檢測到2.0g/L乙醇時，將補(bǔ)料方式改為溶氧反饋脈沖流加；所述溶氧反饋脈沖流加策略是當(dāng)溶氧低于設(shè)定值時停止補(bǔ)料，當(dāng)溶氧高于設(shè)定值時開始補(bǔ)料，所述溶氧設(shè)定值為30-50％；
所述指數(shù)流加是當(dāng)可發(fā)酵性糖消耗完畢，當(dāng)溶氧上升至60％時開始補(bǔ)料；
所述指數(shù)流加過程中，補(bǔ)料速率按以下公式計算：
其中：F，補(bǔ)料速率，L/h；μ，所設(shè)定的酵母比生長速率，h-1；V0，補(bǔ)料開始時培養(yǎng)基體積，L；CC0，開始補(bǔ)料時菌體濃度，g/L；YX/S，菌體得率，％；CSF，補(bǔ)料培養(yǎng)基的總糖濃度，g/L；CS，開始補(bǔ)料時段的總糖濃度，g/L；t，指數(shù)補(bǔ)料時間，h。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，發(fā)酵過程pH為4.5-6.5。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于，發(fā)酵溫度為26-34℃。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：
(1)分批培養(yǎng)：向培養(yǎng)基中接入按體積比計8-15％種子培養(yǎng)液，啟動發(fā)酵，發(fā)酵過程控制pH為4.5-6.5，控制發(fā)酵溫度26-34℃；
(2)指數(shù)流加：分批培養(yǎng)至可發(fā)酵性糖消耗完畢，溶氧上升至60％以上，開始補(bǔ)料，按照設(shè)定補(bǔ)料方式控制補(bǔ)料速率，補(bǔ)料期間控制DO不低于30％；
(3)溶氧反饋脈沖流加：指數(shù)流加補(bǔ)料至發(fā)酵液中檢測到乙醇濃度≥1g/L時，將補(bǔ)料方式改為溶氧反饋脈沖流加，溶氧控制為30％-50％。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于，發(fā)酵溫度為26-34℃，所述方法包括以下步驟：
(1)分批培養(yǎng)：向培養(yǎng)基中接入按體積比計8-15％種子培養(yǎng)液，啟動發(fā)酵，發(fā)酵過程控制pH為4.5-6.5，控制發(fā)酵溫度26-34℃；
(2)指數(shù)流加：分批培養(yǎng)至可發(fā)酵性糖消耗完畢，溶氧上升至60％以上，開始補(bǔ)料，按照設(shè)定補(bǔ)料方式控制補(bǔ)料速率，補(bǔ)料期間控制DO不低于30％；
(3)溶氧反饋脈沖流加：指數(shù)流加補(bǔ)料至發(fā)酵液中檢測到乙醇濃度≥1g/L時，將補(bǔ)料方式改為溶氧反饋脈沖流加，溶氧控制為30％-50％。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，所述的分批培養(yǎng)的培養(yǎng)基按g/L計含有：糖蜜稀釋液總糖60-90、(NH4)2SO4 6-10、KH2PO4 0.5-3.0、MnCl2·4H2O 0.001-0.004、ZnSO4·7H2O 0.005-0.008。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，補(bǔ)料培養(yǎng)基按g/L計含有：糖蜜稀釋液總糖300-380、(NH4)2SO4 20-50、KH2PO4 6-12。
8.根據(jù)權(quán)利要求1～2,6～7任一所述的方法，其特征在于，糖蜜包括但不限于甜菜糖蜜或甘蔗糖蜜。
9.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，糖蜜包括但不限于甜菜糖蜜或甘蔗糖蜜。
10.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于，糖蜜包括但不限于甜菜糖蜜或甘蔗糖蜜。
11.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，糖蜜包括但不限于甜菜糖蜜或甘蔗糖蜜。
12.權(quán)利要求1～11任一所述的方法在酵母高密度培養(yǎng)方面的應(yīng)用。
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