[發(fā)明專利]一種延丹膠囊及其制備方法與檢測方法及新用途

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201811379690.0
• 申請日: 2018-11-20
• 公開（公告）號: CN109288907B
• 公開（公告）日: 2021-05-25
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 吳建雄;劉存;周文艷;何樞衡;王書源;張冬玲
• 申請（專利權(quán)）人: 天長億帆制藥有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;A61K36/752;A61P9/00;A61P11/00;A61K9/48;A61K35/24
• 代理公司: 北京高航知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11530
• 代理人: 趙永強

1.一種延丹膠囊的檢測方法，該延丹膠囊是由以下重量份的藥味原料制成：丹參5重量份，醋制延胡索4.8重量份 ，五靈脂3重量份，瓜蔞4.8重量份 ，醋制乳香3重量份，白芍3重量份，枳殼3重量份，柴胡3重量份；該延丹膠囊是采用如下方法制備的，步驟如下：

（1）取醋制乳香、枳殼、柴胡，混合，粉碎成細(xì)粉，保留備用；

（2）取丹參，加2倍量85%乙醇回流提取2次，每次1.5h，合并提取液，濾過，濾液回收乙醇至無醇味，得清膏，保留備用，所得藥渣，也保留備用；

（3）取瓜蔞、醋制延胡索、五靈脂、白芍，與步驟（2）所得藥渣合并，加水煎煮2次，每次加10倍量水煎煮2h，合并煎液，濾過，濾液濃縮至浸膏，保留備用；

（4）取步驟（1）所得細(xì)粉，步驟（2）所得清膏，步驟（3）所得浸膏，混勻，低溫干燥，粉碎成細(xì)粉，過篩，裝入膠囊，即得；

其特征在于，采用高效液相色譜法檢測延丹膠囊中丹參素、延胡索乙素、金圣草黃素的含量，其步驟如下：

（1）色譜條件：色譜柱：C₁₈色譜柱，規(guī)格：4.6mm×250mm，5μm；流動相：乙腈-0.15 moL?L^-1磷酸二氫鈉水溶液，梯度洗脫，洗脫順序如下：從開始到5 min，乙腈保持在15%，0.15 moL?L^-1磷酸二氫鈉水溶液保持在85%；從第6 min到第15 min，乙腈由15%線性上升到25%，0.15moL?L^-1磷酸二氫鈉水溶液由85%線性下降到75%；從第16 min到第25 min，乙腈由25%線性上升到30%，0.15 moL?L^-1磷酸二氫鈉水溶液由75%線性下降到70%；從第26 min到第35 min，乙腈由30%線性上升到45%，0.15 moL?L^-1磷酸二氫鈉水溶液由70%線性下降到55%；檢測波長：0～15min的檢測波長為285nm，用于檢測丹參素；16～25min的檢測波長為305nm，用于檢測延胡索乙素；26～35min的檢測波長為328nm，用于檢測金圣草黃素；流速：0.5～1.5mL·min^-1；柱溫：30～35℃；進(jìn)樣量：5～20μL；

（2）對照品溶液的制備：分別精密稱取丹參素、延胡索乙素和金圣草黃素對照品各適量，加甲醇制成質(zhì)量濃度分別為150.0～250.0μg·mL^-1，100.0～200.0μg·mL^-1，250.0～350.0μg·mL^-1的對照品溶液；

（3）供試品溶液的制備：取膠囊內(nèi)容物樣品，精密稱定4.00～6.00g，置于50mL具塞錐形瓶中，加甲醇30～50mL，密塞后稱定質(zhì)量，回流提取0.5～1.5h，冷卻后用甲醇補足減失質(zhì)量，用0.45μm微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液，即得供試品溶液；

（4）測定：精密吸取對照品溶液、供試品溶液各5～20μL，注入高效液相色譜儀，進(jìn)行測定。

2.如權(quán)利要求1所述的延丹膠囊的檢測方法，其特征在于，采用高效液相色譜法檢測延丹膠囊中丹參素、延胡索乙素、金圣草黃素的含量，其步驟如下：

（1）色譜條件：色譜柱：WondaSil C₁₈色譜柱，規(guī)格：4.6mm×250mm，5μm；流動相：乙腈-0.15 moL?L^-1磷酸二氫鈉水溶液，梯度洗脫，洗脫順序如下：從開始到5 min，乙腈保持在15%，0.15 moL?L^-1磷酸二氫鈉水溶液保持在85%；從第6 min到第15 min，乙腈由15%線性上升到25%，0.15 moL?L^-1磷酸二氫鈉水溶液由85%線性下降到75%；從第16 min到第25 min，乙腈由25%線性上升到30%，0.15 moL?L^-1磷酸二氫鈉水溶液由75%線性下降到70%；從第26 min到第35 min，乙腈由30%線性上升到45%，0.15 moL?L^-1磷酸二氫鈉水溶液由70%線性下降到55%；檢測波長：0～15min的檢測波長為285nm，用于檢測丹參素；16～25min的檢測波長為305nm，用于檢測延胡索乙素；26～35min的檢測波長為328nm，用于檢測金圣草黃素；流速：1.0mL·min^-1；柱溫：32℃；進(jìn)樣量：10μL；

（2）對照品溶液的制備：分別精密稱取丹參素、延胡索乙素和金圣草黃素對照品各適量，加甲醇制成質(zhì)量濃度分別為200.0μg·mL^-1，150.0μg·mL^-1，300.0μg·mL^-1的對照品溶液；

（3）供試品溶液的制備：取膠囊內(nèi)容物樣品，精密稱定5.00g，置于50mL具塞錐形瓶中，加甲醇50mL，密塞后稱定質(zhì)量，回流提取1h，冷卻后用甲醇補足減失質(zhì)量，用0.45μm微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液，即得供試品溶液；

（4）測定：精密吸取對照品溶液、供試品溶液各10μL，注入高效液相色譜儀，進(jìn)行測定。