[發明專利]一種原位內皮化心血管支架涂層的構建方法及應用

在審

• 申請號: 201811377234.2
• 申請日: 2018-11-19
• 公開（公告）號: CN109529118A
• 公開（公告）日: 2019-03-29
• 發明（設計）人: 魏雨;張景迅;馮先濤;諶馥佳;張寧
• 申請（專利權）人: 黃淮學院
• 主分類號: A61L27/34
• 分類號: A61L27/34;A61L27/50;A61L27/54
• 代理公司: 大連智高專利事務所(特殊普通合伙) 21235
• 代理人: 胡景波

1.一種原位內皮化心血管支架涂層的構建方法，其特征是，通過表面引發原子轉移自由基聚合反應在基材表面構建內皮選擇性多肽修飾的二元嵌段共聚物刷，制備具體步驟如下：

(1)基材表面處理：用piranha溶液煮沸1小時左右，丙酮、乙醇、超純水中分別超聲10分鐘，高純氮氣吹干，密封保存備用；

(2)氨基硅烷偶聯劑的固定：將經過步驟(1)處理的表面羥基化的基材置于含有5-15mmol氨基硅烷偶聯劑的無水甲苯溶液中，在氮氣保護下反應過夜，超純水超聲洗滌，用氮氣將基材表面吹干，真空干燥，得到氨基硅烷偶聯劑修飾的基材；

(3)引發劑的固定：將表面氨基化的基材放入含有5-15mmol引發劑的三乙胺和二氯甲烷溶液中，避光室溫反應12-24小時，超聲洗滌，用氮氣將基材表面吹干，真空干燥，得到引發劑修飾的基材；

(4)二元嵌段共聚物刷在表面的接枝：將固定引發劑的基材、單體1、催化劑溶在溶劑中配制成反應溶液，混合均勻后，加入到真空除氧的反應裝置內，室溫聚合12-24小時，取出基材，沖洗三次，氮氣吹干，得到單體1修飾的基材，將單體1修飾的基材、甲基丙烯酸縮水甘油酯、催化劑溶在溶劑中配制成反應溶液，混合均勻后，加入到真空除氧的反應裝置內，室溫聚合12-24小時，取出基材，沖洗三次，氮氣吹干，得到二元嵌段共聚物刷修飾的基材；

(5)末端活性多肽的功能化修飾：將二元嵌段共聚物刷修飾的基材浸入20-200μg/mL的活性多肽PBS溶液中，室溫反應12-24小時，隨后放入賴氨酸溶液中6-12小時，以消除沒有與多肽反應的環氧基團，蒸餾水清洗，氮氣吹干，最終得到具有內皮細胞選擇性的活性聚合物刷修飾的基材。

2.如權利要求1所述的一種原位內皮化心血管支架涂層的構建方法，其特征是，步驟(1)中的piranha溶液為96％H₂SO₄:30％H₂O₂＝7:3，V/V。

3.如權利要求1所述的一種原位內皮化心血管支架涂層的構建方法，其特征是，步驟(1)中所述基材包括各種金屬、硅片、聚對苯二甲酸乙二醇酯(PET)膜、玻璃、石英片、聚偏氟乙烯膜、不銹鋼膜和不銹鋼心血管支架、碳納米管、二氧化硅微球/納米顆粒。

4.如權利要求1所述的一種原位內皮化心血管支架涂層的構建方法，其特征是，步驟(2)中所述氨基硅烷偶聯劑為3-氨基丙基三甲氧基硅烷、3-氨基丙基三乙氧基硅烷、4-氨丁基三乙氧基硅烷。

5.如權利要求1所述的一種原位內皮化心血管支架涂層的構建方法，其特征是，步驟(3)中所述引發劑是α-鹵代酰鹵，包括：α-氯代丙酰氯、α-氯代丁酰氯、α-氯代異丁酰氯、α-溴代丙酰溴、α-溴代丁酰溴、α-溴代異丁酰溴。α-溴代異丁酰溴。

6.如權利要求1所述的一種原位內皮化心血管支架涂層的構建方法，其特征是，

步驟4中所述單體1選自如下單體：

其中R＝(1)MPC n＝1-18

(2)SBMA(CH₂CH₂O)nCH₃ n＝1-50 n＝1-50

(3)CBMA n＝1-18

(4)PEGMA n＝1-18。

7.如權利要求1所述的一種原位內皮化心血管支架涂層的構建方法，其特征是，步驟(4)中所述催化劑為氯化銅、氯化亞銅、溴化銅、溴化亞銅、氯化鐵、氯化亞鐵、二聯吡啶、抗壞血酸體系；步驟(4)中所述溶劑為水、甲醇、乙醇中任意一種或組合。

8.如權利要求1所述的一種原位內皮化心血管支架涂層的構建方法，其特征是，步驟(5)中所述活性多肽為RGD，REDV，YIGSR，cRGD，CD34抗體，CD133抗體。

9.權利要求1所述的一種原位內皮化心血管支架涂層的構建方法在心血管疾病中的應用。