[發(fā)明專利]一種靜脈回輸用間充質(zhì)干細(xì)胞保存液及其制備方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201811375272.4
• 申請日: 2018-11-19
• 公開（公告）號: CN109329270A
• 公開（公告）日: 2019-02-15
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 高雪華;海泉;陳靜嫻;趙峻
• 申請（專利權(quán)）人: 成都清科生物科技有限公司
• 主分類號: A01N1/02
• 分類號: A01N1/02
• 代理公司: 成都正華專利代理事務(wù)所(普通合伙) 51229
• 代理人: 李亞男

本發(fā)明公開了一種靜脈回輸用間充質(zhì)干細(xì)胞保存液及其制備方法。該保存液包括以下重量百分比的組分：自體血漿裂解物混合液1～5％、人血白蛋白1～5％、VC注射液1～5％、葡萄糖注射液2～3％、復(fù)方電解質(zhì)注射液23～30％、葡萄糖鹽注射液23～30％以及復(fù)方氨基酸注射液23～30％。本發(fā)明制備得到的保存液，可實(shí)現(xiàn)冷藏暫存后直接回輸，減少了冷凍狀態(tài)保存的細(xì)胞在復(fù)蘇后的制備過程中及細(xì)胞再處理過程中的細(xì)胞損傷，提高了細(xì)胞利用率。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于細(xì)胞保存技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種靜脈回輸用哪個(gè)間充質(zhì)干細(xì)胞保存液及其制備方法。

背景技術(shù)

干細(xì)胞基于其歸巢、遷移、增殖分化等特性可應(yīng)用于治療和修復(fù)多種受損細(xì)胞或組織。同時(shí)干細(xì)胞可以通過旁分泌作用分泌多種細(xì)胞因子，如生長因子、趨化因子等，細(xì)胞因子可與損傷的細(xì)胞受體相結(jié)合，從而達(dá)到損傷細(xì)胞的修復(fù)作用。

細(xì)胞治療涉及細(xì)胞的制備、擴(kuò)增、回輸?shù)冗^程，通常這些過程的實(shí)施地點(diǎn)及時(shí)間并不一致，而細(xì)胞在運(yùn)輸過程中的質(zhì)控力度較弱。細(xì)胞常溫環(huán)境中，細(xì)胞內(nèi)各種酶和其它生物大分子反應(yīng)，代謝旺盛，耗氧量高。這些生理過程會產(chǎn)生大量氧自由基和脂質(zhì)過氧化物，若不及時(shí)清除，則會引起環(huán)境pH和滲透壓變化，造成細(xì)胞溶脹和死亡，細(xì)胞的遠(yuǎn)途運(yùn)輸通常采用冷凍和低溫方法。

冷凍狀態(tài)可以最大限度的降低細(xì)胞的代謝活動，避免了常溫環(huán)境中細(xì)胞代謝造成的細(xì)胞損傷和死亡，但低溫運(yùn)輸需要特殊的保存介質(zhì)，使細(xì)胞能夠在低溫環(huán)境中盡可能長的維持細(xì)胞的高活性狀態(tài)。由于臨床用細(xì)胞制劑不能接觸動物源成分，如動物源血清等，如何保證細(xì)胞制劑的安全性、穩(wěn)定性成為細(xì)胞低溫保存的關(guān)鍵，且低溫運(yùn)輸?shù)某杀据^高。另外，細(xì)胞在臨床應(yīng)用前通常需對細(xì)胞進(jìn)行進(jìn)一步的處理，增加了細(xì)胞操作流程，增加了細(xì)胞的安全隱患。

現(xiàn)有非冷藏狀態(tài)的細(xì)胞保存液保存的細(xì)胞在經(jīng)過短時(shí)間后細(xì)胞活率和生物學(xué)效力等出現(xiàn)大幅度降低，從而限制了間充質(zhì)干細(xì)胞的治療；因此，急需一種安全的有效的細(xì)胞保存液。

發(fā)明內(nèi)容

針對現(xiàn)有技術(shù)中的上述不足，本發(fā)明提供一種靜脈回輸用哪個(gè)間充質(zhì)干細(xì)胞保存液及其制備方法，能夠有效的解決現(xiàn)有的間充質(zhì)干細(xì)胞保存液在保存細(xì)胞時(shí)，導(dǎo)致細(xì)胞活率和生物學(xué)效力大幅度降低的問題。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明解決其技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案是：

一種靜脈回輸用間充質(zhì)干細(xì)胞保存液，包括以下重量百分比的組分：

自體血漿裂解物混合液1～5％、人血白蛋白1～5％、VC注射液1～5％、葡萄糖注射液2～3％、復(fù)方電解質(zhì)注射液23～30％、葡萄糖鹽注射液23～30％以及復(fù)方氨基酸注射液23～30％。

其中，復(fù)方電解質(zhì)注射液商品名為勃脈力A，購自上海百特醫(yī)療用品有限公司；復(fù)方氨基酸注射液商品名為18AA，購自成都倍特藥業(yè)有限公司。

進(jìn)一步地，包括以下重量百分比的組分：

自體血漿裂解物混合液5％、人血白蛋白1％、VC注射液1％、葡萄糖注射液3％、復(fù)方電解質(zhì)注射液30％、葡萄糖鹽注射液30％以及復(fù)方氨基酸注射液30％。

進(jìn)一步地，所述自體血漿裂解物混合液的制備方法為：

(1)采集血漿，然后于4000～5000r/min離心8～10min，吸取上層血漿，并使白膜層與血漿混勻，于-80～70℃保存?zhèn)溆茫?/p>

(2)于35～37℃復(fù)蘇步驟(1)所得產(chǎn)物，然后于3800～4000r/min離心10～15min，收集上清液，制得自體血漿裂解物；

(3)將質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10～15％的海藻糖溶液與自體血漿裂解物溶液混勻，所述海藻糖溶液與自體血漿裂解物溶液的體積比為1:5～10，制得自體血漿裂解物混合液，并于-80～70℃保存?zhèn)溆谩?/p>

進(jìn)一步地，所述人血白蛋白為質(zhì)量分?jǐn)?shù)為25％的人血白蛋白溶液。