[發明專利]利用新型填料從梔子中制備的藏紅花素標準品及其制備方法

有效

• 申請號: 201811373601.1
• 申請日: 2018-11-19
• 公開（公告）號: CN109400660B
• 公開（公告）日: 2021-11-09
• 發明（設計）人: 周愛兵;王宇;楊圓
• 申請（專利權）人: 江蘇史蒂文生物科技有限公司
• 主分類號: C07H13/06
• 分類號: C07H13/06;C07H1/06;B01D15/08
• 代理公司: 南京源點知識產權代理有限公司 32545
• 代理人: 陳彩霞

本發明屬于生物工程技術領域，提供了一種利用新型填料從梔子中制備藏紅花素標準品的制備方法，將從梔子中提取的藏紅花素粗品配制成溶液，將藏紅花素粗品溶液注入裝有新型填料的動態軸向壓縮柱中，采用所述新型填料為固定相，有機溶劑作為流動相，在動態軸向壓縮柱中進行解析分離，得到藏紅花素溶液，將藏紅花素溶液濃縮去除有機溶劑，再將剩余溶液干燥得到藏紅花素標準品。本發明通過在裝有新型填料的動態軸向壓縮柱對藏紅花素粗品進行分離提純，采用新型填料為固定相，乙醇、乙酸乙酯、正丁醇作為流動相，能加快分離速度，提高生產效率，降低流動相溶劑的使用量，節約成本且具有優異的分離提純效果，獲得純度高達98.5％的藏紅花素標準品。

技術領域

本發明涉及生物工程技術領域，具體涉及一種新型填料及其制備方法及基于新型提料從梔子中提取藏紅花素的方法。

背景技術

梔子(GardeniajasminoidesEllis)又名黃梔子、山梔子、白蟾，是茜草科植物梔子的果實，主要分布于浙江、江西、湖南、福建等地，資源廣泛，屬衛生部頒發的首批藥食兩用資源。《本草綱目》中已有記載，梔子入心、肝、肺、胃經，能清熱瀉火、涼血，具有護肝、利膽、降壓、鎮靜、止血、消腫等功效，主要含有梔子油、梔子苷、梔子黃色素和綠原酸等多種活性成分。梔子苷具有利膽、鎮痛、瀉下、保肝、降血脂、降血糖、抗癌等作用，除用于藥用外，還可用作植物增產劑、生物檢測劑和生物載體，應用前景廣闊。梔子黃色素主要成分為藏花素和藏花酸，初分離于珍稀價昂的藏紅花。藏花素、藏花酸水溶性好，著色力強，金屬離子、酸、堿和糖對其色調基本無影響，是自然界罕見的水溶性類胡蘿卜素類色素，研究表明其具有類胡蘿卜素的很多特性，藏花素極易被人體吸收，具有抗氧化、淬 滅自由基和抗癌活性；藏花酸具有降低膽固醇，抑制腫瘤生長及肝中毒等活性，但因藏花酸在植物中含量較低，多通過藏花素水解制備。

中國專利庫公開了一種以梔子為原料生產純度大于95％的藏紅花素的方法(CN102516325B)，該方法以采用常溫水滲漉提取，可以有效減少果膠和蛋白等雜質的提出，避免給后續分離純化帶來困難。提取前粉碎梔子果實時避免種子破碎，減少油脂的提出。水提液微濾可除去水提液中的固體顆粒和果膠等雜質，并濾除細菌等微生物，微濾后的水提液可以直接上大孔樹脂柱連續吸附。同時采用精細大孔樹脂代替常規的粗粒徑大孔樹脂進行吸附層析，將常壓技術升級到加壓技術，用連續循環層析方法取代傳統的線性層析方法，提高了柱效和層析效率，配合C18柱精制，可以直接得到藏紅花素純品。但該工藝繁瑣，生產周期長，不適于工業化生產。

發明內容

針對現有技術中的缺陷，本發明提供一種利用新型填料從梔子中制備藏紅花素標準品的制備方法，以提供高效制備高含量藏紅花素標準品的制備方法。

第一方面，本發明提供的利用新型填料從梔子中制備藏紅花素標準品的制備方法，將從梔子中提取的藏紅花素粗品配制成溶液，將藏紅花素粗品溶液注入裝有新型填料的動態軸向壓縮柱，采用所述新型填料為固定相，有機溶劑作為流動相，在動態軸向壓縮柱中進行解析分離，得到藏紅花素溶液，將藏紅花素溶液濃縮去除有機溶劑，再將剩余的溶液干燥得到藏紅花素標準品。

可選地，所述新型填料采用如下步驟制備：

步驟S1、將苯乙烯、丙烯酸甲酯和過氧化二苯甲酰在室溫下混合攪拌25～30min，再投入甲基環己烷，室溫攪拌25～30min，獲得單體；

步驟S2、向攪拌均勻的鹽水中投入明膠和次甲基藍，攪拌并加熱至55～60℃，停止攪拌并保溫，獲得水相；

步驟S3、將所述單體和所述水相混合攪拌10～15min，獲得混合物料，將所述混合物料緩慢升溫至68～70℃，之后開始保溫計時，保溫4～5h，蒸汽加熱緩慢升溫至70～75℃，之后開始保溫計時，保溫6～7h，整個過程中持續攪拌，所述混合物料逐漸成型為球狀顆粒的新型填料。