[發明專利]一種降解霉菌毒素的菌株yk18及其應用

有效

• 申請號: 201811370464.6
• 申請日: 2018-11-17
• 公開（公告）號: CN109321478B
• 公開（公告）日: 2021-07-16
• 發明（設計）人: 張秀江;胡虹;王秋菊;杜訊;谷立峰;胡宜亮;慕琦;蘇士賢;楊紅建
• 申請（專利權）人: 河南省科學院生物研究所有限責任公司
• 主分類號: C12N1/18
• 分類號: C12N1/18;A23L5/20;C12R1/865
• 代理公司: 鄭州天陽專利事務所(普通合伙) 41113
• 代理人: 聶孟民

1.一種降解霉菌毒素的菌株yk18，分類命名為釀酒酵母（Saccharomycescerevisiae），于2018年10月18日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號CGMCC No：16598，地址：北京市朝陽區北辰西路1號院3號。

2.權利要求1所述的降解霉菌毒素的菌株yk18在制備霉菌毒素生物降解劑中的應用，其特征在于，包括以下步驟：

（1）、生產菌種的制備，將低溫保存的釀酒酵母yk18在種子平板培養基上活化，挑取單菌接種于含種子液體發酵培養基的試管中，32℃，200r/min搖床培養24小時后，以v/v計的2%轉接于含種子液體發酵培養基的500ml的三角瓶中，32℃，200r/min搖床培養24h，得到釀酒酵母yk18發酵培養種子液；所述的種子平板培養基是：溶解10g酵母膏和20g蛋白胨于900ml水中，加入20g瓊脂粉，121℃滅菌20min，加入100ml 含20g葡萄糖滅菌溶液，pH值6.5；種子液體培養基配制：溶解10g酵母膏和20g蛋白胨于900ml水中，121℃滅菌20min，加入100ml 含20g葡萄糖滅菌溶液，pH值6.5；

（2）、液體深層有氧發酵，在1000ml的三角瓶加入液體發酵培養基300ml，按v/v計的5%添加量加入液體發酵種子液15ml，32℃，200r/min搖床培養24h，得到液體發酵培養液；所述的液體深層有氧發酵培養基配制：稱取麥芽汁培養基130.1g，加入蒸餾水或去離子水1000ml，攪拌加熱煮沸至完全溶解，121℃滅菌20min；

（3）、固體無氧發酵，在1000ml的三角瓶中加入固體發酵培養基200g，按質量比3％的添加量將釀酒酵母yk18液體發酵培養液6g加到含固體培養基的三角瓶中，用無菌玻璃棒攪拌均勻，密封瓶口，放于32℃恒溫培養箱中培養48h，得到固體無氧發酵培養物；所述的固體無氧發酵培養基配制：按質量配比麩皮∶玉米芯粉∶玉米粉∶豆粕粉＝4﹕2﹕2﹕2,按培養基干物質的總質量添加3%硫酸銨，加水使培養基含水量達到68%，pH值6.5，121℃滅菌60min；其中麩皮：粗蛋白≥15.0%，粗纖維﹤9.0%，粗灰分﹤6.0%；玉米芯粉：粗蛋白≥2.2%，粗纖維﹤29.7%，粗灰分﹤6.0%；玉米粉：粗蛋白≥10.0%，粗纖維﹤9.0%，粗灰分﹤6.0%；豆粕粉：粗蛋白≥44.0%，粗纖維﹤5.0%，粗灰分﹤6.0%。

3.根據權利要求2所述的降解霉菌毒素的菌株yk18在制備霉菌毒素生物降解劑中的應用，其特征在于，所述的固體無氧發酵培養物均勻散于瓷盤中，放于室溫，自然風干，粉碎過60-80目篩，經檢測含釀酒酵母活菌≥2.5×10⁸個/g，即為釀酒酵母yk18霉菌毒素生物降解劑。

4.一種霉菌毒素生物降解劑在制備生長肥育豬和蛋雞的防霉變飼料中的應用，該霉菌毒素生物降解劑如權利要求2所述，高效降解黃曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮、嘔吐毒素和T-2毒素。