[發(fā)明專利]一種樺褐孔菌多糖的制備方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201811370413.3 | 申請日： | 2018-11-19 |
| 公開（公告）號： | CN109134693A | 公開（公告）日： | 2019-01-04 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 劉巍 | 申請（專利權(quán)）人： | 大興安嶺至臻尚品寒帶生物技術(shù)有限公司 |
| 主分類號： | C08B37/00 | 分類號： | C08B37/00 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 165000 黑龍江省大興*** | 國省代碼： | 黑龍江;23 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 樺褐孔菌多糖 大孔吸附樹脂 雙水相萃取 脫色 多糖溶液 樺褐孔菌 提取液 破壁 制備 細(xì)胞壁 無機(jī)鹽去除 超微粉碎 多糖成品 多糖活性 多糖物質(zhì) 檸檬酸鈉 溶劑安全 脫鹽濃縮 納濾膜 微納米 再利用 超濾 納濾 收率 微濾 蛋白質(zhì) 濃縮 釋放 | ||
本發(fā)明公開了一種樺褐孔菌多糖的制備方法，該方法是先將樺褐孔菌超微粉碎，后破壁，再利用熱水進(jìn)行提取并離心，獲得提取液。提取液經(jīng)微濾超濾、雙水相萃取、大孔吸附樹脂脫色、納濾脫鹽濃縮、冷凍干燥等步驟獲得樺褐孔菌多糖產(chǎn)品。本發(fā)明具有的優(yōu)點包括：1、采用低溫微納米破壁技術(shù)對細(xì)胞壁進(jìn)行破壞，顯著提高樺褐孔菌中多糖物質(zhì)釋放。2、用雙水相萃取技術(shù)可以將大部分的蛋白質(zhì)從多糖中分離出去，避免對多糖的影響。3、利用大孔吸附樹脂脫色素，使多糖成品顏色更淺。4、采用納濾膜技術(shù)可將多糖溶液中混有的檸檬酸鈉和其他無機(jī)鹽去除，還能對多糖溶液濃縮，避免高溫對多糖活性的影響。5、使用的溶劑安全、無污染；收率高；操作簡便，成本低。
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明屬于天然有機(jī)化學(xué)領(lǐng)域，涉及一種以樺褐孔菌為原料制備樺褐孔菌多糖的方法。特別是涉及一種利用細(xì)胞破壁技術(shù)和雙水相萃取技術(shù)制備樺褐孔菌多糖的方法。
背景技術(shù)
樺褐孔菌是一種傳統(tǒng)的民間野生藥用真菌，主要分布于北緯45～50°之間的俄羅斯、北歐、波蘭、日本北海道以及中國黑龍江大小興安嶺和吉林長白山等高寒地區(qū)，由于其特殊的生長環(huán)境，被冠以“森林中的黑鉆石”、“奇幻的蘑菇”美稱。自十六世紀(jì)以來，在世界多個國家，樺褐孔菌廣泛用于治療多種消化道癌癥（如胃癌、肝癌和腸癌等）、心臟病和糖尿病等疑難雜癥。研究表明，多糖是樺褐孔菌最重要的活性成分之一，具有增強(qiáng)免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤、抗氧化、降血糖及抗病毒等多種藥理活性，已成為國內(nèi)外研究的熱點領(lǐng)域之一。
由于多糖的分子量分布較廣，造成了多糖種類很多、成分復(fù)雜，而且提取后的樺褐孔菌多糖中含有一定量的小分子化合物、大分子蛋白質(zhì)和色素，因此有必要對多糖進(jìn)行分離純化。小分子化合物的去除方法很多，但蛋白質(zhì)和色素的去除一直是多糖分離純化中的一大難題。傳統(tǒng)的去蛋白以Sevage法為主，方法操作繁瑣，效率低，采用的有機(jī)溶劑有毒性因而影響多糖的生物活性；活性炭法去除色素效果較好，但后期的活性炭粉末不易去除，過氧化氫法因為較強(qiáng)的抗氧化活性去除色素效果很好，但對多糖的活性影響較大。
雙水相萃取對于傳統(tǒng)有機(jī)相-水相的溶劑萃取來說是個全新的替代品。適宜萃取蛋白質(zhì)、酶等生物活性物質(zhì)，且不易引起蛋白質(zhì)的變性失活。由于雙水相界面張力遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于水-有機(jī)溶劑兩相體系的界面張力,有助于強(qiáng)化相際間的質(zhì)量傳遞，分相時間短,一般只需5～15min。而且易于放大和進(jìn)行連續(xù)性操作，萃取環(huán)境溫和，生物相容性高。大孔吸附樹脂是一類高分子吸附材料，具有良好的大孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)和較大的比表面積，具有很好的吸附活性，某些大孔吸附樹脂已經(jīng)應(yīng)用到植物提取物的除色素工藝中，取得了很好的效果。
申請公布號CN 104045727 A（申請?zhí)?01410288047.2）的中國專利公開了一種“利用AB-8弱極性樹脂制備樺褐孔菌粗多糖的方法”，提取過程是先將原料脫脂預(yù)處理，然后采用熱水浸提制備粗多糖。由于原料中的多糖存在于細(xì)胞中，如果不對植物細(xì)胞進(jìn)行破壁處理，那么無法完全提取出細(xì)胞中的多糖類物質(zhì)，影響提取收率。申請公布號CN 102603906 A（申請?zhí)?01110461635.8）的中國專利公開了“一種樺褐孔菌多糖水溶液的制備方法”，包括以下步驟：微波提取、醇沉、三氯乙酸TCA脫蛋白、活性炭脫色、天然澄清劑澄清。三氯乙酸在2B類致癌物清單中，對人有可能致癌?；钚蕴糠ㄈコ仉m然效果較好，但后期的活性炭粉末不易去除，影響產(chǎn)品品質(zhì)。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種樺褐孔菌多糖的制備方法。本發(fā)明先將樺褐孔菌超微粉碎，然后破壁，再利用熱水進(jìn)行提取并離心，獲得提取液。提取液經(jīng)微濾超濾、雙水相萃取、大孔吸附樹脂脫色、納濾脫鹽濃縮、冷凍干燥等步驟獲得樺褐孔菌多糖產(chǎn)品。
本發(fā)明的技術(shù)方案是這樣實現(xiàn)的，它包括以下步驟：
（1）將原料樺褐孔菌超微粉碎至300目以上，得到粉末；
（2）將步驟（1）中得到的粉末進(jìn)行細(xì)胞破壁處理；
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