[發明專利]一種基于碳點熒光內濾效應的啶蟲脒農藥檢測方法

在審

• 申請號: 201811360617.9
• 申請日: 2018-11-15
• 公開（公告）號: CN109520981A
• 公開（公告）日: 2019-03-26
• 發明（設計）人: 吳遠根;王金龍;楊文平;陶菡;馮才偉
• 申請（專利權）人: 貴州大學
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64
• 代理公司: 北京聯創佳為專利事務所(普通合伙) 11362
• 代理人: 石誠

1.一種基于碳點熒光內濾效應的啶蟲脒農藥檢測方法，其特征在于：包括有以下步驟：

A：繪制啶蟲脒濃度與熒光強度變化量標準曲線

A1：制備已知啶蟲脒濃度的待測樣液，得A1品；

A2：制備空白對照溶液，得A2品；

A3：取A1品和A2品分別用熒光光度計進行掃描測定437nm處溶液的發射峰對應的熒光強度，獲得其熒光發射光譜；

A4：根據熒光發射光譜繪制得到啶蟲脒濃度與熒光強度變化量標準曲線；

B、根據啶蟲脒濃度與熒光強度變化量標準曲線建立有關啶蟲脒濃度與熒光強度之間相互關系的回歸方程；

C：制備未知啶蟲脒濃度的待測溶液，得C品；

D：取C品用熒光光度計進行掃描測定437nm處溶液的發射峰對應的熒光強度，計算C品與A2品的熒光強度差值，將該熒光強度差值代入線性回歸方程中，即可獲得C品中啶蟲脒的濃度。

2.根據權利要求1所述的基于碳點熒光內濾效應的啶蟲脒農藥檢測方法，其特征在于：所述A，繪制啶蟲脒濃度與熒光強度變化量標準曲線的具體方法為：

A1：取多支刻度離心管，每支刻度離心管加入一種已知濃度的啶蟲脒標準液和啶蟲脒適配體，混勻后孵育，然后加入AuNPs溶液混勻孵育，接著再加入CDs溶液繼續孵育，最后加入HEPES緩沖液混勻即可制備得到待測樣液，為A1品；

A2：取1支刻度離心管，用二蒸水替代已知濃度的啶蟲脒標準液，按照A1的方法即可制備得到空白對照溶液，為A2品；

A3：取A1品和A2品分別用熒光光度計進行掃描測定437nm處溶液的發射峰對應的熒光強度，獲得其熒光發射光譜；

A4：根據吸收光譜，將不同濃度的A1品與A2品之間的熒光強度差值作為縱坐標，啶蟲脒濃度作為橫坐標繪制啶蟲脒吸光度變化量標準曲線；

所述步驟B中，當啶蟲脒濃度為5μg/L≤c≤100μg/L時，啶蟲脒濃度與熒光強度之間相互關系的回歸方程為：y＝2.31c+3.07；

當啶蟲脒濃度為100μg/L＜c≤4000μg/L時，

y為熒光強度差值＝含啶蟲脒的待測品的熒光強度-A2品的熒光強度；

所述的制備未知啶蟲脒濃度的待測溶液C品的具體方法為：

C、用實際樣液替代已知濃度的啶蟲脒標準液，按照A1的方法即可制備得到未知啶蟲脒濃度的待測溶液，為C品。

3.根據權利要求2所述的基于碳點熒光內濾效應的啶蟲脒農藥檢測方法，其特征在于：所述的啶蟲脒適配體的堿基組成為：5’-TGTAATTTGTCTGCAGCGGTTCTTGATCGCTGACACCATATTATGAAGA-3’，其濃度為25nM。

4.根據權利要求2所述的基于碳點熒光內濾效應的啶蟲脒農藥檢測方法，其特征在于：所述的AuNPs溶液的濃度為3.2nM；CDs溶液的濃度為0.2mg·ml^-1。

5.根據權利要求2所述的基于碳點熒光內濾效應的啶蟲脒農藥檢測方法，其特征在于：所述的HEPES緩沖液pH值為8.0，其濃度為20mM。

6.根據權利要求2所述的基于碳點熒光內濾效應的啶蟲脒農藥檢測方法，其特征在于：所述的步驟A3及步驟D中，獲得熒光發射光譜的具體方法：取待測品置于石英皿中，用F-4600熒光光度計進行掃描測定437nm處溶液的發射峰對應的熒光強度，獲得其熒光發射光譜，波長掃描范圍為380-600nm。

7.根據權利要求2所述的基于碳點熒光內濾效應的啶蟲脒農藥檢測方法，其特征在于：所述的A1品、A2品或C品制備過程中：加入已知濃度的啶蟲脒標準液、二蒸水或實際樣液，和啶蟲脒適配體混勻后置于25—35℃條件下孵育5—15min，然后加入AuNPs溶液，混勻后置于25—35℃條件下再孵育5—15min，之后加入CDs溶液，混勻后置于25—35℃條件下再孵育5—15min，最后再加入HEPES緩沖液混勻。