[發明專利]一種豆瓣蘭種質創制的方法

有效

• 申請號: 201811354640.7
• 申請日: 2018-11-14
• 公開（公告）號: CN109258377B
• 公開（公告）日: 2022-05-17
• 發明（設計）人: 周艷;周慶;張梅;胡瑾;周洪英;李依嫚;馮佑鴻
• 申請（專利權）人: 貴州省植物園（貴州省園林科學研究所;貴州省植物研究所）
• 主分類號: A01G22/63
• 分類號: A01G22/63;A01H1/02;A01H4/00
• 代理公司: 北京睿智保誠專利代理事務所(普通合伙) 11732
• 代理人: 周新楣

1.一種豆瓣蘭種質創制的方法，其特征在于，由以下步驟組成：

步驟1、母本材料的選擇與培養：

選擇葉面平展、有光澤、無病毒病、無病蟲侵害；假鱗莖充實飽滿、根系粗壯、長勢強且有活力的豆瓣蘭“綠素”作為母本材料栽培在質量比為1:2:1的陶粒、蘭花專用土和腐殖土的混合基質中，栽培用的容器為蘭花專用培養盆，放置到溫室大棚中，定期澆水、施肥和防治病蟲害；

步驟2、父本材料的選擇與培養：

選擇葉面有光澤、墨綠；假鱗莖充實飽滿、根系粗壯、長勢強且無病蟲害侵染的豆瓣蘭“紅素”為父本材料栽培在體積比為1:2:1的陶粒、蘭花專用土和腐殖土的混合基質中，栽培用的容器為蘭花專用培養盆，放置到溫室大棚中，定期澆水、施肥和防治病蟲害；

步驟3、父母本材料的栽培與花期調控：花期調控栽培采用光照調節、營養調節、濕度調節措施，綜合調控；

步驟4、雜交授粉：

雌花最好的授粉時間是在開花后3-4天，授粉時，先將母本的雌花的花粉塊除出，再將采集的父本花粉塊用小鑷鑷起輕輕地放在母本的柱頭上；因為柱頭有粘液，不用擔心花粉塊脫落；為防止已授粉的花再被昆蟲傳粉，將母本花上的瓣去除；用鉛筆寫好標牌，掛在花枝上；做好刻錄，寫清父母親本、授粉日期；

步驟5、子房和種子發育：

授粉后每天觀察授粉花朵的變化并防止損壞，母本在授粉10日后子房開始膨大，認為雜交成功；綜合調控植株的光照、水分、營養；

步驟6、無菌播種：

授粉種子180d后，無菌播種到培養基中進行培養；播種30-40d后見種子萌發成白色的原球莖；60d后多數原球莖長大并轉綠；

步驟7、原球莖增殖培養：

將萌發的原球莖轉接到增殖培養基中進行培養；30d后分化出苗；

步驟8、生根培養：

將較大的無根苗轉接到生根培養基中，培養25d后，長出3-5條肉質根，平均苗高2cm，所述生根培養基配方為：1/2MS+IBA2.0+1.0g/L AC，培養基中含瓊脂體積百分含量為1.0％，蔗糖體積百分含量為3.0％，pH5.6；培養溫度為24±1℃，光照時間12h/d；

步驟9、練苗移栽：

將培養瓶移至室溫下進行練苗處理，經練苗后的苗用小竹簽伸入瓶中，輕輕移出；移苗時盡量不傷根和嫩芽，然后置于水中漂洗，將基部培養基洗凈，晾干；上盆移栽時，先將花盆浸12h，取出曬干，使其干凈無雜菌，放入碎瓦礫作底層，再在其上放入練苗基質，用手壓平后再在其上挖出一個小洞，然后將小苗的根放入洞內，鋪基質將小苗固定，種植后即在其上灑水，使小苗與基質更緊密固定；

步驟10、移栽后管理：

苗移栽后送入溫室大棚：加強通風透氣，結合進行人工噴霧；每隔7天噴一次10％的磷酸二氫鉀水溶液；移栽成活后4-6周，調整光照強度，遮蔭30％，保持基質濕潤，每隔7天噴1次800-1000倍的百菌清或多菌靈；

所述步驟3中的花期調控栽培采用光照調節、營養調節、濕度調節措施，綜合調控具體為：從10月到第二年3月接受全光照，4月遮光30％，5-9月遮光50％；假鱗莖成熟后進入花芽分化期，施用N:P:K質量比為1:3:2的高P肥促花；同時常在地面噴水，保持地面潮濕，空氣相對濕度60％以上，創造適宜的小氣候環境，使父母本花期在4-5月相遇；

所述步驟5中的綜合調控植株的光照、水分、營養具體為：保持60％-70％的光照強度，視天氣情況1周噴1-2次水，2周噴一次體積比為10％的磷酸二氫鉀水溶液；

所述步驟6中的培養基為MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.05mg/L+椰乳100mL/L，培養基中含瓊脂體積百分含量為1.0％，蔗糖體積百分含量為3.0％，pH5.6；培養條件為：溫度為24±1℃，暗培養1周后，轉到光照2000lx下培養，光照時間12h/d；

所述步驟7中的增殖培養配方為：1/2MS+6-BA 1.0mg/L+NAA0.1mg/L+100mL/L香蕉汁，培養基中含瓊脂體積百分含量為1.0％，蔗糖體積百分含量為3.0％，pH5.6，培養溫度為24±1℃，光照時間12h/d。

2.根據權利要求1所述的豆瓣蘭種質創制的方法，其特征在于，所述步驟9中的練苗時間為將培養瓶移至室溫下存放3天后打開瓶蓋，放于架上4-12h；練苗基質：體積比為1:2的水苔和木屑。

3.根據權利要求1所述的豆瓣蘭種質創制的方法，其特征在于，所述步驟10中的溫室大棚的遮蔭50％，溫度在20-25℃，濕度50-70％。