[發(fā)明專利]一種金絲梅組織培養(yǎng)快速繁殖方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201811347726.7
• 申請日: 2018-11-13
• 公開（公告）號: CN109496841B
• 公開（公告）日: 2022-03-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李潞濱;劉蕾;許麗君;游勝利
• 申請（專利權(quán)）人: 中國林業(yè)科學(xué)研究院林業(yè)研究所
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京凱特來知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11260
• 代理人: 鄭立明;趙鎮(zhèn)勇

本發(fā)明公開了一種金絲梅組織培養(yǎng)快速繁殖方法，以金絲梅莖段為外植體，進(jìn)行組培快繁，外植體表面消毒用5％的次氯酸鈉浸泡；初代培養(yǎng)的培養(yǎng)基配方為MS+6?BA 2.0mg/L+NAA 0.1mg/L；繼代增殖的培養(yǎng)基為MS+6?BA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L+GA₃0.1mg/L；生根的培養(yǎng)基為1/2MS+IBA 0.5mg/L+活性炭0.1g/L；移栽前將生根苗從培養(yǎng)瓶內(nèi)移出并用2％的多菌靈溶液洗凈根上粘附的培養(yǎng)基，栽于事先準(zhǔn)備好的草炭土∶珍珠巖＝2∶1的混合基質(zhì)容器中。對環(huán)境的危害較小，誘導(dǎo)率高，節(jié)省了成本；移栽后植株生長良好，移栽后的成活率為100％。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種植物組織培養(yǎng)方法，尤其涉及一種金絲梅組織培養(yǎng)快速繁殖方法。

背景技術(shù)

植物組織培養(yǎng)作為現(xiàn)代植物生物技術(shù)的一個必不可少的手段和重要組成部分，是指在無菌條件下，通過人為控制，利用人工培養(yǎng)基，對植物的組織、器官、胚胎、細(xì)胞、原生質(zhì)體等進(jìn)行離體培養(yǎng)，使其發(fā)育成完整植株的過程。

金絲梅(Hypericum patulum)別名云南連翹、芒種花，為藤黃科(Guttiferae)金絲桃屬(Hypericum)半常綠灌木。高0.3-1.5米，莖淡紅至橙色，花蕾寬卵珠形，花瓣金黃色，無紅暈，多少內(nèi)彎，長圓狀倒卵形至寬倒卵形，雄蕊多數(shù)，花期6-7月，其大部分品種有金黃的花朵及鮮艷的果色，在中國主要分布于陜西、四川、云南、貴州、江西、湖南、湖北、安徽、江蘇、浙江及福建等省，在甘肅天水地區(qū)進(jìn)行過引種栽培。

金絲桃屬(Hypericum)植物大部分品種因其觀賞價(jià)值，是良好的園林綠化品種和切花材料，在切花以及盆花市場上越來越受到消費(fèi)者青睞。同時，對金絲桃屬(Hypericum)植物復(fù)雜多樣的生物活性物質(zhì)、藥理作用等方向的深入研究更為對該屬植物開發(fā)利用提供了科學(xué)依據(jù)。

金絲桃屬植物有廣泛的應(yīng)用前景，但傳統(tǒng)的繁殖方法周期較長，繁殖系數(shù)低，不能滿足工廠化生產(chǎn)及市場的需求，而組織培養(yǎng)的快繁技術(shù)可以彌補(bǔ)其不足。建立穩(wěn)定高效的快繁體系，不僅可以有效保存種質(zhì)資源，還可以通過脫毒技術(shù)防止物種退化，并為工廠化生產(chǎn)提供有力依據(jù)。

目前，組織培養(yǎng)技術(shù)在金絲桃屬植物的育種工作中應(yīng)用廣泛，利用莖段、幼根、幼葉、幼嫩子房等作為外植體進(jìn)行快繁。邢震以多蕊金絲桃的莖段為外植體，以MS為基本培養(yǎng)基，在添加NAA 0.5mg/kg，BA 1.0～4.0mg/kg時芽誘導(dǎo)率較高；在添加IBA 3.0mg/kg時，苗復(fù)壯效果最好。陳全戰(zhàn)等以貫葉金絲桃的幼根、幼莖、幼葉為外植體進(jìn)行試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)1/2MS+BA 1.3～1.6mg/L+NAA 0.2mg/L有利于愈傷組織培養(yǎng)；1/2MS+BA 1.3～1.6mg/L+NAA0.15mg/L有利于不定芽的形成；1/2MS+IBA 0.5～0.8mg/L+3.0％蔗糖有利于不定根誘導(dǎo)；任繼文等以金絲桃嫩莖為外植體，發(fā)現(xiàn)MS+BA 3.0mg/L+NAA 0.1mg/L對金絲桃嫩莖切段的再生作用較為顯著，MS+BA 2.0mg/L+IBA 0.2mg/L+GA₃ 0.5mg/L上增殖效果好，增殖倍數(shù)為6-8倍，1/2MS+IAA 0.2mg/L上生根效果最好。劉艷等研究發(fā)現(xiàn)，貴州金絲桃莖段為最適外植體，在1/4MS+TDZ 0.5mg/L+NAA 0.01mg/L上進(jìn)行芽的誘導(dǎo)效果最好；在1/4MS+ZT 1.5mg/L+NAA 1.0mg/L上繼代增殖效果最好；在1/4MS+ZT 0.1mg/L+NAA 1.0mg/L上生根最好。另外，植物組織培養(yǎng)技術(shù)在金絲桃屬植物次生代謝產(chǎn)物的研究中也起著重要的作用。劉曉娜通過研究貫葉連翹和元寶草植物組織培養(yǎng)過程中金絲桃素(Hypericin，HP)、假金絲桃素(Pseudohypericin，PHP)和貫葉金絲桃素(Hyperforin，HF)等活性成分的變化規(guī)律以及這些活性成分的代謝調(diào)控，對這些活性成分的生物合成途徑進(jìn)行了探索。