[發明專利]一種馬鈴薯脫毒試管苗基因資源的低溫保存方法

有效

• 申請號: 201811346500.5
• 申請日: 2018-11-13
• 公開（公告）號: CN109430055B
• 公開（公告）日: 2022-02-08
• 發明（設計）人: 王克秀;唐銘霞;胡建軍;何衛;李華鵬;李洪浩;楊雯婷
• 申請（專利權）人: 四川省農業科學院作物研究所
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京眾合誠成知識產權代理有限公司 11246
• 代理人: 苗艷榮

本發明公開了一種馬鈴薯脫毒試管苗基因資源的低溫保存方法，包括以下步驟：將帶有1個葉芽莖段的脫毒試管苗，轉接入裝有培養基的試管后，在21?23℃，光周期16H/d，光照強度3000?4000lux環境下培養至2?3cm高，即轉入溫度：4?6℃；光照強度：1000?2000lux；光周期：10?12H/d的人工氣候箱內保存。本發明保存周期延長至1.5?2年；本發明保存后的試管苗活力強，恢復能力好。

技術領域

本發明屬于馬鈴薯脫毒試管苗儲藏技術領域，具體地說，涉及一種馬鈴薯脫毒試管苗基因資源的低溫保存方法。

背景技術

近年來，植物種質資源流失的情況越來越嚴重，植物種質資源保存已成為全球性關注的課題(鞏振輝,申書興.植物組織培養[M].北京:化學工業出版社,2007:178-189.)，農林業種質資源保護利用已經引起政府部門的高度重視。不同于實生種子繁殖作物，馬鈴薯作為無性繁殖作物，其種質資源保存有其特殊性，馬鈴薯種質資源可以通過塊莖、試管苗保存，部分種質資源也可通過實生種子保存。

目前馬鈴薯種質資源最常用的方法是塊莖保存和組培苗保存，而塊莖循環保存過程中需要花費大量的人力、物力和財力，且保存效果不理想，保存周期短，貯存空間大，存在資源退化、混雜或遺失等高風險；而傳統的組培苗保存，保存周期短，工作量大，貯存空間大，同樣易造成資源退化或遺失等高風險；針對上述保存方法的缺陷和馬鈴薯自身特點，脫毒試管苗緩慢生長離體保存被證明是行之有效的種質資源保存方法，以組織培養技術為基礎，通過改變培養物生長的內外界環境條件，使細胞生長降至最小限度，以延長繼代間隔時間，減少繼代次數，實現植物種質資源的中長期保存目的(陳輝,陳曉玲,陳龍清,等.百合種質資源限制生長法保存研究[J].園藝學報,2006,33(4):789-793.)，此法已經成功地應用于多種植物(趙海紅,貝麗霞,丁俊杰.不同生長延緩劑對馬鈴薯脫毒試管苗保存的影響[J].黑龍江農業科學,2010(5):1-2；王艷芳,房偉民,陳發棣,等.‘神馬’菊花的離體保存及遺傳穩定性[J].西北植物學報,2007,27(7):1341-1348.)，但目前該技術通常通過在培養基中加入高濃度植物生長抑制劑的方法延長保存期，依然存在保存周期短(不超過1年)，存活率低和植株活力低，恢復能力弱，資源保存混亂，不便于有序管理等缺點，可能引發遺傳變異等風險；而超低溫保存方法尚處于實驗室研究階段，不能用于大規模種質資源的保存。

因此有必要提供一種新的馬鈴薯脫毒試管苗基因資源的低溫保存方法。

發明內容

有鑒于此，本發明提供了一種馬鈴薯脫毒試管苗基因資源的低溫保存方法。

為了解決上述技術問題，本發明公開了一種馬鈴薯脫毒試管苗基因資源的低溫保存方法，包括以下步驟：將帶有1個葉芽莖段的脫毒試管苗，轉接入裝有培養基的試管后，在21-23℃，光周期16H/d，光照強度3000-4000lux環境下培養至2-3cm高，即轉入溫度：4-6℃；光照強度：1000-2000lux；光周期：10-12H/d的人工氣候箱內保存,所述培養基為MS+蔗糖2-3％+瓊脂粉0.6％+山梨醇3-5％+赤霉素0.1-0.2mg/L，pH 5.8-6.0。

可選地，試管進入人工氣候箱前，每份資源貼有自身條碼和編號。

本發明還公開了一種馬鈴薯脫毒試管苗基因資源的低溫保存培養基，具體為：MS+蔗糖2-3％+瓊脂粉0.6％+山梨醇3-5％+赤霉素0.1-0.2mg/L，pH5.8-6.0。

與現有技術相比，本發明可以獲得包括以下技術效果：

1)本發明保存周期延長至1.5-2年；

2)本發明保存后的試管苗活力強，恢復能力好。

3)本發明資源條碼編號，管理有序。

當然，實施本發明的任一產品并不一定需要同時達到以上所述的所有技術效果。

附圖說明