[發明專利]檢測水稻耐低溫基因COLD1基因型的dCAPS標記及應用有效
| 申請號： | 201811338846.0 | 申請日： | 2018-11-12 |
| 公開（公告）號： | CN109251996B | 公開（公告）日： | 2022-03-25 |
| 發明（設計）人： | 儲黃偉;曹黎明;程燦;涂榮劍;周繼華;牛付安;孫濱;楊佳;胡雪嬌 | 申請（專利權）人： | 上海市農業科學院 |
| 主分類號： | C12Q1/6895 | 分類號： | C12Q1/6895;C12N15/11 |
| 代理公司： | 浙江千克知識產權代理有限公司 33246 | 代理人： | 黎雙華 |
| 地址： | 201106 *** | 國省代碼： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 檢測 水稻 低溫 基因 cold1 基因型 dcaps 標記 應用 | ||
【權利要求書】：
1.檢測水稻耐低溫基因
dcaps-F：5'-CCGTCAATCTGCCTTACAGCTATCTGTCAC-3'，
dcaps-R：5'-TGAGCTGCCTTTCCAATGTTTTGAAGGCC-3'。
2.檢測水稻耐低溫基因
（1）以待測樣本的基因組DNA為模板，利用dCAPS標記通過PCR方法擴增目標序列；所述dCAPS標記的序列為：
dcaps-F：5'-CCGTCAATCTGCCTTACAGCTATCTGTCAC-3'，
dcaps-R：5'-TGAGCTGCCTTTCCAATGTTTTGAAGGCC-3'；
PCR反應程序如下：94℃，5min；94℃，30s，60℃，30s，72℃，30s，35個循環；72℃，10min；
（2）利用限制性內切酶StuI對擴增產物進行酶切，再對酶切產物進行聚丙烯酰胺凝膠電泳分離，然后用硝酸銀染色檢測；
（3）根據電泳結果判定
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