[發明專利]用于檢測髓過氧化物酶活性熒光探針及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201811333711.5
• 申請日: 2018-11-09
• 公開（公告）號: CN109336835B
• 公開（公告）日: 2022-10-11
• 發明（設計）人: 易濤;劉玲燕;魏鵬;劉中寬;李若涵;曹春艷
• 申請（專利權）人: 復旦大學
• 主分類號: C07D265/38
• 分類號: C07D265/38;C07D279/30;C09K11/06;G01N21/64
• 代理公司: 上海正旦專利代理有限公司 31200
• 代理人: 陸飛;陸尤

1.一種用于檢測髓過氧化物酶活性的熒光探針，為具有式FD-301或FD-302所示結構的化合物：

2.一種如權利要求1所述的用于檢測髓過氧化物酶活性的熒光探針的制備方法，其特征在于：

(一)FD-301的合成路線如下：

具體步驟為：在三頸燒瓶中加入2.0g、6.25mmol的亞甲基藍，用15mL二氯甲烷和40mL水溶解；向體系中加入2.65g、25.00mmol碳酸鈉；將體系置于40℃下攪拌，氮氣保護后向體系中滴加用20mL水溶解的3.26g、18.75mmol的連二亞硫酸鈉；加完后反應20min，此時體系發生明顯的分層，下層為黃色溶液；將體系靜置，然后向體系中滴加10mL二氯甲烷溶解的0.93g、3.13mmol的三光氣；滴完后轉移至室溫下攪拌反應1h；將體系靜置，分層后用注射器吸出下層清夜，滴入混有181.32mg、1.2mmol 4-氨基苯甲酸酰肼，0.5mL、3.6mmol的三乙胺，以及5mL二氯甲烷的混合體系中，滴加過程中保持體系在冰水浴，滴完后轉移至室溫下攪拌反應，直到反應完畢；

過濾，除去體系中的不溶物，將濾液傾入冰水中，用乙酸乙酯萃取；合并有機相，用200mL×3飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥；在旋轉蒸發器上除溶劑，剩余物用硅膠柱層析純化，得到淡綠色固體產物FD-301；

(二)FD-302的合成路線如下：

制備的步驟為：

在三口燒瓶中加入2.0g、5.56mmol的堿性藍3，用15mL二氯甲烷和40mL水溶解；向體系中加入2.65g、25.00mmol的碳酸鈉，將體系置于40℃下攪拌，氮氣保護后向體系中滴加用20mL水溶解的3.26g、18.75mmol的連二亞硫酸鈉；加完后反應20min，此時體系發生明顯的分層，下層為黃色溶液；將體系靜置，然后向體系中滴加10mL二氯甲烷溶解的0.93g、3.13mmol的三光氣，滴完后轉移至室溫下攪拌反應1h；將體系靜置，分層后用注射器吸出下層清夜，滴入混有162.3mg、1.07mmol的4-氨基苯甲酸酰肼，0.5mL、3.6mmol的三乙胺，以及5mL二氯甲烷的混合體系中，滴加過程中保持體系在冰水浴，滴完后轉移至室溫下攪拌反應，直到反應完畢；

過濾，除去體系中的不溶物，將濾液傾入冰水中，用乙酸乙酯萃取；合并有機相，用200mL×3飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥；在旋轉蒸發器上除去溶劑，剩余物用硅膠柱層析純化，即得到淡綠色固體產物FD-302。