[發明專利]一種蘇合香提取物的制備方法及其應用

有效

• 申請號: 201811332140.3
• 申請日: 2018-11-09
• 公開（公告）號: CN109536394B
• 公開（公告）日: 2021-05-18
• 發明（設計）人: 羅誠浩;陳義坤;黃龍;柯煒昌;劉磊
• 申請（專利權）人: 湖北中煙工業有限責任公司
• 主分類號: C12N1/16
• 分類號: C12N1/16;C12N1/20;C12P39/00;C12P1/04;C12P1/02;C12N11/02;C12R1/645;C12R1/07;A24B3/12;A24B15/24;A24B15/26
• 代理公司: 武漢楚天專利事務所 42113
• 代理人: 孔敏

1.一種蘇合香提取物的制備方法，其特征在于包括如下步驟：

（1）原料前處理：蘇合香樹皮榨取樹脂后的殘渣，經粉碎機粉碎至40目~120目粉末；

（2）微生物菌株的活化：將扣囊復膜孢酵母（Saccharomycopsis fibuligera）和食甲醇芽孢桿菌(Bacillus methylotrophicus) VJ4-1的活性固體凍干菌粉，加入到5~20倍質量的滅菌處理的質量濃度為5~30%葡萄糖或果糖溶液中，置于30~45℃水浴鍋活化30~60 min，得到微生物菌株活化液，其中所述的食甲醇芽孢桿菌(Bacillus methylotrophicus) VJ4-1保藏號為CCTCC NO：2012004，于2012年1月11日保藏于武漢大學中國典型培養物保藏中心；

（3）固定化載體制備：將煙桿、花生殼洗凈烘干，將煙桿處理成約1 cm長的碎塊，與花生殼按1:0.5~2的質量比混合，經高壓滅菌后烘干，得到固定化載體；

（4）生物制劑的固定化處理：將一定量上述步驟（3）滅菌烘干后的固定化載體，裝入微濾袋中，放入容器，按照固定化載體與微生物菌株活化液質量比為1:1~10，加入已培養好的活化液，再加入一定量的α-L-呋喃阿拉伯糖苷酶，混合均勻，放置于4+0.5℃冷藏柜固定12~72 h，得到生物制劑-固定化載體；

（5）吸附水解發酵：將步驟（1）所得蘇合香樹皮殘渣粉末與5~15倍質量的水混合均勻，加入步驟（4）所述裝有生物制劑-固定化載體的微孔濾袋，其中生物制劑-固定化載體與蘇合香樹皮殘渣粉末質量比為1:2.1~4，在溫度為35~65 ℃，勻速攪拌，添加檸檬酸調節pH值為4.0~6.0，發酵1~6 d，取出微孔濾袋，抽濾得到蘇合香發酵液A與蘇合香殘渣；

（6）將步驟（5）抽濾所得蘇合香殘渣，按速率0.1~1.0 kg/10 min投料至浸出艙，開啟主機和超聲波發生器，調節溫度60~98℃，料液比為質量比1:2~10，加入氫氧化鉀攪拌均勻，調節pH值為7~14，從浸出艙低端運行0.2~1 h后調節出液閥門均勻放液，控制溶劑加入流量，保持浸出倉液位平衡，連續逆流超聲提取達30~60 min時，投料加入一定比例的氫氧化鋇、復合氨基酸，當連續逆流超聲提取共達90~150 min時，停止生產工藝，排渣，得到蘇合香浸出液B；

（7）液液萃?。簩⒉襟E（5）和（6）中的蘇合香發酵液A和浸出液B混合，加入蘇合香樹皮殘渣粉末質量1~15倍的乙酸乙酯，45~65 ℃加熱回流2~6 h，減壓抽濾保留濾液，45~55 ℃減壓濃縮揮發溶劑得到蘇合香浸膏，加入質量比1:0.5~3的丙二醇，得到蘇合香提取物；

所述步驟（4）中α-L-呋喃阿拉伯糖苷酶為食品級，酶活為100~2000μ/g ，與所述步驟（2）的活性固體凍干菌粉按質量比為1:0.5~2；

所述步驟（6）中的復合氨基酸為苯丙氨酸、異亮氨酸、蘇氨酸，食品級，三者之間的質量比為1:0.5~2:0.5~2；

所述步驟（6）中的氫氧化鉀、氫氧化鋇為分析純級，分別占蘇合香樹皮榨取樹脂后的殘渣粉末質量的0.01~0.2%和0.1~1%。

2.如權利要求1所述的蘇合香提取物的制備方法，其特征在于：所述步驟（2）中的扣囊復膜孢酵母（Saccharomycopsisfibuligera）和食甲醇芽孢桿菌(Bacillusmethylotrophicus) VJ4-1均為食品級，活力分別為10~30 μ /mg ，葡萄糖、果糖為食品級。

3.如權利要求1所述的蘇合香提取物的制備方法，其特征在于：所述步驟（5）中檸檬酸為食品級，勻速攪拌的轉速為20~80 rpm。

4.如權利要求1所述的蘇合香提取物的制備方法，其特征在于：所述步驟（7）中的乙酸乙酯為食品級。

5.如權利要求1所述的蘇合香提取物的制備方法，其特征在于：所述步驟（7）中的蘇合香浸膏的相對密度為1.02~1.2。

6.一種如權利要求1-5中任一項所述方法制備的蘇合香提取物在電加熱或碳加熱煙草中的應用，按0.1~10 ppm的質量比加入電加熱煙草卷煙紙中、加入碳加熱煙草煙絲中或加入碳加熱煙草濾棒中。