[發明專利]一種有助于體外獲得Th22細胞的組合物及其用途

有效

• 申請號: 201811330774.5
• 申請日: 2018-11-09
• 公開（公告）號: CN109439626B
• 公開（公告）日: 2022-10-14
• 發明（設計）人: 楊驥;李明
• 申請（專利權）人: 復旦大學附屬中山醫院
• 主分類號: C12N5/0783
• 分類號: C12N5/0783;A61K35/17;A61P37/02;A61P29/00;A61P25/00;A61P19/02;A61P19/08;A61P1/16;A61P3/10;A61P9/10;A61P3/06;A61P17/06;A61P17/00
• 代理公司: 上海申匯專利代理有限公司 31001
• 代理人: 翁若瑩;王婧

本發明提供了一種有助于體外獲得Th22細胞的組合物及其用途，所述的有助于體外獲得Th22細胞的組合物，其特征在于，包括：幼稚性B細胞或Breg細胞，以及TGF?β、IL?6、IL?1β、抗IL?4抗體、抗IFN?γ抗體、抗IL?2抗體、抗CD3抗體和抗CD28抗體。本發明擴增的Th22細胞可用來治療一些自身免疫性疾病，如紅斑狼瘡、皮肌炎、血管炎、干燥綜合征、硬皮病、類風濕性關節炎、強直性脊柱炎、多發性硬化、自身免疫性肝炎；慢性炎癥性疾病，如糖尿病、冠心病、高脂血癥、濕疹、白癜風、異位性皮炎、扁平苔蘚等。

技術領域

本發明涉及體外Breg細胞聯合細胞因子體外誘導獲得Th22細胞的方法，涉 及一種有助于體外獲得Th22的組合物、方法及其在紅斑狼瘡、類風濕性關節炎、 硬皮病等炎癥性疾病中的應用。

背景技術

調節性B細胞(Breg)是一群具有免疫調節作用的B細胞，因其膜標記為 CD19⁺CD5⁺CD1d^high并主要分泌抑制性的細胞因子IL-10，故又稱為B10細胞。 Breg細胞具有免疫抑制作用，可抑制其他效應性T細胞的增殖和分泌。基于Breg 細胞的負向調控作用，因此有潛力用于治療自身免疫性疾病如紅斑狼瘡(SLE)、 膠原誘導關節炎(CIA)、實驗性自身免疫性腦脊髓炎(EAE)、慢性結腸炎(CC) 等。但Breg細胞治療自身免疫性疾病的具體機制并不清楚，進而限制了其臨床 的使用。

Th22細胞是一群分泌IL-22的CD4+T細胞，Th17細胞也可以分泌部分的IL-22，TNF-α和IL-6可具有促進Th22分化的作用，其可通過分泌的IL-22起負向的免疫調 節作用，在自身免疫性疾病發病過程可能發揮調控免疫反應的作用。但在自身免 疫性疾病病情活動和發病過程中，Th22細胞減少，分泌IL-22的量減少，進而不 能控制亢進的自身免疫炎癥損傷。但Th22細胞的體外誘導分化和擴增較難，目前 并沒有找到Th22細胞有效的體外擴增方法。如能找到體外擴增Th22的方法，可 幫助快捷和高效的擴增Th22細胞，擴增后的Th22可用于自身免疫性疾病的細胞 治療。

發明內容

本發明的目的之一是提供一種有助于體外獲得Th22細胞的組合物。

本發明的另一目的是提供上述組合物的用途。

為了達到上述目的，本發明提供了一種有助于體外獲得Th22細胞的組合物， 其特征在于，包括：幼稚性B細胞或Breg細胞，以及TGF-β、IL-6、IL-1β、抗 IL-4抗體、抗IFN-γ抗體、抗IL-2抗體、抗CD3抗體和抗CD28抗體。

優選地，所述的有助于體外獲得Th22細胞的組合物還包括抗IgM抗體和 抗CD40L抗體。

優選地，所述的有助于體外獲得Th22細胞的組合物包括：

幼稚性B細胞，以及抗CD3抗體1.8-2.2μg/ml、抗CD28抗體1.8-2.2μg/ml、 TGF-β0.5-5ng/ml、IL-6 20-100ng/ml、IL-1β 10-20ng/ml、抗IL-4抗體8-12 μg/ml、抗IFN-γ抗體8-12μg/ml、抗IL-2抗體8-12μg/ml，抗IgM抗體1.8-2.2 μg/ml、抗CD40L抗體1.8-2.2μg/ml；

或包括：Breg細胞，以及抗CD3抗體1.8-2.2μg/ml、抗CD28抗體1.8-2.2 μg/ml、TGF-β 0.5-5ng/ml、IL-6 20-100ng/ml、IL-1β 10-20ng/ml、抗IL-4 抗體8-12μg/ml、抗IFN-γ抗體8-12μg/ml、抗IL-2抗體8-12μg/ml。

更優選地，所述的有助于體外獲得Th22細胞的組合物包括：