[發明專利]一種抗氧化蘭州百合多糖片段的制備方法

在審

• 申請號: 201811330201.2
• 申請日: 2018-11-02
• 公開（公告）號: CN109535271A
• 公開（公告）日: 2019-03-29
• 發明（設計）人: 康淑荷;郭忠;陸麗娜;趙晉
• 申請（專利權）人: 西北民族大學
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種抗氧化蘭州百合多糖片段的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

S1：備料：原料主要有：蘭州百合；

S2：蘭州百合粗總多糖的制備：采用加熱回流與超聲輔助提取交替處理經無水乙醇除脂后的百合粉末，制備百合粗多糖；

S3：蘭州百合總多糖的純化：采用Sevage法磁力攪拌除蛋白，制備蘭州百合總多糖；

S4：蘭州百合總多糖分級純化：脫蛋白后的蘭州百合總多糖通過DEAE-52-纖維素柱層析，依次用超純水、0.04-0.2mol/L NaCl、0.04-0.2mol/L NaOH洗脫，得到百合多糖組分，分別編號為LLPI、LLPII、LLPIII；

S5：蘭州百合多糖片段制備：取S4中制備的LLPII，采用0.04-0.2mol/L的鹽酸，N₂保護下于60-70℃水浴中水解2-4小時后，用堿中和，透析后，依次采用Sephadex-G50柱層析，Sephadex-G100柱層析純化，得到百合多糖片段編號為LLPIIa；

S6：經高效液相凝膠色譜測定具有抗氧化活性的百合多糖片段LLPIIa重均分子量Mw在7000-11000范圍內。

2.如權利要求1所述的一種抗氧化蘭州百合多糖片段的制備方法，其特征在于，S2中蘭州百合粗總多糖具體制備步驟如下：

S201：將原料蘭州百合干，粉碎過篩，無水乙醇回流，再超聲30-40min除脂，重復2-3次；

S202：采用加熱回流與超聲輔助提取交替處理百合粉末，制備百合粗多糖。

3.如權利要求1所述的一種抗氧化蘭州百合多糖片段的制備方法，其特征在于，S3中蘭州百合總多糖的純化，具體方法如下：

S301：采用Sevage法磁力攪拌除蛋白；

S302：蛋白完全除去后，透析多糖溶液，制備蘭州百合總多糖。

4.如權利要求1所述的一種抗氧化蘭州百合多糖片段的制備方法，其特征在于，S4中具體方法如下：

S401：脫蛋白后的蘭州百合總多糖通過DEAE-52-纖維素柱層析，依次用超純水、0.04-0.2mol/LNaCl、0.04-0.2mol/L NaOH洗脫，得到三組洗脫液；

S402：分別合并濃縮，超純水透析，濃縮，冰箱冷藏，無水乙醇沉淀，得到百合多糖組分，分別編號為LLPI、LLPII、LLPIII；

S403：取S402中制備的LLPII，采用0.04-0.2mol/L的鹽酸，N₂保護下于60-70℃水浴中水解2-4小時后，用堿中和，透析至無氯離子，透析后的糖液濃縮后，通過Sephadex-G50柱層析，Sephadex-G100柱層析純化，得到百合多糖片段編號為LLPIIa，經高效液相凝膠色譜測定其重均分子量Mw在7000-11000范圍內。

5.如權利要求1所述的一種抗氧化蘭州百合多糖片段的制備方法，其特征在于，S6中蘭州百合多糖片段LLPIIa溶液濃度與其抗氧化活性呈一定的量效關系，對四種自由基OH·、DPPH·、O₂^-·和ABTS+·的清除率均大于蘭州百合總多糖，LLPIIa為一種具有抗氧化活性的蘭州百合多糖片段。