[發(fā)明專利]一種插入H7N9的HA蛋白的新城疫病毒重組疫苗株

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201811329076.3
• 申請(qǐng)日: 2018-11-09
• 公開（公告）號(hào): CN109439633B
• 公開（公告）日: 2022-01-07
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李明義;李朝陽(yáng);孫化露;劉陽(yáng);單學(xué)強(qiáng);于澤坤;李思菲;欒志舫;只勇;孫娜娜;顏瑞娟;胡秀香
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 山東信得科技股份有限公司;青島信得藥業(yè)有限公司
• 主分類號(hào): C12N7/01
• 分類號(hào): C12N7/01;C12N15/44;C12N15/63;A61K39/295;A61P31/14;A61P31/16;C12R1/93
• 代理公司: 北京科億知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11350
• 代理人: 湯東鳳

1.一種表達(dá)禽流感H7N9病毒HA蛋白的新城疫病毒株的構(gòu)建方法，其特征在于，所述的構(gòu)建方法如下：

1)構(gòu)建新城疫病毒NDV全基因組轉(zhuǎn)錄質(zhì)粒，所述的轉(zhuǎn)錄質(zhì)粒，其中將H7N9的HA蛋白編碼基因插入到新城疫病毒株NDV基因組的P基因與M基因之間；所述的HA蛋白的核苷酸序列為SEQ ID NO:2；

2)構(gòu)建用于表達(dá)新城疫病毒NP蛋白、P蛋白和L蛋白的輔助重組質(zhì)粒；

3)將構(gòu)建的新城疫病毒NDV全基因組轉(zhuǎn)錄質(zhì)粒和3個(gè)輔助重組質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染表達(dá)T7 RNA聚合酶的細(xì)胞系DF1-T7，培養(yǎng)獲得表達(dá)禽流感H7N9病毒HA蛋白的新城疫病毒株。

2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述的將HA蛋白編碼基因插入到新城疫病毒株NDV基因組的P基因與M基因之間，其一種方法是在新城疫病毒株NDV基因組的第3171nt之后引入Pme I酶切位點(diǎn)，再將H7N9的HA蛋白編構(gòu)建碼基因插入到酶切位點(diǎn)處。

3.一種表達(dá)禽流感H7N9病毒HA蛋白的新城疫病毒株，其特征在于，所述的新城疫病毒株是用權(quán)利要求1-2任一項(xiàng)所述的方法構(gòu)建的。

4.權(quán)利要求3所述的新城疫病毒株在制備疫苗中的應(yīng)用。

5.一種重組疫苗，其特征在于，所述的疫苗其中使用的抗原為權(quán)利要求3所述的新城疫病毒株。