[發明專利]一株具有氨氮降解功能的枯草芽孢桿菌N2及其應用

有效

• 申請號: 201811325758.7
• 申請日: 2018-11-08
• 公開（公告）號: CN109355223B
• 公開（公告）日: 2020-10-09
• 發明（設計）人: 陳償;丁雄祺;謝媚;楊藝瀅;方建相;管云雁;云龍
• 申請（專利權）人: 中國科學院南海海洋研究所
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C02F3/34;C12R1/125;C02F101/16;C02F103/20
• 代理公司: 廣州科粵專利商標代理有限公司 44001
• 代理人: 劉明星;朱聰聰

本發明公開了一株具有氨氮降解功能的枯草芽孢桿菌N2及其應用。該菌是從對蝦養殖水體分離獲得的。研究證實，該枯草芽孢桿菌N2可迅速有效地降低水體中的氨氮含量，并不會將氨氮轉變為亞硝酸鹽再次對養殖對象造成脅迫或傷害；此外，該菌與鹵蟲悉生實驗表明菌株在較高濃度時也不會對養殖動物產生毒害作用，還有一定益生作用；菌株耐受性較廣，鹽度及環境pH對細菌生長影響較小，無論在海水淡水、環境偏酸偏堿所分離菌株N2均能良好生長，并且高效發揮功能；在海水養殖業中意義重大，將該枯草芽孢桿菌N2接種于養殖水體中，水質穩定，養殖對象健康生長，適應性強，安全性高。該菌可作為新型微生態制劑的良好菌株，具有較好的應用前景。

技術領域

本發明涉及微生物技術領域，具體涉及一株具有氨氮降解功能的枯草芽孢桿菌N2及其應用。

背景技術

隨著養殖規模的擴大和養殖密度的提高，環境污染和經濟制約等問題日益嚴重，極大阻礙了水產養殖業的發展。特別是在集約化水產養殖系統中，為追求產量和經濟效益，大量的飼料、肥料以及藥物投入和養殖魚蝦類代謝物沉積，導致池塘內源性污染嚴重，養殖生態環境惡化，殘餌及糞便經微生物分解后產生大量的氨氮，高濃度氨氮對養殖對象具有很強的毒性，往往會導致養殖對象大規模死亡，造成巨大的經濟損失。在報道的文獻中認為一個健康的水體中氨氮濃度不應超過0.2mg/L。因此，篩選能降低水體中氨氮的微生物菌種并應用于水產養殖意義重大。

從上世紀80年代初，我國已開始將微生態制劑應用于水產養殖業，其中最主要的為硝化細菌和反硝化細菌，它們多為光合自養菌，其存在發揮作用起始時間較長，質量不穩定，難以成為優勢菌等缺陷。市售微生態制劑菌株及其功能描述模糊，無科學嚴謹的技術指導，缺乏產品降解氨氮的效果評估，施用后水質改善效果往往微乎其微。而從自然養殖水體中分離到的枯草芽孢桿菌為異養菌，菌株明確，桿菌利用水體中額外添加的碳源作為能源，以氨氮作為氮源同化為自身有機物積累在細菌體內，經檢測及效果評估，質量穩定、安全、無毒副作用、本身就為水體優勢菌，降解氨氮效果顯著，更加適合作為微生態制劑，科學地應用于水產養殖。

發明內容

本發明的目的在于提供一種枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)N2及其應用。所述的枯草芽孢桿菌N2降解氨氮效果顯著，適應性廣，可應用于治理水產養殖水體，穩定水質，且對養殖動物安全。

本發明是通過以下技術方案予以實現的：

本發明是從對蝦養殖水體，通過在基礎培養基(M63)中加入蔗糖等碳源，加入硫酸銨作為氮源，富集含有降氨氮能力的異養細菌，通過相應上述培養基的瓊脂平板進行純化，再次挑單菌落到上述培養基中，挑選出生長速度快降氨氮能力最強的菌株；最后通過16SrDNA分子鑒定，確定為枯草芽孢桿菌屬(Bacillus subtilis)的細菌，命名為枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)N2。

進一步地，對本發明分離得到的枯草芽孢桿菌N2進行氨氮濃度、細菌濃度隨時間變化的分析，其結果表明，該枯草芽孢桿菌N2在菌體生長的過程中將氨氮同化為自身有機物，枯草芽孢桿菌N2的對數生長期為降解氨氮最快的時期，在細菌生長達到穩定期時，水體中氨氮幾乎全部去除。將枯草芽孢桿菌N2作為益生菌以5×10⁶個/mL的量接種于南美白對蝦養殖水體中，氨氮維持在較低水平，對蝦生長良好。

因此，上述的枯草芽孢桿菌N2具有氨氮降解能力，可應用于治理水產養殖水體，降解水產養殖水體中的氨氮，凈化穩定水質。

因此，本發明提供上述的枯草芽孢桿菌N2在降解水體中氨氮的應用。

優選，是降解水產養殖水體中的氨氮的應用。

與現有技術相比，本發明的創新性和有益效果在于：